תאי HT55

‏430.00 ‏$*

המוצרים נשלחים קפואים בקרח יבש בתוך צינורות קריוגניים. כל צינור קריוגני מכיל בדרך כלל 3 × 10 ⁶ תאים עבור קווי תאים נצמדים או 5 × 10⁶ תאים עבור קווי תאים בתמיסה (לפרטים נוספים, עיין בתעודת ה-CoA של האצווה).

מחירים לא כולל מיסים בתוספת עלויות משלוח

cryovial

מספר מוצר: 305018

גיליון בטיחות

גיליון מוצר

תיאור	HT55 הוא קו תאים של אדנוקרצינומה רקטלית אנושית, שהופק מגידול רקטלי ראשוני של אישה לבנה בת 54. הקו גדל כשכבה חד-תאית דבקה בעלת מורפולוגיה דמוית אפיתל, והוא רשום ב-Cellosaurus תחת המספר CVCL_1294. HT55 נושא מוטציות מרובות, הטרוזיגוטיות והומוזיגוטיות, הגורמות לאובדן תפקוד בגן מדכא הגידול APC (adenomatous polyposis coli), כולל p.Gln1131Ter, p.Gln1303Ter, p.Arg1463Ser, p.Asn581Tyr ו-p.Lys241Ter (כולן הטרוזיגוטיות), וכן החלפה הומוזיגוטית p.Arg213Leu. פרופיל מוטציות זה הופך את HT55 למודל ביולוגי רלוונטי לקרצינוגנזה של המעי הגס המונעת על ידי APC, המשקף את חוסר האיזון במסלול ה-WNT הקנוני המניע את רוב מקרי סרטן המעי הגס בבני אדם. HT55 נמצא בשימוש נרחב במחקר סרטן המעי הגס למחקרים על איתות WNT/β-catenin, תפקוד מדכא הגידול של APC, רגישות ועמידות לתרופות, והערכה פרה-קלינית של חומרים ממוקדים כנגד רכיבים במסלול WNT. הקו מתאים לניסויים פרמקולוגיים במבחנה ולמחקרי שתלים זרים (xenograft) במודלים של עכברים עם מערכת חיסונית מוחלשת, ומספק פלטפורמה במבחנה, דבקה ונוחה לעבודה, למחקר מכניסטי ותרגומי של סרטן המעי הגס. נוכחותן של מוטציות קיצוץ מרובות ב-APC הופכת את HT55 למייצגת של תת-סוג סרטן המעי הגס בעל יציבות מיקרו-סאטליטית וחוסר יציבות כרומוזומלית, המונע לרוב על ידי אובדן תפקוד של APC. HT55 נשמר ב-EMEM (MEM Eagle, w: 2 mM L-Glutamine, w: 2.2 g/L NaHCO3, w: EBSS; מספר קטלוגי Cytion 820100a) בתוספת 10% FBS בטמפרטורה של 37°C באטמוספירה לחה עם 5% CO₂. התאים עוברים תרבית משנה באמצעות Accutase כאשר הם מגיעים לצפיפות של כ-80–90%, ביחס חלוקה מומלץ של 1:3 עד 1:5 ובצפיפות זריעה של 1–3 × 10⁴ תאים/סמ"ר. המדיום מוחלף כל 2–3 ימים. זמן הכפלה הוא כ-28 שעות.
אורגניזם	אדם
רקמה	רקטום
מחלה	אדנוקרצינומה
יישומים	מחקר בנושא סרטן המעי הגס; מחקרים על מסלול WNT/APC; בדיקות רגישות ועמידות לתרופות; אונקולוגיה פרה-קלינית; מודלים של שתלים בין-מיניים; הערכת טיפול ממוקד
מילים נרדפות	HT55

גיל	54 שנים
מגדר	נקבה
מוצא אתני	קווקזי
מורפולוגיה	דמוי אפיתל
סוג התא	תאי אפיתל
תכונות צמיחה	דבק

