תאי HeLa EB3 GFP KIRC14
מידע כללי
| תיאור | HeLa EB3-GFP Kirc 14 הוא נגזרת מהונדסת גנטית של קו התאים האנושי HeLa של קרצינומה צוואר הרחם, שהונדסה כדי לבטא באופן יציב קונסטרוקט מיזוג של EB3 (חלבון קישור קצה 3) המסומן ב-GFP, כאשר "Kirc 14" מציין תת-שיבוט ספציפי (שיבוט 14) שנבחר מתוך מאגר התאים שעברו טרנספקציה. EB3 הוא חבר במשפחת חלבוני הקישור לקצה (end-binding proteins), העוקב אחר קצות הפלוס של המיקרוטובולים הצומחים ומשמש כמדד להתנהגות הדינמית של המיקרוטובולים בתאים חיים. חלבון ההיתוך GFP-EB3 מייצר אותות פלואורסצנטיים אופייניים דמויי כוכב שביט בקצות המיקרוטובולים המתארגנים, ומאפשר הדמיה של תאים חיים המציגה את הדינמיקה של המיקרוטובולים, את ההובלה התאית ואת ארגון שלד התא בזמן אמת. HeLa EB3-GFP Kirc 14 משמש במחקר בביולוגיה תאית להדמיה של דינמיקת הקצה החיובי של המיקרוטובולים בתאים חיים, למחקרים על הרכבת ציר המיטוזה ואינטראקציות בין קינטוכור למיקרוטובולים, לחקירת הובלת מטען תאי, ולהערכת תרכובות המשפיעות על דינמיקת הפולימריזציה של המיקרוטובולים. הביטוי היציב של GFP-EB3 בתת-קלונה מספק עוצמת דפוס פלואורסצנטיים עקביים לאורך מחזורי תרבית, מה שהופך את הקלונה 14 למתאימה לניסויי הדמיה כמותיים ולסינון בתפוקה גבוהה של חומרים המכוונים למיקרוטובולים. |
|---|---|
| אורגניזם | אדם |
| רקמה | צוואר הרחם |
| מחלה | אדנוקרצינומה צוואר הרחם (על רקע תאי HeLa); שעברה טרנספקציה יציבה עם GFP-EB3 (סמן לקצה החיובי של המיקרוטובולים) |
| יישומים | הדמיה של הדינמיקה של המיקרוטובולים בתאים חיים; מחקרים על ציר המיטוזה; מחקר על האינטראקציה בין הקינטוכור למיקרוטובולים; הובלה תאיית; סינון תרופות המכוונות למיקרוטובולים |
מאפיינים
| מורפולוגיה | דמוי אפיתל |
|---|---|
| סוג התא | תאי אפיתל |
| תכונות צמיחה | דבק |
נתונים רגולטוריים
| ציטוט | HeLa EB3-GFP Kirc 14 27/09/24 (מספר קטלוג Cytion 305718) |
|---|---|
| רמת בטיחות ביולוגית | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | נגזר מתא HeLa (CVCL_0030); תת-שיבוט GFP-EB3 שלא הוקצה באופן עצמאי |
| סטטוס GMO | GMO-S1: קו תאים HeLa EB3 GFP KIRC14 זה מכיל קונסטרוקט EB3 המסומן ב-GFP, המיועד למעקב אחר הקצה החיובי של המיקרוטובולים בהדמיית תאים חיים. סיווג זה חל אך ורק בגרמניה ועשוי להיות שונה במקומות אחרים. |
נתונים ביו-מולקולריים
טיפול
| תרבית ביניים | DMEM, w: 4.5 g/L גלוקוז, w: 4 mM L-גלוטמין, w: 3.7 g/L NaHCO3, w: 1.0 mM נתרן פירובט (מספר קטלוגי Cytion 820300a) |
|---|---|
| תוספים | הוסף לתווך 10% FBS |
| חומר מפרק | Accutase, 10 דקות, 37°C |
| זמן הכפלה | כ-24 שעות |
| תת-תרבות | יש להסיר את המדיום הישן מהתאים הנצמדים ולשטוף ב-PBS. יש לכסות ב-Accutase, להשאיר באינקובטור בטמפרטורת החדר למשך 8–10 דקות, להחזיר לתמיסה עם מדיום, לסובב בצנטריפוגה ב-300×g למשך 3 דקות, ולהעביר לצלחות חדשות עם מדיום סלקציה. |
| יחס פיצול | 1 עד 5 |
| צפיפות זריעה | 1 עד 3 × 10⁴ תאים/סמ"ר |
| חידוש נוזלים | 2 עד 3 פעמים בשבוע |
| חומר הקפאה | כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה. |
| הפשרה וגידול תאים |
|
| אטמוספירת דגירה | 37°C, 5%CO2, אווירה לחה. |
| תנאי משלוח | שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים. |
| תנאי אחסון | לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי. |
בקרת איכות וניתוח מולקולרי
תעודת ניתוח (CoA)
| מספר לוט | סוג התעודה | תאריך | מספר קטלוגי |
|---|---|---|---|
| 305718-260526 | תעודת ניתוח | 13. Jul. 2026 | 305718 |