תאים IEC-18

‏395.00 ‏$*

המוצרים נשלחים קפואים בקרח יבש בתוך צינורות קריוגניים. כל צינור קריוגני מכיל בדרך כלל 3 × 10 ⁶ תאים עבור קווי תאים נצמדים או 5 × 10⁶ תאים עבור קווי תאים בתמיסה (לפרטים נוספים, עיין בתעודת ה-CoA של האצווה).

מחירים לא כולל מיסים בתוספת עלויות משלוח

cryovial

מספר מוצר: 305302

גיליון בטיחות

גיליון מוצר

תעודת ניתוח (CoA)

תיאור	קו התאים IEC-18 הוא קו תאים אפיתל לא-מומר המופק מתאי הקריפטות של המעי הדק של חולדות. תאים אלה הוכחו כמודל יעיל לתכונות הפיזיולוגיות של אפיתל המעי הדק, במיוחד בכל הקשור להובלת יוני כלוריד (Cl⁻). ערוצי כלוריד בתאי IEC-18 מציגים סוגים שונים של מוליכות המגיבים לגירויים שונים, כגון נפיחות תאים, עלייה ברמת הסידן התאי (Ca²⁺) ועלייה ברמת ה-AMP המחזורי (cAMP). לדוגמה, זרמי Cl⁻ המופעלים על ידי נפיחות בתאי IEC-18 מאופיינים בתיקון כלפי חוץ ובעצמאות מתח. יתר על כן, תאי IEC-18 מבטאים תעלות CFTR (Cystic Fibrosis Transmembrane Conductance Regulator), כפי שמעידה נוכחות מוליכות Cl⁻ המופעלת על ידי cAMP, אשר ניתנת לעיכוב על ידי גליבנקלמיד וחומצה בנזואית 5-ניטרו-2-(3-פנילפרופילאמינו) (NPPB), אך אינה מושפעת מ-DIDS. תאי IEC-18 שימשו גם לחקר מנגנוני הישרדות תאים תחת לחץ הנגרם מניתוק, המכונה אנואיקיס. מחקרים מצביעים על כך שהפרוסטגלנדין E2 (PGE2) יכול לקדם את חיוניות התאים ואת הצטברותם בתאי IEC-18 מנותקים באמצעות מסלולי איתות המתווכים על ידי cAMP. הגנה זו מפני אנואיקיס קשורה להפעלת אדנילט ציקלאז וקינאז חלבון A (PKA), המשפרים את הידבקות התאים ואת חיוניותם גם במצבים של השעיה. ממצאים אלה חשובים להבנת תהליכים הקשורים לדלקת ותרומתם הפוטנציאלית לקרצינוגנזה ברקמות המעי. יתר על כן, שכבות חד-תאיות של IEC-18 שימשו לחקר הובלת מולקולות שונות דרך מחסום המעי. בהשוואה לקו התאים Caco-2, תאי IEC-18 מספקים מודל מדויק יותר להעברה פסיבית בין-תאית ובין-תאית בשל הדמיון המבני שלהם לתאי הקריפטות במעי הדק. בניגוד לתאי Caco-2, בעלי יכולות העברה אקטיביות משמעותיות, תאי IEC-18 מפגינים העברה מינימלית בתיווך נשא, מה שהופך אותם לבחירה מתאימה יותר לניתוח החדירות הפסיבית של מקרומולקולות הידרופיליות.
אורגניזם	חולדה
רקמה	מעי דק, מעי עקום
מחלה	רגיל
מילים נרדפות	IEC 18, IEC18, קו תאים אפיתלואידיים במעי מס' 18

זן/תת-זן	צ'ארלס ריבר ספראג דוולי (CD(SD))
גיל	18-24 ימים
מגדר	לא צוין
מורפולוגיה	דמוי אפיתל
סוג התא	תא אפיתל
תכונות צמיחה	דבק

ציטוט	IEC-18 (מספר קטלוגי Cytion 305302)
רמת בטיחות ביולוגית	1
NCBI_TaxID	10116
CellosaurusAccession	CVCL_0342

תרבית ביניים	DMEM, w: 4.5 g/L גלוקוז, w: 4 mM L-גלוטמין, w: 3.7 g/L NaHCO3, w: 1.0 mM נתרן פירובט (מספר קטלוגי Cytion 820300a)
תוספים	הוסף לתווך 10% FBS
חומר מפרק	אקוטאז
תת-תרבות	הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
צפיפות זריעה	2 x 10⁴ תאים/סמ^"ר
חידוש נוזלים	פעמיים בשבוע
חומר הקפאה	כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
הפשרה וגידול תאים	ודא שהבקבוקון נשאר קפוא לחלוטין בעת המסירה, שכן התאים נשלחים בקרח יבש כדי לשמור על טמפרטורה אופטימלית במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, אחסן את הבקבוקון הקריוגני מיד בטמפרטורה נמוכה מ-150°C כדי להבטיח את שמירת שלמות התאים, או המשך לשלב 3 אם נדרשת תרבית מיידית. לצורך תרבית מיידית, הפשיר את הבקבוקון במהירות על ידי טבילתו באמבט מים בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס עם מים נקיים וחומר אנטי-מיקרוביאלי, תוך ערבוב עדין במשך 40-60 שניות עד שנותר גוש קרח קטן. בצע את כל השלבים הבאים בתנאים סטריליים במנדף, וחטא את בקבוקון הקריוואלי באתנול 70% לפני הפתיחה. פתח בזהירות את הבקבוקון המחוטא והעבר את תמיסת התאים לצינור צנטריפוגה בנפח 15 מ"ל המכיל 8 מ"ל של מצע תרבית בטמפרטורת החדר, תוך ערבוב עדין. סובבו את התערובת בצנטריפוגה ב-300 x g למשך 3 דקות כדי להפריד את התאים, וזרקו בזהירות את הנוזל העליון המכיל את שאריות מצע ההקפאה. השרו בעדינות את משקע התאים ב-10 מ"ל של מצע תרבית טרי. עבור תאים נצמדים, חלקו את התמיסה בין שני צלוחיות תרבית T25; עבור תרבויות תמיסה, העבירו את כל המצע לצלוחית T25 אחת כדי לקדם אינטראקציה וצמיחה יעילות של התאים. הקפידו על פרוטוקולי תת-תרבות קבועים להמשך צמיחה ותחזוקה של קו התאים, כדי להבטיח תוצאות ניסוי אמינות.
אטמוספירת דגירה	37°C, 5%_CO2, אווירה לחה.
ציפוי בקבוק	אף אחד
הליך ההקפאה	שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
תנאי משלוח	שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
תנאי אחסון	לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

עקרות	זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה. כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

מספר לוט	סוג התעודה	תאריך	מספר קטלוגי
305302-301024	תעודת ניתוח	23. May. 2025	305302

תאים IEC-18

מידע כללי

מאפיינים

נתונים רגולטוריים

נתונים ביו-מולקולריים

טיפול

בקרת איכות וניתוח מולקולרי

תעודת ניתוח (CoA)