תאי MLE-12

‏550.00 ‏$*

המוצרים נשלחים קפואים בקרח יבש בתוך צינורות קריוגניים. כל צינור קריוגני מכיל בדרך כלל 3 × 10 ⁶ תאים עבור קווי תאים נצמדים או 5 × 10⁶ תאים עבור קווי תאים בתמיסה (לפרטים נוספים, עיין בתעודת ה-CoA של האצווה).

מחירים לא כולל מיסים בתוספת עלויות משלוח

cryovial

מספר מוצר: 305314

גיליון בטיחות

גיליון מוצר

תעודת ניתוח (CoA)

תיאור	MLE-12 הוא קו תאים אפיתל ריאתי עכברי שהוקם מתאי אפיתל נשימתי דיסטלי באמצעות עכברים טרנסגניים המבטאים את האנטיגן הגדול של נגיף הקוף 40 (SV40) תחת בקרת מקדם החלבון C (SP-C) של חומר פעילי שטח אנושי. קו תאים זה מאופיין ביכולתו לשמור על תכונות מסוימות של תאי אלבולוס מסוג II, כגון ביטוי חלבוני פעילי שטח SP-B ו-SP-C, החיוניים לסינתזת פעילי שטח ריאתיים ולתפקוד הריאות. תאי MLE-12 מציגים גם תכונות מורפולוגיות מרכזיות של תאי אלבולוס מסוג II, כולל מיקרו-וילי וגופים רב-שלפוחיתיים, אם כי הם חסרים תכונות מסוימות כמו גופים למינריים במעברים מאוחרים יותר. קו התאים MLE-12 נמצא בשימוש נרחב לחקר ויסות חלבוני פעילי שטח, הפרשתם ותגובות ריאתיות לגירויים. הוא מפריש פוספוליפידים בתגובה למגוון חומרים מעוררי הפרשה כגון ATP ואסטרים פורבוליים, ומחקה היבטים של תפקוד תאי אלבולוס מסוג II. הפרשה זו חזקה במעברים מוקדמים, אך פוחתת במעברים מאוחרים יותר, יחד עם שינויים בתגובות המתווכות על ידי קולטנים. מודל זה חשוב במיוחד לחקר המנגנונים העומדים בבסיס תסמונות מצוקה נשימתית ומחסור בחומרים פעילי שטח. בנוסף, קו התאים מספק תובנות לגבי קרצינוגנזה ריאתית, בהתחשב במקורו בגידול המונע על ידי SV40. תאי MLE-12 משמשים ככלי להבהרת המסלולים של עיבוד חלבון פעילי שטח ובדיקת אסטרטגיות טיפוליות להחלפת פעילי שטח. שמירתם על ביטוי SP-C, סמן ספציפי לאפיתל האלveolar, הופכת אותם למודל רלוונטי in vitro לחקר תהליכים ומחלות ספציפיים לריאות.
אורגניזם	עכבר
רקמה	ריאה
מחלה	רגיל
מילים נרדפות	MLE 12, MLE12, אפיתל ריאתי עכברי-12

זן/תת-זן	FVB/N-Tg(SFTPC-TAg)5.1Jaw טרנסגני
גיל	5 חודשים
מגדר	נקבה
מורפולוגיה	דמוי אפיתל
סוג התא	תא אפיתל
תכונות צמיחה	דבק

ציטוט	MLE-12 (מספר קטלוגי Cytion 305314)
רמת בטיחות ביולוגית	1
NCBI_TaxID	9606
CellosaurusAccession	CVCL_3751
סטטוס GMO	GMO-S1: קו תאים אפיתל ריאתי עכברי זה (MLE-12) מכיל קונסטרוקט SV40 T-Antigen שהוכנס באמצעות טרנספקציה, התומך בהנצחת תאים אפיתל ריאתיים ראשוניים. התוספת משולבת באופן יציב. סיווג זה חל רק בגרמניה ועשוי להיות שונה במקומות אחרים.

ביטוי חלבון	גנים שבאים לידי ביטוי: חלבוני פעילי שטח ריאתיים B, C (SP-B, SP-C)
Tumorigenic	כן, בעכברים עירומים
נגיפים	טרנספורמנט: נגיף סימיאן 40 (SV40)

תרבית ביניים	DMEM, w: 4.5 g/L גלוקוז, w: 4 mM L-גלוטמין, w: 3.7 g/L NaHCO3, w: 1.0 mM נתרן פירובט (מספר קטלוגי Cytion 820300a)
תוספים	הוסף לתווך 10% FBS
חומר מפרק	אקוטאז
תת-תרבות	הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
חידוש נוזלים	פעמיים בשבוע
חומר הקפאה	כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
הפשרה וגידול תאים	ודא שהבקבוקון נשאר קפוא לחלוטין בעת המסירה, שכן התאים נשלחים בקרח יבש כדי לשמור על טמפרטורה אופטימלית במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, אחסן את הבקבוקון הקריוגני מיד בטמפרטורה נמוכה מ-150°C כדי להבטיח את שמירת שלמות התאים, או המשך לשלב 3 אם נדרשת תרבית מיידית. לצורך תרבית מיידית, הפשיר את הבקבוקון במהירות על ידי טבילתו באמבט מים בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס עם מים נקיים וחומר אנטי-מיקרוביאלי, תוך ערבוב עדין במשך 40-60 שניות עד שנותר גוש קרח קטן. בצע את כל השלבים הבאים בתנאים סטריליים במנדף, וחטא את בקבוקון הקריוואלי באתנול 70% לפני הפתיחה. פתח בזהירות את הבקבוקון המחוטא והעבר את תמיסת התאים לצינור צנטריפוגה בנפח 15 מ"ל המכיל 8 מ"ל של מצע תרבית בטמפרטורת החדר, תוך ערבוב עדין. סובבו את התערובת בצנטריפוגה ב-300 x g למשך 3 דקות כדי להפריד את התאים, וזרקו בזהירות את הנוזל העליון המכיל את שאריות מצע ההקפאה. השרו בעדינות את משקע התאים ב-10 מ"ל של מצע תרבית טרי. עבור תאים נצמדים, חלקו את התמיסה בין שני צלוחיות תרבית T25; עבור תרבויות תמיסה, העבירו את כל המצע לצלוחית T25 אחת כדי לקדם אינטראקציה וצמיחה יעילות של התאים. הקפידו על פרוטוקולי תת-תרבות קבועים להמשך צמיחה ותחזוקה של קו התאים, כדי להבטיח תוצאות ניסוי אמינות.
אטמוספירת דגירה	37°C, 5%_CO2, אווירה לחה.
ציפוי בקבוק	אף אחד
הליך ההקפאה	שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
תנאי משלוח	שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
תנאי אחסון	לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

עקרות	זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה. כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

מספר לוט	סוג התעודה	תאריך	מספר קטלוגי
305314-081124	תעודת ניתוח	23. May. 2025	305314
305314-170625	תעודת ניתוח	18. Aug. 2025	305314
305314-180625	תעודת ניתוח	18. Aug. 2025	305314

תאי MLE-12

מידע כללי

מאפיינים

נתונים רגולטוריים

נתונים ביו-מולקולריים

טיפול

בקרת איכות / פרופיל גנטי / HLA

תעודת ניתוח (CoA)