תאי NRK-IBB-DiHcRed1

‏800.00 ‏$*

המוצרים נשלחים קפואים בקרח יבש בתוך צינורות קריוגניים. כל צינור קריוגני מכיל בדרך כלל 3 × 10 ⁶ תאים עבור קווי תאים נצמדים או 5 × 10⁶ תאים עבור קווי תאים בתמיסה (לפרטים נוספים, עיין בתעודת ה-CoA של האצווה).

מחירים לא כולל מיסים בתוספת עלויות משלוח

cryovial

מספר מוצר: 500671

גיליון בטיחות

גיליון מוצר

תיאור	NRK-IBB-DiHcRed1 הוא קו תאים מהונדס שמקורו בתאי כליה נורמליים של חולדה (NRK), אשר הונדס כדי לבטא את החלבון הזוהר האדום DiHcRed1. שינוי זה מאפשר לחוקרים לעקוב ולהציג תהליכים תאיים בזמן אמת באמצעות מיקרוסקופיה פלואורסצנטית. הזוהר האדום היציב אידיאלי להדמיית תאים חיים, ומקל על מחקרים בנושא נדידת תאים, חלוקתם ומורפולוגייתם. קו התאים שומר על המאפיינים הטיפוסיים של תאי NRK, כולל מורפולוגיה דמוית אפיתל וריבוי נורמלי, מה שהופך אותו למודל אמין לחקר התנהגות תאים של יונקים. הזוהר האדום מאפשר גם ריבוי עם סמנים אחרים, מה שמשפר את השימוש בו בביולוגיה תאית, מחקר סרטן וסינון תרופות.
אורגניזם	חולדה
רקמה	כליה
מילים נרדפות	NRK IBB-DiHcRed1

זן/תת-זן	אוסבורן מנדל
מורפולוגיה	תאים דמויי פיברובלסטים בעלי צורה פוספורמית
תכונות צמיחה	שכבה אחת, דבוקה

ציטוט	NRK-IBB-DiHcRed1 (מספר קטלוגי Cytion 500671)
רמת בטיחות ביולוגית	1
NCBI_TaxID	10116
CellosaurusAccession	CVCL_AV95
מפקיד	מעבדת אלנברג (EMBL)

קולטנים מבוטאים	פקטור גדילה אפידרמלי (EGF), פעילות מגרה שכפול (MSA)
ביטוי חלבון	IBB-DiHcRed1: מיקום/גן: 1..589 / Pcmv, 656..916 / IBB, 932..1615 , 1670..2356 / HcRed1, 3587..4381 / KanR/NeoR
מוצרים	CMV Promotor IBB (Ribbeck & Gorlich 2002), Neomycin, Phosphotransferase, גורם גדילה אפידרמלי, פעילות מגרה ריבוי

תרבית ביניים	DMEM, w: 4.5 g/L גלוקוז, w: 4 mM L-גלוטמין, w: 3.7 g/L NaHCO3, w: 1.0 mM נתרן פירובט (מספר קטלוגי Cytion 820300a)
תוספים	הוסף לתמיסה 10% FBS, 0.5 מ"ג/מ"ל G418
חומר מפרק	אקוטאז
תת-תרבות	יש להשליך את המדיום הישן ולשטוף את התאים ב-PBS. יש להוסיף תמיסת טריפסין 0.025%/EDTA 0.02% שהוכנה זה עתה, מחוממת ל-37 מעלות צלזיוס, ולהמתין עד שהתאים יתנתקו, מה שלרוב אורך כ-5 דקות. נטרל את הטריפסין על ידי הוספת מדיום טרי, ואז העבר את תערובת התאים לצינור וצנטריפוגה. לאחר הצנטריפוגה, הסר את הנוזל העליון, השעה מחדש את משקע התאים במדיום תרבית טרי, והעבר את התרחיף לבקבוקים חדשים. שלב G418 במדיום התרבית כדי להשיג ריכוז סופי של 0.5 מ"ג/מ"ל
יחס פיצול	מומלץ להשתמש ביחס של 1:3 עד 1:4
צפיפות זריעה	2 עד 4 x 10⁴ תאים/סמ^"ר
חידוש נוזלים	2 עד 3 פעמים בשבוע
חומר הקפאה	כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
הפשרה וגידול תאים	ודא שהבקבוקון נשאר קפוא לחלוטין בעת המסירה, שכן התאים נשלחים בקרח יבש כדי לשמור על טמפרטורה אופטימלית במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, אחסן את הבקבוקון הקריוגני מיד בטמפרטורה נמוכה מ-150°C כדי להבטיח את שמירת שלמות התאים, או המשך לשלב 3 אם נדרשת תרבית מיידית. לצורך תרבית מיידית, הפשיר את הבקבוקון במהירות על ידי טבילתו באמבט מים בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס עם מים נקיים וחומר אנטי-מיקרוביאלי, תוך ערבוב עדין במשך 40-60 שניות עד שנותר גוש קרח קטן. בצע את כל השלבים הבאים בתנאים סטריליים במנדף, וחטא את בקבוקון הקריוואלי באתנול 70% לפני הפתיחה. פתח בזהירות את הבקבוקון המחוטא והעבר את תמיסת התאים לצינור צנטריפוגה בנפח 15 מ"ל המכיל 8 מ"ל של מצע תרבית בטמפרטורת החדר, תוך ערבוב עדין. סובבו את התערובת בצנטריפוגה ב-300 x g למשך 3 דקות כדי להפריד את התאים, וזרקו בזהירות את הנוזל העליון המכיל את שאריות מצע ההקפאה. השרו בעדינות את משקע התאים ב-10 מ"ל של מצע תרבית טרי. עבור תאים נצמדים, חלקו את התמיסה בין שני צלוחיות תרבית T25; עבור תרבויות תמיסה, העבירו את כל המצע לצלוחית T25 אחת כדי לקדם אינטראקציה וצמיחה יעילות של התאים. הקפידו על פרוטוקולי תת-תרבות קבועים להמשך צמיחה ותחזוקה של קו התאים, כדי להבטיח תוצאות ניסוי אמינות.
אטמוספירת דגירה	37°C, 5%_CO2, אווירה לחה.
ציפוי בקבוק	אף אחד
הליך ההקפאה	שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
תנאי משלוח	שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
תנאי אחסון	לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

עקרות	זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה. כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

תאי NRK-IBB-DiHcRed1

מידע כללי

מאפיינים

נתונים רגולטוריים

נתונים ביו-מולקולריים

טיפול

בקרת איכות / פרופיל גנטי / HLA