תאי PC-3

‏395.00 ‏$*

המוצרים נשלחים קפואים בקרח יבש בתוך צינורות קריוגניים. כל צינור קריוגני מכיל בדרך כלל 3 × 10 ⁶ תאים עבור קווי תאים נצמדים או 5 × 10⁶ תאים עבור קווי תאים בתמיסה (לפרטים נוספים, עיין בתעודת ה-CoA של האצווה).

מחירים לא כולל מיסים בתוספת עלויות משלוח

cryovial

מספר מוצר: 300312

גיליון בטיחות

גיליון מוצר

תעודת ניתוח (CoA)

תיאור	תאי PC3, שמקורם בגרורות בעצמות של גבר לבן בן 62 עם אדנוקרצינומה של הערמונית בדרגה IV, מהווים אבן דרך במחקר של קרצינומה של הערמונית בבני אדם. קו תאי הסרטן של הערמונית האנושית PC-3 נמצא בשימוש נרחב לחקר ההיבטים המולקולריים והתאיים של סרטן הערמונית, במיוחד בהקשר של מחלה גרורתית. הפוטנציאל הגרורתי הגבוה שלהם הופך אותם למודל חשוב למחקר מתקדם של סרטן הערמונית. כתאים אפיתל, חוסר התגובה של תאי PC3 לאנדרוגנים ועצמאותם מגורמי גדילה טיפוסיים כמו גלוקוקורטיקואידים או גורמי גדילה פיברובלסטיים, מעניקים להם מעמד ייחודי בקרב תאי סרטן הערמונית האנושיים לחקר ההשפעה של קואנימבין וחומרים טיפוליים פוטנציאליים אחרים. היעדר ביטוי של אנטיגן ספציפי לערמונית (PSA) ופעילות נמוכה של טסטוסטרון-5-אלפא רדוקטאז ושל פוספטאז חומצי מבדילים את PC3 ממודלים אחרים של תאי סרטן הערמונית, כמו LNCaP ו-DU145, שהראשון ידוע בביטוי סמנים של הבחנה לומנלית, כגון AR ו-PSA, והשני מייצג פוטנציאל גרורתי מתון של קרצינומה של הערמונית. יתר על כן, תפקידו של קו תאי קרצינומה הערמונית PC3 במחקר תאי גזע סרטן הערמונית מודגש על ידי התצפית שתת-קבוצה יוצרת הולוקלונים של תאי גזע סרטניים. מאפיין זה הופך את קו התאים PC3 למודל קריטי לחקר סביבת הגידול, במיוחד באמצעות מודלים של שתלים זרים, שבהם משתמשים בגידולים של שתלים זרים PC3 כדי לחקור את צמיחת הגידול ואת התגובה לטיפולים in vivo. לסיכום, תאי PC3, שמקורם באדנוקרצינומה של הערמונית בדרגה IV, משמשים מודל מרכזי במחקר סרטן הערמונית בשל הפוטנציאל הגרורתי הגבוה שלהם, העצמאות הייחודית שלהם מאנדרוגנים והמאפיינים התאיים הייחודיים שלהם. הרבגוניות שלהם נעה ממחקרים מולקולריים של גרורות ועד לחקר התגובות הטיפוליות וחקר תאי גזע סרטן הערמונית, מה שהופך אותם למשאב יקר ערך לקידום ההבנה שלנו לגבי המורכבות של קרצינומה של הערמונית והטיפולים האפשריים.
אורגניזם	אדם
רקמה	ערמונית
מחלה	אדנוקרצינומה
אתר גרורתי	עצם
יישומים	מארח טרנספקציה
מילים נרדפות	PC-3, PC.3

גיל	62 שנים
מגדר	זכר
מוצא אתני	קווקזי
מורפולוגיה	דמוי אפיתל
תכונות צמיחה	דבק. התאים יוצרים אשכולות באגר רך וניתן להתאים אותם לגידול בתמיסה

ציטוט	PC3 (מספר קטלוגי Cytion 300312)
רמת בטיחות ביולוגית	1
NCBI_TaxID	9606
CellosaurusAccession	CVCL_0035

ביטוי אנטיגן	HLA A1, A9
Tumorigenic	כן, בעכברים עירומים
קריוטיפ	הקריוטיפ של תאי PC3 בולט בכך שהוא טריפלואידי, ומכיל מספר רב של חריגות כרומוזומליות התורמות לאופיים האגרסיבי.