ציטוט	HT55 (מספר קטלוגי של Cytion: 305018)
רמת בטיחות ביולוגית	1
NCBI_TaxID	9606
CellosaurusAccession	CVCL_1294

פרופיל מוטציוני	מוטציה: p.Gln1131Ter, הטרוזיגוטית; מוטציה: p.Gln1303Ter, הטרוזיגוטית; מוטציה: p.Arg1463Ser, הטרוזיגוטית; מוטציה: p.Asn581Tyr, הטרוזיגוטית; מוטציה: p.Lys241Ter, הטרוזיגוטית; מוטציה: p.Arg213Leu, הומוזיגוטית

תרבית ביניים	EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2.2 g/L NaHCO3, w: EBSS (מספר קטלוגי Cytion 820100a)
תוספים	הוסף לתווך 10% FBS
חומר מפרק	אקוטאז
זמן הכפלה	28 שעות
תת-תרבות	הסירו את המדיום הישן מהתאים הנצמדים ושטפו אותם ב-PBS נטול סידן ומגנזיום. עבור צלחות T25, השתמשו ב-3–5 מ"ל של PBS, ועבור צלחות T75, השתמשו ב-5–10 מ"ל. לאחר מכן, יש לכסות את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור צלוחיות T25 וב-2.5 מ"ל עבור צלוחיות T75. יש להניח לתאים להתפתח בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבבו בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מצע כדי להפיץ אותם מחדש, ולאחר מכן צנטריפוגו ב-300×g למשך 3 דקות. השלכו את הנוזל העליון, הפיצו את התאים מחדש במצע טרי, והעבירו אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מצע טרי.
יחס פיצול	1 עד 5
צפיפות זריעה	1 עד 3 x 10⁴ תאים/סמ^"ר
חידוש נוזלים	כל 2-3 ימים
חומר הקפאה	כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
הפשרה וגידול תאים	ודא שהבקבוקון נשאר קפוא לחלוטין בעת המסירה, שכן התאים נשלחים בקרח יבש כדי לשמור על טמפרטורה אופטימלית במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, אחסן את הבקבוקון הקריוגני מיד בטמפרטורה נמוכה מ-150°C כדי להבטיח את שמירת שלמות התאים, או המשך לשלב 3 אם נדרשת תרבית מיידית. לצורך תרבית מיידית, הפשיר את הבקבוקון במהירות על ידי טבילתו באמבט מים בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס עם מים נקיים וחומר אנטי-מיקרוביאלי, תוך ערבוב עדין במשך 40-60 שניות עד שנותר גוש קרח קטן. בצע את כל השלבים הבאים בתנאים סטריליים במנדף, וחטא את בקבוקון הקריוואלי באתנול 70% לפני הפתיחה. פתח בזהירות את הבקבוקון המחוטא והעבר את תמיסת התאים לצינור צנטריפוגה בנפח 15 מ"ל המכיל 8 מ"ל של מצע תרבית בטמפרטורת החדר, תוך ערבוב עדין. סובבו את התערובת בצנטריפוגה ב-300 x g למשך 3 דקות כדי להפריד את התאים, וזרקו בזהירות את הנוזל העליון המכיל את שאריות מצע ההקפאה. השרו בעדינות את משקע התאים ב-10 מ"ל של מצע תרבית טרי. עבור תאים נצמדים, חלקו את התמיסה בין שני צלוחיות תרבית T25; עבור תרבויות תמיסה, העבירו את כל המצע לצלוחית T25 אחת כדי לקדם אינטראקציה וצמיחה יעילות של התאים. הקפידו על פרוטוקולי תת-תרבות קבועים להמשך צמיחה ותחזוקה של קו התאים, כדי להבטיח תוצאות ניסוי אמינות.
אטמוספירת דגירה	37°C, 5%_CO2, אווירה לחה.
תנאי משלוח	שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
תנאי אחסון	לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

תאי HT55

מידע כללי

מאפיינים

נתונים רגולטוריים

נתונים ביו-מולקולריים

טיפול

בקרת איכות וניתוח מולקולרי