תאי L-929-GFP

‏800.00 ‏$*

המוצרים נשלחים קפואים בקרח יבש בתוך צינורות קריוגניים. כל צינור קריוגני מכיל בדרך כלל 3 × 10 ⁶ תאים עבור קווי תאים נצמדים או 5 × 10⁶ תאים עבור קווי תאים בתמיסה (לפרטים נוספים, עיין בתעודת ה-CoA של האצווה).

מחירים לא כולל מיסים בתוספת עלויות משלוח

cryovial

מספר מוצר: 305956

גיליון בטיחות

גיליון מוצר

תיאור	תאי L-929-GFP הם נגזרת המסומנת בפלואורסצנט של קו תאי הפיברובלסט L-929 של עכברים, אשר הוקם במקור מרקמת חיבור תת-עורית של עכבר בוגר. קו ה-L-929 המקורי הוא אחד מדגמי הפיברובלסט של עכברים הנפוצים ביותר במחקר הביו-רפואי, והוא מאופיין בצמיחה דבקה, במורפולוגיה בצורת ציר וביכולת התרבות חזקה. תאי L-929 נמצאים בשימוש נרחב במחקרים של ציטוטוקסיות, דלקת, ביולוגיה של המטריקס החוץ-תאי ואינטראקציות בין מארח לפתוגן, והם משמשים גם לייצור ולביו-אנליזה של ציטוקינים כגון גורם נמק הגידול-α (TNF-α). הביטוי היציב של חלבון פלואורסצנטי ירוק (GFP) בתאי L-929-GFP מאפשר הדמיה ישירה ומעקב כמותי אחר התנהגות הפיברובלסטים בזמן אמת. תאים אלה שימושיים במיוחד ליישומים מבוססי פלואורסצנציה, כולל בדיקות נדידה, ניסויי תרבית משותפת, מחקרים בהנדסת רקמות והדמיית תאים חיים. תאי L-929-GFP שומרים על המאפיינים הביולוגיים המרכזיים של קו הפיברובלסטים ההורי, תוך שהם מספקים תועלת משופרת לניטור מיקום התאים, התרבותם ואינטראקציות בתוך סביבות תאיות מורכבות. כתוצאה מכך, הם משמשים כמודל רב-תכליתי לחקירת הדינמיקה של תאי הסטרומה, תהליכי ריפוי פצעים, תאימות ביו-חומרים ותגובות ציטוטוקסיות בתיווך חיסוני.
אורגניזם	עכבר
רקמה	רקמת חיבור
מילים נרדפות	L929/GL50

גיל	100 ימים
מגדר	זכר
סוג התא	פיברובלסט
תכונות צמיחה	דבק

ציטוט	L929-GFP (מספר קטלוגי של Cytion: 305956)
רמת בטיחות ביולוגית	1
NCBI_TaxID	10090
CellosaurusAccession	CVCL_E2Z7
סטטוס GMO	GMO-S1: קו תאים זה מכיל רפורט של חלבון פלואורסצנטי ירוק ZsGreen1, המשולב באופן יציב, שהוכנס באמצעות העברה לנטרווירוס שאינו מסוגל לשכפל את עצמו. אוכלוסיית התאים הפוליקלונלית שהתקבלה נשמרה תחת סלקציה של פורומיצין (1–5 µg/mL). נדרשת רמת בטיחות S1. סיווג זה חל רק בגרמניה ועשוי להיות שונה במקומות אחרים.

ביטוי אנטיגן	ZsGreen1 (חלבון פלואורסצנטי ירוק)

תרבית ביניים	DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 g/L גלוקוז, w: 2.5 mM L-גלוטמין, w: 15 mM HEPES, w: 0.5 mM נתרן פירובט, w: 1.2 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי Cytion 820400a)
תוספים	הוסף לתווך 10% FBS
חומר מפרק	אקוטאז
תת-תרבות	הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
צפיפות זריעה	1 עד 3 x 10⁴ תאים/סמ^"ר
חומר הקפאה	כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה.
הפשרה וגידול תאים	ודא שהבקבוקון נשאר קפוא לחלוטין בעת המסירה, שכן התאים נשלחים בקרח יבש כדי לשמור על טמפרטורה אופטימלית במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, אחסן את הבקבוקון הקריוגני מיד בטמפרטורה נמוכה מ-150°C כדי להבטיח את שמירת שלמות התאים, או המשך לשלב 3 אם נדרשת תרבית מיידית. לצורך תרבית מיידית, הפשיר את הבקבוקון במהירות על ידי טבילתו באמבט מים בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס עם מים נקיים וחומר אנטי-מיקרוביאלי, תוך ערבוב עדין במשך 40-60 שניות עד שנותר גוש קרח קטן. בצע את כל השלבים הבאים בתנאים סטריליים במנדף, וחטא את בקבוקון הקריוואלי באתנול 70% לפני הפתיחה. פתח בזהירות את הבקבוקון המחוטא והעבר את תמיסת התאים לצינור צנטריפוגה בנפח 15 מ"ל המכיל 8 מ"ל של מצע תרבית בטמפרטורת החדר, תוך ערבוב עדין. סובבו את התערובת בצנטריפוגה ב-200 x g למשך 5 דקות, והיפטרו בזהירות מהנוזל העליון המכיל את מצע ההקפאה. פעל לפי ההליך המתואר תחת התאוששות לאחר הפשרה
אטמוספירת דגירה	37°C, 5%_CO2, אווירה לחה.
תנאי משלוח	שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
תנאי אחסון	לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

תאי L-929-GFP

מידע כללי

מאפיינים

נתונים רגולטוריים

נתונים ביו-מולקולריים

טיפול

בקרת איכות וניתוח מולקולרי