תאי MHCC-97H-Luc
מידע כללי
| תיאור | MHCC-97H-Luc הוא נגזרת ביולומינסצנטית של קו התאים האנושי MHCC-97H של קרצינומה הפטוצלולרית, שהונדס כך שיבטא באופן יציב גן-דיווח של לוקיפרז של גחלילית. קו התאים ההורי MHCC-97H הוקם מתוך קרצינומה הפטוצלולרית אצל מטופל סיני בן 39, והוא מאופיין בפוטנציאל גרורתי גבוה, כפי שמשתקף מהגדרתו כתת-קו בעל גרורות גבוהות בסדרת MHCC97. תאי MHCC-97H קשורים לשינוי גנטי הנגרם על ידי נגיף הפטיטיס B (HBV) ומפגינים התנהגות פולשנית אגרסיבית, מה שהופך אותם למודל רלוונטי קלינית לחקר קרצינומה הפטוצלולרית בעלת גרורות רבות ואסטרטגיות טיפוליות המכוונות לפלישה ולהתפשטות. השילוב היציב של לוקיפרז ב-MHCC-97H-Luc מאפשר הדמיה רגישה ולא פולשנית באמצעות ביולומיננס (BLI) של עומס הגידול בהשתלת כבד אורתוטופית ובמודלים של שתל זר תת-עורי, תוך שימוש במאכסנים בעלי מערכת חיסונית מוחלשת. האות הנפלט מתואם למספר תאי הגידול החיים, מה שמאפשר מעקב ארוך טווח אחר השתלת הגידול, התפשטות תוך-כבדית וגרורות מרוחקות. MHCC-97H-Luc הוא בעל ערך רב במיוחד להערכה in vivo של חומרים נוגדי גרורות, מעכבי קינאז וטיפולים ממוקדים חדשניים נגד קרצינומה הפטוצלולרית בעלת יכולת פלישה גבוהה, כמו גם לחקירת האינטראקציות בסביבת המיקרו-סביבה של הגידול והמנגנונים המולקולריים העומדים בבסיס גרורות HCC. MHCC-97H-Luc שומר על הפוטנציאל הגרורתי הגבוה ועל המאפיינים המולקולריים הקשורים ל-HBV של קו ה-MHCC-97H ההורי, ומספק פלטפורמה פרה-קלינית רלוונטית ואגרסיבית למחקר קרצינומה הפטוצלולרית. הרפורט לוצ'יפרז משפר את הרגישות הניסויית ומאפשר הערכה פרמקודינמית בזמן אמת. על החוקרים לאמת את פעילות הלוציפרז, את דפוס הגרורות ואת קינטיקת הצמיחה בתנאי הניסוי הספציפיים שלהם, לפני שימוש בקנה מידה גדול in vivo. |
|---|---|
| אורגניזם | אדם |
| רקמה | כבד |
| מחלה | קרצינומה הפטוצלולרית במבוגרים |
| מילים נרדפות | MHCC 97-H, MHCC97-H, MHCC97H |
מאפיינים
| גיל | 39 שנים |
|---|---|
| מגדר | זכר |
| מוצא אתני | סינית |
| מורפולוגיה | דמוי אפיתל |
| סוג התא | דמוי תאי כבד |
| תכונות צמיחה | דבק |
נתונים רגולטוריים
| ציטוט | MHCC-97H-Luc (מספר קטלוג Cytion 305687) |
|---|---|
| רמת בטיחות ביולוגית | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_4972 |
נתונים ביו-מולקולריים
| ביטוי אנטיגן | Luc2 (גחלילית, מותאם לקודונים) |
|---|---|
| Tumorigenic | פוטנציאל גרורתי גבוה |
| נגיפים | טרנספורמנט: נגיף הפטיטיס B (HBV) |
טיפול
| תרבית ביניים | DMEM |
|---|---|
| תוספים | הוסף לתווך 10% FBS |
| חומר מפרק | אקוטאז |
| תת-תרבות | הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי. |
| יחס פיצול | 1 עד 3 |
| צפיפות זריעה | 1 עד 3 x 104 תאים/סמ"ר |
| חידוש נוזלים | 2 עד 3 פעמים בשבוע |
| חומר הקפאה | כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה. |
| הפשרה וגידול תאים |
|
| אטמוספירת דגירה | 37°C, 5%CO2, אווירה לחה. |
| תנאי משלוח | שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים. |
| תנאי אחסון | לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי. |