תאי Hep-56.1D

‏650.00 ‏$*

המוצרים נשלחים קפואים בקרח יבש בתוך צינורות קריוגניים. כל צינור קריוגני מכיל בדרך כלל 3 × 10 ⁶ תאים עבור קווי תאים נצמדים או 5 × 10⁶ תאים עבור קווי תאים בתמיסה (לפרטים נוספים, עיין בתעודת ה-CoA של האצווה).

מחירים לא כולל מיסים בתוספת עלויות משלוח

מבחנה קריוגנית

מספר מוצר: 400204

גיליון בטיחות

גיליון מוצר

תעודת ניתוח (CoA)

תיאור	קו תאי הכבד Hep-56.1D נגזר מגידול בכבד עכבר, באופן ספציפי מזן העכברים C57BL/6J. קו תאים זה מאופיין במוטציה בולטת בגן p53, שזוהתה במעברים שונים במהלך התרבות במבחנה. באופן ספציפי, Hep-56.1D מציג טרנסוורסיה מ-C:G ל-G:C בקודון 132 של אקסון 5, מה שמביא לשינוי בחומצת אמינו מסיסטאין לטריפטופן. מוטציה זו זוהתה במעבר מספר 17, מה שמרמז על יתרון גדילה סלקטיבי המוענק על ידי המוטציה, מה שמביא לדומיננטיות שלה באוכלוסיית התאים. קו התאים Hep-56.1D מציג מורפולוגיה אפיתלית בעיקר, המשקפת את מקורו ההפטוציטי. הדבר עולה בקנה אחד עם פרופיל חלבוני הסיבים הבינוניים שלו, הכולל את הקרטין הפשוט K8 ו-K18, וכן וימנטין וקרטין K19 בדרגות שונות. נוכחותם של חלבונים אלה מאשרת את האופי ההפטוציטי של קו התאים ואת סיווגו כקו הפטומה. ניתוח נוסף של Hep-56.1D באמצעות טביעת אצבעות DNA לא גילה כל חריגות מבניות משמעותיות, אם כי נצפו שינויים מסוימים בעוצמות היחסיות של פסים ספציפיים עם עליית מספר המעברים. הדבר מעיד על יציבות גנומית עם מידה מסוימת של שונות לאורך תקופות תרבית ממושכות. ניתוח המוטציה p53 ודפוסי הביטוי של חלבון הסיבים הבינוניים יחד קובעים את Hep-56.1D כמודל חשוב לחקר קרצינומה הפטוצלולרית ותפקידן של מוטציות p53 בגידול גידולים בכבד.
אורגניזם	עכבר
רקמה	כבד
מחלה	קרצינומה הפטוצלולרית
מילים נרדפות	HEP-56.1D, 56.1D, 56.1d

זן/תת-זן	C57BL/6J
גיל	מבוגר
מגדר	נקבה
מורפולוגיה	דמוי אפיתל
תכונות צמיחה	דבק

ציטוט	Hep-56.1D (מספר קטלוגי Cytion 400204)
רמת בטיחות ביולוגית	1
NCBI_TaxID	10090
CellosaurusAccession	CVCL_5769

ביטוי חלבון	קרטין 8, קרטין 18, וימנטין.
Tumorigenic	כן, בעכברי C57BL/6J. בשבוע השלישי יתפתחו גידולים בקוטר של כ-5-6 מ"מ.
סטטוס פלואידיות	אנאופלואידי
פרופיל מוטציוני	P53mut, C:G -+ G:C טרנסוורסיה בקודון 132 של אקסון 5 של p53 בעכבר, המתאימה לשינוי חומצת אמינו מסיסטאין לטריפטופן.

תרבית ביניים	DMEM, w: 4.5 g/L גלוקוז, w: 4 mM L-גלוטמין, w: 3.7 g/L NaHCO3, w: 1.0 mM נתרן פירובט (מספר קטלוגי Cytion 820300a)
תוספים	הוסף לתווך 10% FBS
חומר מפרק	אקוטאז
זמן הכפלה	25 עד 30 שעות
תת-תרבות	הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
צפיפות זריעה	1 עד 2 x 10⁴ תאים/סמ"ר במהלך תרבית שגרתית
חידוש נוזלים	כל 3 עד 4 ימים
התאוששות לאחר הפשרה	>90% מהתאים התאוששו מתהליך ההקפאה תוך 24 עד 48 שעות
חומר הקפאה	כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
הפשרה וגידול תאים	ודא שהבקבוקון נשאר קפוא לחלוטין בעת המסירה, שכן התאים נשלחים בקרח יבש כדי לשמור על טמפרטורה אופטימלית במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, אחסן את הבקבוקון הקריוגני מיד בטמפרטורה נמוכה מ-150°C כדי להבטיח את שמירת שלמות התאים, או המשך לשלב 3 אם נדרשת תרבית מיידית. לצורך תרבית מיידית, הפשיר את הבקבוקון במהירות על ידי טבילתו באמבט מים בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס עם מים נקיים וחומר אנטי-מיקרוביאלי, תוך ערבוב עדין במשך 40-60 שניות עד שנותר גוש קרח קטן. בצע את כל השלבים הבאים בתנאים סטריליים במנדף, וחטא את בקבוקון הקריוואלי באתנול 70% לפני הפתיחה. פתח בזהירות את הבקבוקון המחוטא והעבר את תמיסת התאים לצינור צנטריפוגה בנפח 15 מ"ל המכיל 8 מ"ל של מצע תרבית בטמפרטורת החדר, תוך ערבוב עדין. סובבו את התערובת בצנטריפוגה ב-300 x g למשך 3 דקות כדי להפריד את התאים, וזרקו בזהירות את הנוזל העליון המכיל את שאריות מצע ההקפאה. השרו בעדינות את משקע התאים ב-10 מ"ל של מצע תרבית טרי. עבור תאים נצמדים, חלקו את התמיסה בין שני צלוחיות תרבית T25; עבור תרבויות תמיסה, העבירו את כל המצע לצלוחית T25 אחת כדי לקדם אינטראקציה וצמיחה יעילות של התאים. הקפידו על פרוטוקולי תת-תרבות קבועים להמשך צמיחה ותחזוקה של קו התאים, כדי להבטיח תוצאות ניסוי אמינות.
אטמוספירת דגירה	37°C, 5%_CO2, אווירה לחה.
ציפוי בקבוק	אף אחד
הליך ההקפאה	שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
תנאי משלוח	שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
תנאי אחסון	לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

עקרות	זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה. כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

מספר לוט	סוג התעודה	תאריך	מספר קטלוגי
400204-821	תעודת ניתוח	23. May. 2025	400204

מופעל על ידי Bioz לפרטים נוספים על Bioz

תאי Hep-56.1D

מידע כללי

מאפיינים

נתונים רגולטוריים

נתונים ביו-מולקולריים

טיפול

בקרת איכות וניתוח מולקולרי

תעודת ניתוח (CoA)