תאי P19

‏395.00 ‏$*

המוצרים נשלחים קפואים בקרח יבש בתוך צינורות קריוגניים. כל צינור קריוגני מכיל בדרך כלל 3 × 10 ⁶ תאים עבור קווי תאים נצמדים או 5 × 10⁶ תאים עבור קווי תאים בתמיסה (לפרטים נוספים, עיין בתעודת ה-CoA של האצווה).

מחירים לא כולל מיסים בתוספת עלויות משלוח

cryovial

מספר מוצר: 400416

גיליון בטיחות

גיליון מוצר

תעודת ניתוח (CoA)

תיאור	קו התאים P19, סוג של קרצינומה עוברי פלוריפוטנטי, הושג בתחילה מתראטוקרצינומה בעכבר מזן C3H/He. קו תאים דמוי אפיתל זה מפגין יכולת שיבוט ברמת יעילות גבוהה כאשר הוא גדל במדיום המכיל 0.1mM β-mercaptoethanol. מאפיין בולט של תאי P19 הוא יכולתם להסתגל ולהתמיין לתאי עצב ותאי גליה כאשר הם נחשפים לחומצה רטינואית. במקביל, יש להם פוטנציאל להפוך לשריר לב ושריר שלד כאשר הם נחשפים לדימתיל סולפוקסיד (DMSO). כאשר הם נחשפים הן לחומצה רטינואית והן ל-DMSO, הם מפגינים בעיקר מאפיינים של התמיינות המושרית על ידי חומצה רטינואית. קו התאים P19 מקורו בעכבר (Mus musculus) ומשתייך לקטגוריה הרחבה של Eukaryota, Animalia, Metazoa, Chordata, Vertebrata ו-Tetrapod. התאים מגלמים את המורפולוגיה של רקמת אפיתל שמקורה בעובר, והם קשורים למחלה טרטוקרצינומה. הם משמשים בעיקר ביישומים של תרבית תאים תלת-ממדית בקטגוריית המוצרים של תאים מן החי. תאי סרטן מהווים איום בריאותי משמעותי בשל צמיחתם המהירה והאגרסיבית, אך הם גם מהווים משאב יקר ערך לחוקרים העוסקים בחקר התפתחות תאי סרטן ומחפשים טיפולים ממוקדים יותר. בשנת 1982, קו התאים P19 נוצר כאשר McBurney ו-Rogers השתילו עובר עכבר בן 7.5 ימים באשך כדי לגרום לצמיחת גידול. הם הצליחו לבודד תרבויות תאים מהגידול הראשוני המכיל תאי גזע בלתי מובחנים, המכונים תאי קרצינומה עובריים P19. תאים אלה הפגינו צמיחה מהירה ללא צורך בתאי הזנה והיו קלים לתחזוקה. הזרקה עוקבת לבלסטוציסטים של זן עכברים אחר אישרה את הרב-תכליתיות של תאי P19, שכן רקמות משלושת שכבות הגרעין צמחו בעכבר המקבל. מספר תת-סוגים של קווי תאים נגזרו מתאי P19 המקוריים, כולל P19S18, P19D3, P19RAC65 ו-P19C16. לכל אחד מתתי-סוגים אלה יכולות התמיינות ייחודיות לתאי עצב או תאי שריר כאשר הם מטופלים בחומצה רטינואית או DMSO, בהתאמה. מחקרים עדכניים יותר יצרו קווי תאים שמקורם בתאי P19 מובחנים, אשר, בזכות הפלוריפוטנטיות של תאי P19, יכולים להפוך לתאים דמויי אקטודרם, מזודרם ואנדודרם. תאי P19 ידועים בצמיחתם המתמשכת בתווך המכיל סרום. ניתן לשלוט ביעילות בהבחנה שלהם באמצעות תרופות לא רעילות כגון חומצה רטינואית, מה שמוביל להתפתחות נוירונים, אסטרוגליה ומיקרוגליה. מצד שני, צברים של תאי P19 שנחשפו ל-DMSO מתמיינים לתוצרים אנדודרמליים ומזודרמליים, כולל שריר לב ושריר שלד. תאי P19 ניתנים גם להחדרה עם DNA המקודד גנים רקומביננטיים, וניתן לבודד בקלות שורות יציבות המבטאות גנים אלה. גמישות ורב-תכליתיות זו הופכות את תאי P19 למשאב מצוין לחקר המנגנונים המולקולריים השולטים בהחלטות ההתפתחות של תאים פלוריפוטנטיים מתמיינים.
אורגניזם	עכבר
רקמה	אשך
מחלה	טרטוקרצינומה
מילים נרדפות	P-19

