תאי L-WRN

Name: CLS Cell Lines Service GmbH
Address: Dr.-Eckener-Straße 8, Eppelheim, 69214, DE
Telephone: +496221405780
Price range: €€€

‏395.00 ‏$*

מחירים לא כולל מיסים בתוספת עלויות משלוח

מבחנה קריוגנית

מספר מוצר: 300641

גיליון בטיחות

גיליון מוצר

תעודת ניתוח (CoA)

תיאור	קו התאים L-WRN הוא קו תאים פיברובלסטיים עכבריים שמקורם בתאי L, שהם פיברובלסטים עכבריים שבודדו במקור מרקמת חיבור. תאי L-WRN הונדסו כך שיבטאו באופן יציב את Wnt3a, R-spondin 3 ו-Noggin. גורמים אלה חיוניים לצמיחה ולתחזוקה של אורגנואידים מעיים ותרבויות תאי גזע. הביטוי העודף של חלבונים אלה משפר את התרבות והתמיינות תאי גזע במעי, מה שהופך את תאי L-WRN לכלי חשוב לחקר הביולוגיה של המעי ולמודלים של מחלות. בנוסף ליישומם בתרבית אורגנואידים, תאי L-WRN משמשים כמודל יציב לחקר מסלולי איתות Wnt. איתות Wnt הוא מרכזי בוויסות גורל התאים, התרבותם והגירתם במהלך ההתפתחות וברקמות בוגרות. על ידי אספקה של מקור עקבי ומבוקר של Wnt3a, R-spondin 3 ו-Noggin, תאי L-WRN מקלים על המחקר של המנגנונים המולקולריים העומדים בבסיס תהליכים אלה. חוקרים יכולים להשתמש בתאים אלה כדי לנתח את תפקידי מולקולות איתות אלה בהקשרים ביולוגיים שונים, כולל סרטן, התחדשות רקמות וביולוגיה התפתחותית. בסך הכל, קו התאים L-WRN הוא כלי רב עוצמה במחקר ביו-רפואי בשל יכולתו לתמוך בצמיחת תרבויות תלת-ממדיות מורכבות ושימושיותו בחקר מסלולי איתות מרכזיים. תפקידו בקידום מחקר תאי גזע במעי ותרומתו להבנת איתות Wnt מדגישים את חשיבותו בתחום הביולוגיה התאית והמולקולרית.
אורגניזם	עכבר
רקמה	רקמת חיבור
יישומים	תרבות תאים תלת-ממדית

זן/תת-זן	C3H/An
גיל	100 ימים
מגדר	זכר
מורפולוגיה	פיברובלסט
תכונות צמיחה	דבק

ציטוט	L-WRN (מספר קטלוגי Cytion 300641)
רמת בטיחות ביולוגית	1
NCBI_TaxID	10090
CellosaurusAccession	CVCL_DA06
סטטוס GMO	GMO-S1: קו תאים זה, שמקורו בעכברים NIH-3T3 (L-WRN), מכיל קונסטרוקטים של Wnt3a, R-spondin-3 ו-Noggin, כולל רצפי DNA SV40 וסמנים אנטיביוטיים כפולים (hph ו-Tn5-neo), המאפשרים הפרשת מולקולות איתות אלה. ההוספות נמצאות באופן יציב בתאים מבוססי NIH-3T3. סיווג זה חל רק בגרמניה ועשוי להיות שונה במקומות אחרים.

ביטוי חלבון	Wnt-3A, R-spondin, noggin

תרבית ביניים	DMEM, w: 4.5 g/L גלוקוז, w: 4 mM L-גלוטמין, w: 3.7 g/L NaHCO3, w: 1.0 mM נתרן פירובט (מספר קטלוגי Cytion 820300a)
תוספים	הוסף לתווך 10% FBS
חומר מפרק	אקוטאז
תת-תרבות	הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
חומר הקפאה	כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
הפשרה וגידול תאים	ודא שהבקבוקון נשאר קפוא לחלוטין בעת המסירה, שכן התאים נשלחים בקרח יבש כדי לשמור על טמפרטורה אופטימלית במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, אחסן את הבקבוקון הקריוגני מיד בטמפרטורה נמוכה מ-150°C כדי להבטיח את שמירת שלמות התאים, או המשך לשלב 3 אם נדרשת תרבית מיידית. לצורך תרבית מיידית, הפשיר את הבקבוקון במהירות על ידי טבילתו באמבט מים בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס עם מים נקיים וחומר אנטי-מיקרוביאלי, תוך ערבוב עדין במשך 40-60 שניות עד שנותר גוש קרח קטן. בצע את כל השלבים הבאים בתנאים סטריליים במנדף, וחטא את בקבוקון הקריוואלי באתנול 70% לפני הפתיחה. פתח בזהירות את הבקבוקון המחוטא והעבר את תמיסת התאים לצינור צנטריפוגה בנפח 15 מ"ל המכיל 8 מ"ל של מצע תרבית בטמפרטורת החדר, תוך ערבוב עדין. סובבו את התערובת בצנטריפוגה ב-300 x g למשך 3 דקות כדי להפריד את התאים, וזרקו בזהירות את הנוזל העליון המכיל את שאריות מצע ההקפאה. השרו בעדינות את משקע התאים ב-10 מ"ל של מצע תרבית טרי. עבור תאים נצמדים, חלקו את התמיסה בין שני צלוחיות תרבית T25; עבור תרבויות תמיסה, העבירו את כל המצע לצלוחית T25 אחת כדי לקדם אינטראקציה וצמיחה יעילות של התאים. הקפידו על פרוטוקולי תת-תרבות קבועים להמשך צמיחה ותחזוקה של קו התאים, כדי להבטיח תוצאות ניסוי אמינות.
אטמוספירת דגירה	37°C, 5%_CO2, אווירה לחה.
ציפוי בקבוק	אף אחד
הליך ההקפאה	שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
תנאי משלוח	שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
תנאי אחסון	לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

עקרות	זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה. כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

מספר לוט	סוג התעודה	תאריך	מספר קטלוגי
300641-020523	תעודת ניתוח	23. May. 2025	300641
300641-260525	תעודת ניתוח	21. Jul. 2025	300641

תאי L-WRN

מידע כללי

מאפיינים

נתונים רגולטוריים

נתונים ביו-מולקולריים

טיפול

בקרת איכות וניתוח מולקולרי

תעודת ניתוח (CoA)