תאי LLC-PK1
395.00 $*
המוצרים נשלחים קפואים בקרח יבש בתוך צינורות קריוגניים. כל צינור קריוגני מכיל בדרך כלל 3 × 10 6 תאים עבור קווי תאים נצמדים או 5 × 106 תאים עבור קווי תאים בתמיסה (לפרטים נוספים, עיין בתעודת ה-CoA של האצווה).
מידע כללי
| תיאור | תאי LLC-PK1 הם קו תאים מבוסס ומוכר הנמצא בשימוש נרחב במחקר ביו-רפואי. תאים אלה נגזרו מכליות של חזיר זכר בריא, והם מציגים מורפולוגיה אפיתלית טיפוסית. קו התאים LLC-PK1 הוא קוטבי ומכיל חיבורים הדוקים, מה שהופך אותו למודל אידיאלי לרקמת אפיתל. אחת התכונות החשובות של תאי LLC-PK1 היא יכולתם לייצר מפעיל פלסמינוגן, חומר המגרה פיברינוליזה. תכונה זו הפכה את תאי LLC-PK1 ליקרים במיוחד במחקר על פקקת. בשנים האחרונות, מפעיל פלסמינוגן נכלל בתרופות המשמשות לטיפול בפקקת, מכיוון שהוא מסייע בפירוק קרישי דם קטנים. בנוסף לייצור מפעילים פלסמינוגנים, תאי LLC-PK1 מייצרים כמויות גדולות של ציטוקראטין. תכונה זו הפכה אותם לפופולריים במחקרים פרמקולוגיים ומטבוליים שונים. קו LLC-PK1 שימש במחקרים על מטבוליזם, הובלה, רעילות ואינטראקציה של תרופות. תאי LLC-PK1 משמשים גם לעתים קרובות בבדיקות חדירות. מנגנון הובלת האורציל שונה בהתאם לקווי התאים, עם מערכת בלתי תלויה ב-Na+ בקרום הבזולטרלי בתאי Caco-2 ומערכות תלויות Na+ ובלתי תלויות Na+ בקרום האפיטי בתאי LLC-PK1. בהשוואה לקווי תאים אחרים, תאי LLC-PK1 חולקים מאפיינים רבים של תאי צינור פרוקסימליים in vivo, כולל מיקרו-וילי על הממברנה האפיקלית, פעילות גבוהה של אנזימי הממברנה האפיקלית וביטוי של קולטני הורמון יותרת התריס ומובילי גלוקוז תלויי נתרן. זה הופך את תאי LLC-PK1 לכלי חשוב במחקרים טוקסיקולוגיים של הכליות. קו תאים נוסף הנפוץ במחקרים בתחום הטוקסיקולוגיה הכלייתית הוא קו התאים MDCK. כמו תאי LLC-PK1, תאי MDCK הם תאים אפיתל, אך הם בעלי מאפיינים האופייניים יותר לתאים צינוריים דיסטליים. הם מבטאים קולטני וזופרסין, אוקסיטוצין ופרוסטגלנדין, אשר כאשר הם מגורים, מפעילים אדנילט ציקלאז. קווי התאים LLC-PK1 ו-MDCK מתרבים במהירות וניתן להעבירם בקלות לדורות רבים בתרבויות חד-שכבתיות. תאי LLC-PK1 מסוגלים גם ליצור 'כיפות', שלפוחיות מלאות בנוזל הנוצרות כתוצאה מהובלת מים וממסים, חיבורים הדוקים והידבקות התאים למצע. לסיכום, קו התאים LLC-PK1 הוא כלי רב-תכליתי ויקר ערך למחקר ביו-רפואי. הוא נמצא בשימוש נרחב במחקרים שונים על מטבוליזם של תרופות, הובלת תרופות, רעילות תרופות, אינטראקציות בין תרופות, טוקסיקולוגיה כלית ובדיקות חדירות. עם המורפולוגיה האפיתלית המוכחת שלו וייצור פלסמינוגן אקטיベーター וציטוקראטין, תאי LLC-PK1 הם מודל אידיאלי לרקמת אפיתל. |
|---|---|
| אורגניזם | Sus Scrofa |
| רקמה | כליה |
| יישומים | מטבוליזם של תרופות, בדיקות חדירות, רעילות ומחקרי אינטראקציה. |