זן/תת-זן	C3H/He
מגדר	זכר
מורפולוגיה	דמוי פיברובלסט
תכונות צמיחה	דבק

ציטוט	P19 (מספר קטלוגי Cytion 400416)
רמת בטיחות ביולוגית	1
NCBI_TaxID	10090
CellosaurusAccession	CVCL_2153

קריוטיפ	N = 40, xY

תרבית ביניים	DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 g/L גלוקוז, w: 2.5 mM L-גלוטמין, w: 15 mM HEPES, w: 0.5 mM נתרן פירובט, w: 1.2 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי Cytion 820400a)
תוספים	הוסף לתווך 10% FBS
חומר מפרק	אקוטאז
תת-תרבות	הסר את המדיום ושטוף את התאים הדבוקים באמצעות PBS ללא סידן ומגנזיום (3-5 מ"ל PBS עבור T25, 5-10 מ"ל עבור צלחות תרבית תאים T75). הוסף TrypleExpress (1-2 מ"ל לכל T25, 2.5 מ"ל לכל צלחת תרבית תאים T75), יש לכסות את יריעת התאים לחלוטין. דגיר בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס למשך 10 דקות. השרו את התאים בזהירות, תוספת של מדיום היא אופציונלית אך לא הכרחית, והעבירו לצלחות חדשות המכילות מדיום טרי. אל תתנו לתאים להישאר צפופים. בצעו תרבית משנה לפחות כל 48 שעות.
יחס פיצול	מומלץ להשתמש ביחס של 1:10
צפיפות זריעה	תת-תרבות לפחות כל 48 שעות
חידוש נוזלים	כל יומיים
חומר הקפאה	כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
הפשרה וגידול תאים	ודא שהבקבוקון נשאר קפוא לחלוטין בעת המסירה, שכן התאים נשלחים בקרח יבש כדי לשמור על טמפרטורה אופטימלית במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, אחסן את הבקבוקון הקריוגני מיד בטמפרטורה נמוכה מ-150°C כדי להבטיח את שמירת שלמות התאים, או המשך לשלב 3 אם נדרשת תרבית מיידית. לצורך תרבית מיידית, הפשיר את הבקבוקון במהירות על ידי טבילתו באמבט מים בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס עם מים נקיים וחומר אנטי-מיקרוביאלי, תוך ערבוב עדין במשך 40-60 שניות עד שנותר גוש קרח קטן. בצע את כל השלבים הבאים בתנאים סטריליים במנדף, וחטא את בקבוקון הקריוואלי באתנול 70% לפני הפתיחה. פתח בזהירות את הבקבוקון המחוטא והעבר את תמיסת התאים לצינור צנטריפוגה בנפח 15 מ"ל המכיל 8 מ"ל של מצע תרבית בטמפרטורת החדר, תוך ערבוב עדין. סובבו את התערובת בצנטריפוגה ב-300 x g למשך 3 דקות כדי להפריד את התאים, וזרקו בזהירות את הנוזל העליון המכיל את שאריות מצע ההקפאה. השרו בעדינות את משקע התאים ב-10 מ"ל של מצע תרבית טרי. עבור תאים נצמדים, חלקו את התמיסה בין שני צלוחיות תרבית T25; עבור תרבויות תמיסה, העבירו את כל המצע לצלוחית T25 אחת כדי לקדם אינטראקציה וצמיחה יעילות של התאים. הקפידו על פרוטוקולי תת-תרבות קבועים להמשך צמיחה ותחזוקה של קו התאים, כדי להבטיח תוצאות ניסוי אמינות.
אטמוספירת דגירה	37°C, 5%_CO2, אווירה לחה.
ציפוי בקבוק	אף אחד
הליך ההקפאה	שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
תנאי משלוח	שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
תנאי אחסון	לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

עקרות	זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה. כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.
פרופיל STR	אמלוגנין: x,x

מספר לוט	סוג התעודה	תאריך	מספר קטלוגי
400416-619	תעודת ניתוח	23. May. 2025	400416

תאי P19

מידע כללי

מאפיינים

נתונים רגולטוריים

נתונים ביו-מולקולריים

טיפול

בקרת איכות / פרופיל גנטי / HLA

תעודת ניתוח (CoA)