תאי LS513

‏550.00 ‏$*

המוצרים נשלחים קפואים בקרח יבש בתוך צינורות קריוגניים. כל צינור קריוגני מכיל בדרך כלל 3 × 10 ⁶ תאים עבור קווי תאים נצמדים או 5 × 10⁶ תאים עבור קווי תאים בתמיסה (לפרטים נוספים, עיין בתעודת ה-CoA של האצווה).

מחירים לא כולל מיסים בתוספת עלויות משלוח

cryovial

מספר מוצר: 300457

גיליון בטיחות

גיליון מוצר

תעודת ניתוח (CoA)

תיאור	קו התאים LS513 הוא מודל מאופיין היטב של קרצינומה של המעי הגס, שמקורו בביופסיה של גידול ראשוני שנלקחה בשנת 1985 מחולה גבר לבן בן 63. הגידול סווג כקרצינומה של המעי העיוור המפרישה מוקוזין מסוג Dukes C, הממוקמת בשסתום Bauhin. תאי LS513 הם בעלי אופי הדבקתי והוכיחו עמידות לתרופות מרובות (MDR), מה שהופך אותם למודל חשוב לחקר מנגנוני עמידות לתרופות בסרטן המעי הגס. תאים אלה מפגינים יעילות של 30% ביצירת מושבות במתילצלולוזה והם ממאירים בעכברים עירומים, מה שמאשר עוד יותר את השימוש בהם במחקרים אונקוגניים. ברמה הגנטית, תאי LS513 מבטאים מספר מאפיינים בולטים. הם חיוביים לאונקוגן p53 מסוג wild-type ומבטאים אנטיגן קרצינו-עוברי (CEA) בכ-50% מהתאים. בנוסף, תאי LS513 מבטאים אנטיגנים מסוג MHC (Major Histocompatibility Complex) מסוג I, כולל HLA ו-beta 2 microglobulin, אך חסרים אנטיגנים מסוג MHC מסוג II (HLA-DR, DQ ו-DP). התאים מייצרים גם גורם גדילה טרנספורמטיבי בטא 1 (TGF beta-1) בקצב של 83 pg ל-10⁶ תאים ב-24 שעות. יש לציין כי TGF בטא-1 פועל כמעכב של התרבות תאי LS513, בעוד ש-TGF בטא-2 אינו משפיע באופן משמעותי על צמיחתם. בהשוואה לקו התאים LS1034, תאי LS513 רגישים פי 100 פחות ל-TGF בטא-1, מה שמעיד על תגובות שונות לאיתות גורם הצמיחה בין שני מודלים אלה של קרצינומה של המעי הגס. תאי LS513 מציגים פרופיל ייחודי של ביטוי אנטיגן, עם חיוביות חזקה למולקולת הדבקה בין-תאית 1 (ICAM-1) ולאנטיגנים מסוג HLA class I. היעדר ביטוי אנטיגן MHC class II ראוי לציון במיוחד, שכן הוא מצביע על מנגנוני התחמקות חיסונית פוטנציאליים העשויים להיות רלוונטיים להתקדמות סרטן המעי הגס ולגרורות. תכונות אלה, יחד עם עמידותם לתרופות מרובות ויכולתם ליצור גידולים בעכברים עם מערכת חיסונית מוחלשת, הופכות את תאי LS513 לכלי רב עוצמה לחקר הבסיס המולקולרי והתאי של סרטן המעי הגס, במיוחד בהקשר של אינטראקציות חיסוניות ועמידות טיפולית.
אורגניזם	אדם
רקמה	קולורקטלי
מחלה	אדנוקרצינומה
מילים נרדפות	LS513, LS 513

גיל	63 שנים
מגדר	זכר
מוצא אתני	קווקזי
מורפולוגיה	דמוי אפיתל
תכונות צמיחה	דבק

ציטוט	LS513 (מספר קטלוגי Cytion 300457)
רמת בטיחות ביולוגית	1
NCBI_TaxID	9606
CellosaurusAccession	CVCL_1386

