תאי KU812
395.00 $*
המוצרים נשלחים קפואים בקרח יבש בתוך צינורות קריוגניים. כל צינור קריוגני מכיל בדרך כלל 3 × 10 6 תאים עבור קווי תאים נצמדים או 5 × 106 תאים עבור קווי תאים בתמיסה (לפרטים נוספים, עיין בתעודת ה-CoA של האצווה).
מידע כללי
| תיאור | קו התאים KU812 הוא קו תאים לוקמיים אנושיים שמקורו בחולה עם לוקמיה מיאלואידית כרונית (CML) בשלב משבר בלאסטי. הוא בולט ביכולתו להתמיין לשושלות בזופילית ואריתרואידית בתנאים ספציפיים, מה שהופך אותו לכלי חשוב לחקר התמיינות המטופויטית וממאירויות נלוות. קו התאים מציג מאפיינים של תאי אב בזופילים, כולל נוכחות של גרנולות מטכרומטיות החיוביות לצביעת טולואידין כחול ואסטרה כחול, והוא מסנתז היסטמין, המעיד על פעילות בזופילית. תאי KU812 רלוונטיים במיוחד לחקר פסאודו-אלרגיה הקשורה להפעלת משלים (CARPA) ותגובות רגישות יתר המתווכות על ידי בזופילים. תועלת זו נובעת מתגובתם החזקה לחלבוני משלים כמו C3a ו-C5a, המפעילים שחרור של היסטמין ומתווכים דלקתיים אחרים, המדמים תגובות פסאודו-אלרגיות. תאי KU812 מבטאים סמנים על פני התא כגון CD63 ו-CD203c, הקשורים להפעלה ולדה-גרנולציה של בזופילים. סמנים אלה שימשו בפרוטוקולים מבוססי ציטומטריה זרימה להערכת התאימות האימונולוגית של תרופות ננו-רפואיות ותרופות ביולוגיות אחרות. בנוסף, תאי KU812 מפגינים פוטנציאל התמיינות אריתרואידית כאשר הם מתורבתים בתנאים המכילים תוספת אריתרופואטין. זה כולל התבגרות ספונטנית לתאים אריתרואידיים המסוגלים לסנתז המוגלובין מסוגים שונים, כגון צורות בוגרות ועובריות. תכונות אלה מדגישות את השימושיות שלהם בחקר ייצור כדוריות דם אדומות לצד התמיינות בזופילית, מה שהופך את KU812 למודל רב-תכליתי למחקר המטולוגי. |
|---|---|
| אורגניזם | אדם |
| רקמה | דם היקפי |
| מחלה | לוקמיה מיאלואידית כרונית, BCR-ABL1 חיובי |
| מילים נרדפות | Ku812, KU-812, KU.812, KU 812 |
מאפיינים
| גיל | 38 שנים |
|---|---|
| מגדר | זכר |
| מוצא אתני | יפנית |
| מורפולוגיה | דמוי לימפוציט |
| סוג התא | תא אב של בזופילים |
| תכונות צמיחה | השעיה |
נתונים רגולטוריים
| ציטוט | KU812 (מספר קטלוגי Cytion 305306) |
|---|---|
| רמת בטיחות ביולוגית | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_0379 |
נתונים ביו-מולקולריים
| ביטוי אנטיגן | CD3, ANPEP (CD13) |
|---|---|
| פרופיל מוטציוני | מוטציה: TP53, p.Lys132Arg (c.395A>G), הומוזיגוטי; מיזוג גנים: BCR-ABL, אקסון 14 של BCR התמזג עם אקסון 2 של ABL1 (תעתיק b3a2) |
| קריוטיפ | התאים מכילים לפחות כרומוזום Ph1 (פילדלפיה) אחד. |
טיפול
| תרבית ביניים | RPMI 1640, w: 2.0 mM גלוטמין יציב, w: 2.0 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי של Cytion 820700a) |
|---|---|
| תוספים | הוסף לתמיסה 10% FBS, הוסף 2.5 גרם/ליטר גלוקוז ו-10 מ"מ HEPES |
| תת-תרבות | אסוף את תאי התרחיף בצינור של 15 מ"ל ושטוף בעדינות את התאים הנצמדים עם PBS ללא סידן ומגנזיום (השתמש ב-3-5 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-5-10 מ"ל עבור בקבוקי T75). החל Accutase (1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25, 2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75) תוך הקפדה על כיסוי מלא של שכבת התאים. אפשר לתאים להתפתח בטמפרטורת החדר למשך 10 דקות. לאחר ההתפתחות, שלב וצנטריפוג את התאים המרחפים והדבוקים. לאחר הצנטריפוגה, השב בזהירות את משקע התאים והעבר את תמיסת התאים לבקבוקים חדשים המכילים מדיום טרי. |
| צפיפות זריעה | 3 x 105 תאים/מ"ל |
| חידוש נוזלים | 2 עד 3 פעמים בשבוע |
| חומר הקפאה | כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה. |
| הפשרה וגידול תאים |
|
| אטמוספירת דגירה | 37°C, 5%CO2, אווירה לחה. |
| ציפוי בקבוק | אף אחד |
| הליך ההקפאה | שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים. |
| תנאי משלוח | שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים. |
| תנאי אחסון | לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי. |
בקרת איכות וניתוח מולקולרי
| עקרות | זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה. כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות. |
|---|