PM-LGSOC-01 תאים

‏800.00 ‏$*

המוצרים נשלחים קפואים בקרח יבש בתוך צינורות קריוגניים. כל צינור קריוגני מכיל בדרך כלל 3 × 10 ⁶ תאים עבור קווי תאים נצמדים או 5 × 10⁶ תאים עבור קווי תאים בתמיסה (לפרטים נוספים, עיין בתעודת ה-CoA של האצווה).

מחירים לא כולל מיסים בתוספת עלויות משלוח

cryovial

מספר מוצר: 300305

גיליון בטיחות

גיליון מוצר

תעודת ניתוח (CoA)

תיאור	PM-LGSOC-01 הוא קו תאים שמקורו בגרורות פריטונאליות של קרצינומה סרוזית של השחלה בדרגה נמוכה (LGSOC). קו תאים זה הוקם כחלק ממודל מחקר מקיף שכלל גם שתל זר שמקורו בחולה (PDX). יצירת PM-LGSOC-01 כללה השתלה אורתוטופית באמצעות הזרקת תאי גידול תת-צפקית בעכברי SCID/Beige, מה שהוביל למודל PDX של גרורות צפקית (PM) הניתנת להשתלה בשלב מוקדם. ניתוח היסטולוגי אישר כי תאי PM-PDX ו-PM-LGSOC-01 שמרו על דפוסי הצמיחה המיקרו-פפילריים והקריבריפורמיים האופייניים ל-LGSOC, עם התפתחות גידולים וביטוי של סמנים כגון PAX8 ו-WT1. ניתוח גנטי הראה כי הגידול הראשוני, ה-PM, וקו התאים חולקים מוטציה KRAS c.35 G > T (p.Gly12Val), מה שהופך מודל זה לרלוונטי לחקר התקדמות LGSOC ותגובה לטיפול, במיוחד ביחס למסלול MAPK. PM-LGSOC-01 מציג מאפיינים מרכזיים הרלוונטיים למחקר פרה-קליני. זמן הכפלתו הוא כ-42 שעות במעברים המוקדמים, אשר פחת ל-23 שעות בשלבים מאוחרים יותר של תרבית התאים, ונשמר לאורך למעלה מ-100 מעברים במבחנה. קו התאים מפגין מורפולוגיה אפיתלית עם ארגון דמוי אפיתל והדבקה גבוהה בין תאים. עם זאת, הוא מראה תגובה מוגבלת לכימותרפיה מבוססת פלטינה, אך הוא רגיש מאוד לפקליטקסל (IC50: 6.3 ± 2.2 nM). בנוסף, PM-LGSOC-01 רגיש במיוחד למעכב MEK trametinib (IC50: 7.2 ± 0.5 nM), הן במבחנה והן in vivo, מה שמשקף את ההשפעה של מוטציית KRAS על התגובות הטיפוליות. PM-LGSOC-01 משמש ככלי חשוב לחקר LGSOC, במיוחד בהקשר של עמידות לתרופות, יכולת גידולי ו רגישות לטיפולים ממוקדים כמו מעכבי MEK. השימוש בו בפיתוח גישות טיפול מותאמות אישית לסרטן השחלות הסרוזי בדרגה נמוכה הוא קריטי, לאור התגובה הלקויה של LGSOC לכימותרפיה קונבנציונלית בהשוואה לסרטן השחלות הסרוזי בדרגה גבוהה (HGSOC).
אורגניזם	אדם
רקמה	שחלה
מחלה	קרצינומה של השחלה בדרגה נמוכה
אתר גרורתי	צפק
מילים נרדפות	M28/2

גיל	60 שנים
מגדר	נקבה
מורפולוגיה	דמוי אפיתל
תכונות צמיחה	דבק

ציטוט	PM-LGSOC-01 (מספר קטלוגי Cytion 300305)
רמת בטיחות ביולוגית	1
NCBI_TaxID	9606
CellosaurusAccession	CVCL_xx32

פרופיל מוטציוני	מוטציה KRAS c.35 G > T (p.(Gly12Val))

תרבית ביניים	EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2.2 g/L NaHCO3, w: EBSS (מספר קטלוגי Cytion 820100a)
תוספים	הוסף לתמיסה 10% FBS ו-1% NEAA
חומר מפרק	טריפסין/EDTA ומאגר פוספט ללא Ca2+/Mg2+
זמן הכפלה	42 שעות
תת-תרבות	הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
יחס פיצול	מומלץ להשתמש ביחס של 1:20
צפיפות זריעה	1 x 10⁴ תאים/סמ^"ר
חומר הקפאה	כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
הפשרה וגידול תאים	ודא שהבקבוקון נשאר קפוא לחלוטין בעת המסירה, שכן התאים נשלחים בקרח יבש כדי לשמור על טמפרטורה אופטימלית במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, אחסן את הבקבוקון הקריוגני מיד בטמפרטורה נמוכה מ-150°C כדי להבטיח את שמירת שלמות התאים, או המשך לשלב 3 אם נדרשת תרבית מיידית. לצורך תרבית מיידית, הפשיר את הבקבוקון במהירות על ידי טבילתו באמבט מים בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס עם מים נקיים וחומר אנטי-מיקרוביאלי, תוך ערבוב עדין במשך 40-60 שניות עד שנותר גוש קרח קטן. בצע את כל השלבים הבאים בתנאים סטריליים במנדף, וחטא את בקבוקון הקריוואלי באתנול 70% לפני הפתיחה. פתח בזהירות את הבקבוקון המחוטא והעבר את תמיסת התאים לצינור צנטריפוגה בנפח 15 מ"ל המכיל 8 מ"ל של מצע תרבית בטמפרטורת החדר, תוך ערבוב עדין. סובבו את התערובת בצנטריפוגה ב-300 x g למשך 3 דקות כדי להפריד את התאים, וזרקו בזהירות את הנוזל העליון המכיל את שאריות מצע ההקפאה. השרו בעדינות את משקע התאים ב-10 מ"ל של מצע תרבית טרי. עבור תאים נצמדים, חלקו את התמיסה בין שני צלוחיות תרבית T25; עבור תרבויות תמיסה, העבירו את כל המצע לצלוחית T25 אחת כדי לקדם אינטראקציה וצמיחה יעילות של התאים. הקפידו על פרוטוקולי תת-תרבות קבועים להמשך צמיחה ותחזוקה של קו התאים, כדי להבטיח תוצאות ניסוי אמינות.
אטמוספירת דגירה	37°C, 5%_CO2, אווירה לחה.
ציפוי בקבוק	אף אחד
הליך ההקפאה	שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
תנאי משלוח	שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
תנאי אחסון	לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

עקרות	זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה. כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.
פרופיל STR	CSF1PO: 10,11 D13S317: 12,13 D16S539: 10,13 D5S818: 11,12 D7S820: 9,1 TH01: 6,7 TPOX: 8,1 vWA: 15,17 D3S1358: 14,15 D21S11: 28,32 D18S51: 12,17 D8S1179: 13,14 FGA: 23,24 D2S1338: 24,25 D19S433: 12,16 PEZ6: OVCAR3

מספר לוט	סוג התעודה	תאריך	מספר קטלוגי
300305-170723	תעודת ניתוח	23. May. 2025	300305

PM-LGSOC-01 תאים

מידע כללי

מאפיינים

נתונים רגולטוריים

נתונים ביו-מולקולריים

טיפול

בקרת איכות וניתוח מולקולרי

תעודת ניתוח (CoA)