ביטוי חלבון	CEA+ (50%), p53+
ביטוי אנטיגן	אנטיגן קרצינו-עוברי (CEA), ICAM-1, HLA סוג I חיובי
Tumorigenic	כן, יוצר גידולים בעכברים עירומים
מוצרים	פקטור גדילה טרנספורמטיבי בטא 1 (TGF בטא-1, 83 pg לכל 10 exp6 תאים ב-24 שעות)
קריוטיפ	ניתן להבחין בשני קווי גזע. הקו העיקרי היה מיוצג ב-65% מהתאים, עם מספר מודאלי של 51,xY ו-3 סמנים, M1 - der(1)t(1,15), M2 - der(2)t(2,3)der(3)t(2,3), M3, ומונוזומיה 15. הקו השני של תאי גזע היה בעל מספר כרומוזומים מודאלי של 52,xY והציג M2 ו-M3 בתוספת איזוכרומוזום לזרוע הארוכה של כרומוזום 1 המכונה M4. טריזומיה 5,7, טטרזומיה 13 ומונוזומיה 2 ו-3 היו נוכחים בכל התאים שנבדקו, הקו לא הציג מונוזומיה 15.

תרבית ביניים	DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 g/L גלוקוז, w: 2.5 mM L-גלוטמין, w: 15 mM HEPES, w: 0.5 mM נתרן פירובט, w: 1.2 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי Cytion 820400a)
תוספים	הוסף לתווך 10% FBS
חומר מפרק	אקוטאז
תת-תרבות	הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
צפיפות זריעה	1 x 10⁴ תאים/סמ^"ר
חידוש נוזלים	כל 3 ימים
התאוששות לאחר הפשרה	לאחר ההפשרה, צלחת את התאים ב-5 x 10⁴ תאים/סמ"^ר והניח לתאים להתאושש מתהליך ההקפאה ולהידבק למשך 24 שעות לפחות.
חומר הקפאה	כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
הפשרה וגידול תאים	ודא שהבקבוקון נשאר קפוא לחלוטין בעת המסירה, שכן התאים נשלחים בקרח יבש כדי לשמור על טמפרטורה אופטימלית במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, אחסן את הבקבוקון הקריוגני מיד בטמפרטורה נמוכה מ-150°C כדי להבטיח את שמירת שלמות התאים, או המשך לשלב 3 אם נדרשת תרבית מיידית. לצורך תרבית מיידית, הפשיר את הבקבוקון במהירות על ידי טבילתו באמבט מים בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס עם מים נקיים וחומר אנטי-מיקרוביאלי, תוך ערבוב עדין במשך 40-60 שניות עד שנותר גוש קרח קטן. בצע את כל השלבים הבאים בתנאים סטריליים במנדף, וחטא את בקבוקון הקריוואלי באתנול 70% לפני הפתיחה. פתח בזהירות את הבקבוקון המחוטא והעבר את תמיסת התאים לצינור צנטריפוגה בנפח 15 מ"ל המכיל 8 מ"ל של מצע תרבית בטמפרטורת החדר, תוך ערבוב עדין. סובבו את התערובת בצנטריפוגה ב-300 x g למשך 3 דקות כדי להפריד את התאים, וזרקו בזהירות את הנוזל העליון המכיל את שאריות מצע ההקפאה. השרו בעדינות את משקע התאים ב-10 מ"ל של מצע תרבית טרי. עבור תאים נצמדים, חלקו את התמיסה בין שני צלוחיות תרבית T25; עבור תרבויות תמיסה, העבירו את כל המצע לצלוחית T25 אחת כדי לקדם אינטראקציה וצמיחה יעילות של התאים. הקפידו על פרוטוקולי תת-תרבות קבועים להמשך צמיחה ותחזוקה של קו התאים, כדי להבטיח תוצאות ניסוי אמינות.
אטמוספירת דגירה	37°C, 5%_CO2, אווירה לחה.
ציפוי בקבוק	אף אחד
הליך ההקפאה	שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
תנאי משלוח	שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
תנאי אחסון	לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

עקרות	זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה. כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.
אללים HLA	A: '32:01:01 B: '51:01:01 C: 01:02:01 DRB1: 11:01:01 DQA1: 05:05:01 DQB1: 03:01:01 DPB1*: 04:01:01 E: 01:01:01

מספר לוט	סוג התעודה	תאריך	מספר קטלוגי
300457-512	תעודת ניתוח	15. Jan. 2026	300457
300457-201125	תעודת ניתוח	15. Jan. 2026	300457

תאי LS513

מידע כללי

מאפיינים

נתונים רגולטוריים

נתונים ביו-מולקולריים

טיפול

בקרת איכות / פרופיל גנטי / HLA

תעודת ניתוח (CoA)