תרבית ביניים	DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 g/L גלוקוז, w: 2.5 mM L-גלוטמין, w: 15 mM HEPES, w: 0.5 mM נתרן פירובט, w: 1.2 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי Cytion 820400a)
תוספים	הוסף לתווך 5% FBS
חומר מפרק	אקוטאז
זמן הכפלה	40 שעות
תת-תרבות	הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
יחס פיצול	מומלץ להשתמש ביחס של 1:3 עד 1:6
צפיפות זריעה	התחל עם 3 x 10⁴ תאים/סמ^"ר. לאחר התאוששות התאים, השתמש בצפיפות זריעה של 1 x 10⁴ תאים/סמ"^ר לשלבי הפיצול הבאים.
חידוש נוזלים	2 עד 3 פעמים בשבוע
התאוששות לאחר הפשרה	לאחר ההפשרה, צלחת את התאים ב-5 x 10⁴ תאים/סמ"^ר והניח לתאים להתאושש מתהליך ההקפאה ולהידבק למשך 24 שעות לפחות.
חומר הקפאה	כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
הפשרה וגידול תאים	ודא שהבקבוקון נשאר קפוא לחלוטין בעת המסירה, שכן התאים נשלחים בקרח יבש כדי לשמור על טמפרטורה אופטימלית במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, אחסן את הבקבוקון הקריוגני מיד בטמפרטורה נמוכה מ-150°C כדי להבטיח את שמירת שלמות התאים, או המשך לשלב 3 אם נדרשת תרבית מיידית. לצורך תרבית מיידית, הפשיר את הבקבוקון במהירות על ידי טבילתו באמבט מים בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס עם מים נקיים וחומר אנטי-מיקרוביאלי, תוך ערבוב עדין במשך 40-60 שניות עד שנותר גוש קרח קטן. בצע את כל השלבים הבאים בתנאים סטריליים במנדף, וחטא את בקבוקון הקריוואלי באתנול 70% לפני הפתיחה. פתח בזהירות את הבקבוקון המחוטא והעבר את תמיסת התאים לצינור צנטריפוגה בנפח 15 מ"ל המכיל 8 מ"ל של מצע תרבית בטמפרטורת החדר, תוך ערבוב עדין. סובבו את התערובת בצנטריפוגה ב-300 x g למשך 3 דקות כדי להפריד את התאים, וזרקו בזהירות את הנוזל העליון המכיל את שאריות מצע ההקפאה. השרו בעדינות את משקע התאים ב-10 מ"ל של מצע תרבית טרי. עבור תאים נצמדים, חלקו את התמיסה בין שני צלוחיות תרבית T25; עבור תרבויות תמיסה, העבירו את כל המצע לצלוחית T25 אחת כדי לקדם אינטראקציה וצמיחה יעילות של התאים. הקפידו על פרוטוקולי תת-תרבות קבועים להמשך צמיחה ותחזוקה של קו התאים, כדי להבטיח תוצאות ניסוי אמינות.
אטמוספירת דגירה	37°C, 5%_CO2, אווירה לחה.
ציפוי בקבוק	אף אחד
הליך ההקפאה	שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
תנאי משלוח	שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
תנאי אחסון	לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

עקרות	זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה. כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.
פרופיל STR	CSF1PO: 11 D13S317: 11 D16S539: 11 D5S818: 13 D7S820: 8,11 TH01: 6,7 TPOX: 8,9 vWA: 17 D3S1358: 16 D21S11: 29,31.2 D18S51: 14,15 פנטה E: 10,17 פנטה D: 9 D8S1179: 13 FGA: 24 PEZ6: RCC-FG1