תאי LS174T
395.00 $*
המוצרים נשלחים קפואים בקרח יבש בתוך צינורות קריוגניים. כל צינור קריוגני מכיל בדרך כלל 3 × 10 6 תאים עבור קווי תאים נצמדים או 5 × 106 תאים עבור קווי תאים בתמיסה (לפרטים נוספים, עיין בתעודת ה-CoA של האצווה).
מידע כללי
| תיאור | קו התאים LS147T הוא וריאנט של LS-180, ושניהם נגזרים מאדנוקרצינומה מסוג B של המעי הגס מסוג Duke's, שנמצאה בחולה לבנה בת 58. קו התאים LS-180 המקורי הוקם על ידי תרבית של רקמת הגידול הקצוצה במשך 10 חודשים. LS-147T, יחד עם קו התאים המקורי, בולט בביטוי של מספר אונקוגנים, כולל myc, myb, ras ו-fos, בעוד שהוא שלילי לאחרים, כמו sis, abl ו-ros. קו זה מבטא גם רמות גבוהות של אנטיגן קרצינו-עוברי (CEA), אינטרלוקין 6 (IL-6) ואינטרלוקין 10 (IL-10), שהם סמנים חשובים ויעדים פוטנציאליים במחקר סרטן המעי הגס. תאים אלה מציגים מספר מאפיינים מרכזיים של תאי אפיתל המעי הגס, כולל מיקרו-וילי עשירים וואקואולות מוקין תוך-ציטופלזמטיות, המאפיינים בדרך כלל תאים מפרישים ברירית המעי הגס. מחקרים במיקרוסקופ אלקטרוני אישרו פרטים מבניים אלה, מה שמחזק עוד יותר את מקורם ואת מצב ההבחנה שלהם. חשוב לציין שתאי LS-147T הוכחו כגורמים לגידולים בעכברים חסרי מערכת חיסונית, ויוצרים גידולים באופן עקבי כאשר הם מוחדרים תת-עורית בצפיפות תאים גבוהה, מה שמאשר את הפוטנציאל הממאיר שלהם. יתר על כן, קו התאים LS-147T הוא בעל ערך רב במחקרים המתמקדים בהיבטים המולקולריים והאימונולוגיים של סרטן המעי הגס. דווח כי קו זה קל יותר לתרבית משנה בהשוואה לקו האב שלו, LS-180, מה שהופך אותו לבחירה מעשית יותר למחקרים ארוכי טווח. הייצור המסיבי של CEA על ידי תאים אלה, שהוא גבוה משמעותית מזה של קווים מבוססים אחרים כמו HT-29, הופך את LS-147T למודל קריטי להבנת הדינמיקה של סמני הגידול ולחקר טיפולים ממוקדים בסרטן המעי הגס. |
|---|---|
| אורגניזם | אדם |
| רקמה | קולון |
| מחלה | אדנוקרצינומה |
| מילים נרדפות | Ls174T, LS174t, Ls-174-T, LS-174-T, LS 174 T, LS174T, Ls-174T, LS 174T, LS-174, LS174 |
מאפיינים
| גיל | 58 שנים |
|---|---|
| מגדר | נקבה |
| מוצא אתני | קווקזי |
| מורפולוגיה | דמוי אפיתל |
| תכונות צמיחה | דבק |
נתונים רגולטוריים
| ציטוט | LS174T (מספר קטלוגי Cytion 300392) |
|---|---|
| רמת בטיחות ביולוגית | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_1384 |
נתונים ביו-מולקולריים
| ביטוי חלבון | אנטיגן 3 +, CEA +, p53 -, GFAP -, ביטוי mRNA + |
|---|---|
| ביטוי אנטיגן | HLA A2, B13, B50, סוג דם O |
| איזואנזימים | ADA, 1: G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 2, PGD, A, ES-D, 1, PEP-D, 1 |
| אונקוגנים | Myc +, myb +, ras +, fos +, p53 +, sis -, abl -, ros -, src - |
| Tumorigenic | כן, בעכברים עירומים |
| טרנסקריפטאז הפוך | שלילי |
| מוצרים | אנטיגן קרצינו-עוברי (CEA) 1944 ng/106 תאים ב-10 ימים, מוציין, אינטרלוקין-10 (IL-10), אינטרלוקין-6 (IL-6) |
| פרופיל מוטציוני | תאי LS-174T נושאים מוטציה בקודון 12 של הגן Kras: GGT(Wt Gly) >GAT(Asp) |
| קריוטיפ | 45,x עם כרומוזום x אחד חסר אך ללא חריגות כרומוזומליות אחרות |
טיפול
| תרבית ביניים | EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2.2 g/L NaHCO3, w: EBSS (מספר קטלוגי Cytion 820100a) |
|---|---|
| תוספים | הוסף לתמיסה 10% FBS ו-1% NEAA |
| חומר מפרק | אקוטאז |
| תת-תרבות | הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי. |
| צפיפות זריעה | 5 עד 8 x 104 תאים/סמ"ר |
| חידוש נוזלים | 2 עד 3 פעמים בשבוע |
| התאוששות לאחר הפשרה | לאחר ההפשרה, צלחת את התאים ב-5 x 104 תאים/סמ"ר והניח לתאים להתאושש מתהליך ההקפאה ולהידבק למשך 24 שעות לפחות. |
| חומר הקפאה | כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה. |
| הפשרה וגידול תאים |
|
| אטמוספירת דגירה | 37°C, 5%CO2, אווירה לחה. |
| ציפוי בקבוק | אף אחד |
| הליך ההקפאה | שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים. |
| תנאי משלוח | שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים. |
| תנאי אחסון | לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי. |
בקרת איכות / פרופיל גנטי / HLA
| עקרות | זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה. כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות. |
|---|---|
| אללים HLA |
A*: '02:xx, '30:01:01
B*: '13:xx, '35:01:01
C*: '04:01:01, '06:xx
DRB1*: 04:02:01, 07:01:01
DQA1*: '02:01:01, '03:01:01
DQB1*: '02:02:01, '03:02:01
DPB1*: '03:01:01G, '04:01:01
E: 01:01, 01:03
|
תעודת ניתוח (CoA)
| מספר לוט | סוג התעודה | תאריך | מספר קטלוגי |
|---|---|---|---|
| 300392-512 | תעודת ניתוח | 23. May. 2025 | 300392 |
| 300392-070225 | תעודת ניתוח | 23. May. 2025 | 300392 |
| 300392-410, -412, -414 | תעודת ניתוח | 05. Dec. 2025 | 300392 |