| מילים נרדפות | LLC-PK(1), LLC-PK-1, LLC PK-1, LLc-PK1, LLC PK1, LLCPK1, מעבדות לילי Cell-Porcine Kidney 1 |
מאפיינים
| זן/תת-זן | המפשייר |
|---|---|
| גיל | 3-4 שבועות |
| מגדר | זכר |
| מורפולוגיה | דמוי אפיתל |
| תכונות צמיחה | דבק |
נתונים רגולטוריים
| ציטוט | LLC-PK1 (מספר קטלוגי Cytion 607264) |
|---|---|
| רמת בטיחות ביולוגית | קו התאים מכיל רצפים ותעתיקים של נגיף סרטן מסוג C של חזירים (PCOV). אופן ההדבקה אינו ידוע, ולא ניתן לשלול הפרשת נגיפים. בגרמניה, נגיפים אלה מסווגים כ-BSL 1 עבור בני אדם ו-BSL 2 עבור בעלי חיים (TRBA 462). עם זאת, הוועדה המרכזית הגרמנית לבטיחות ביולוגית (ZKBS) מסווגת נגיפים אלה וקווי תאים נגועים כ-BSL 2 עבור יישומים של שינוי גנטי. |
| NCBI_TaxID | 9823 |
| CellosaurusAccession | CVCL_0391 |
נתונים ביו-מולקולריים
| נגיפים | מכיל רצפים ותמלילים של נגיף סרטן מסוג C בחזירים (PCOV). לא ניתן לשלול ביטוי של הנגיף. |
|---|---|
| מוצרים | מפעיל פלסמינוגן |
טיפול
| תרבית ביניים | מדיום 199, w: 2.7 mM גלוטמין יציב, w: 2.2 g/L NaHCO3, w: EBSS (מספר קטלוגי Cytion 820101a) |
|---|---|
| תוספים | הוסף לתווך 3% FBS |
| חומר מפרק | אקוטאז |
| תת-תרבות | אסוף את תאי התרחיף בצינור של 15 מ"ל ושטוף בעדינות את התאים הנצמדים עם PBS ללא סידן ומגנזיום (השתמש ב-3-5 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-5-10 מ"ל עבור בקבוקי T75). החל Accutase (1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25, 2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75) תוך הקפדה על כיסוי מלא של שכבת התאים. אפשר לתאים להתפתח בטמפרטורת החדר למשך 10 דקות. לאחר ההתפתחות, שלב וצנטריפוג את התאים המרחפים והדבוקים. לאחר הצנטריפוגה, השב בזהירות את משקע התאים והעבר את תמיסת התאים לבקבוקים חדשים המכילים מדיום טרי. |
| צפיפות זריעה | 1 עד 3 x 106 תאים/סמ"ר |
| חידוש נוזלים | כל 3 ימים |
| התאוששות לאחר הפשרה | לאחר ההפשרה, צלחת את התאים ב-5 x 104 תאים/סמ"ר והניח לתאים להתאושש מתהליך ההקפאה ולהידבק למשך 24 שעות לפחות. |
| חומר הקפאה | כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה. |
| הפשרה וגידול תאים |
|
| אטמוספירת דגירה | 37°C, 5%CO2, אווירה לחה. |
| ציפוי בקבוק | אף אחד |
| הליך ההקפאה | שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים. |
| תנאי משלוח | שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים. |
| תנאי אחסון | לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי. |
בקרת איכות וניתוח מולקולרי
| עקרות | זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה. כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות. |
|---|
תעודת ניתוח (CoA)
| מספר לוט | סוג התעודה | תאריך | מספר קטלוגי |
|---|---|---|---|
| 607264-030725 | תעודת ניתוח | 18. Aug. 2025 | 607264 |