תאי HT-29 MTX E12

‏800.00 ‏$*

המוצרים נשלחים קפואים בקרח יבש בתוך צינורות קריוגניים. כל צינור קריוגני מכיל בדרך כלל 3 × 10 ⁶ תאים עבור קווי תאים נצמדים או 5 × 10⁶ תאים עבור קווי תאים בתמיסה (לפרטים נוספים, עיין בתעודת ה-CoA של האצווה).

מחירים לא כולל מיסים בתוספת עלויות משלוח

cryovial

מספר מוצר: 305801

גיליון בטיחות

גיליון מוצר

תעודת ניתוח (CoA)

תיאור	HT-29-MTX-E12 הוא תת-שיבוט דמוי תאי גביע שמקורו בקו תאים של אדנוקרצינומה של המעי הגס האנושי HT29, באמצעות סלקציה עם מתוטרקסט (MTX), תהליך המביא להבחנה בין פנוטיפים המפרישים ריר. מבין מספר תת-שיבוטים שפותחו מ-HT29-MTX, תת-השיבוט E12 בולט בזכות היווצרותו החזקה של שכבות חד-תאיות מלוכדות עם חיבורים הדוקים ושכבת ריר עבה ורציפה על פני השטח האפיטי. תת-שיבוט זה מתאפיין בשיעור גבוה יותר של תאי גביע בוגרים, כפי שהוכח על ידי צביעת Alcian Blue, מיקרוסקופ אלקטרוני (TEM) וביטוי של גנים MUC1 ו-MUC2. למעשה, רמות ה-mRNA של MUC1 ו-MUC2 היו גבוהות משמעותית ב-HT-29-MTX-E12 בהשוואה לתת-שיבוטים אחרים ולתאי HT29 ההוריים, בהתאמה לעובי ריר של כ-142 ± 51 מיקרומטר - הדומה לסביבה המעייתית in vivo. מבחינה תפקודית, הוכח כי HT-29-MTX-E12 מדמה את תכונות המחסום של שכבת הריר במעי האנושי, במיוחד בהערכת ספיגת תרופות ליפופילית. נוכחות מחסום ריר עבה מפחיתה באופן משמעותי את מקדמי החדירות הנראים (Papp) של תרכובות ליפופילית כגון טסטוסטרון וברביטורטים שונים בהשוואה לתאי Caco-2 ללא ריר. לדוגמה, טסטוסטרון הראה ירידה של 43% ב-Papp ב-HT-29-MTX-E12, מה שמדגיש את ההשפעה של הריר על דיפוזיה של תרופות. למרות שיש לו מחסום אפיתל דולף יותר מתאי Caco-2, HT-29-MTX-E12 שומר על הרלוונטיות הפיזיולוגית שלו באמצעות יכולת ייצור הריר שלו, מה שהופך אותו למודל חשוב במבחנה לחקר ספיגת תרופות במעי והשפעת הריר על החדירות.
אורגניזם	אדם
רקמה	קולון
מחלה	אדנוקרצינומה של המעי הגס
מילים נרדפות	HT29-MTX-E12, MTX-E12

גיל	44 שנים
מגדר	נקבה
מוצא אתני	קווקזי
סוג התא	אפיתל
תכונות צמיחה	דבק

ציטוט	HT-29-MTX-E12 (מספר קטלוגי Cytion 305801)
רמת בטיחות ביולוגית	1
NCBI_TaxID	9606
CellosaurusAccession	CVCL_G356

פרופיל מוטציוני	מוטציה: APC, פשוטה, p.Glu853Ter (c.2557G>T), הטרוזיגוטית (משורת תאים הורית).מוטציה, APC, פשוטה, p.Thr1556Asnfs*3 (c.4666dupA) (c.4666_4667insA), הטרוזיגוטית (משורת תאים הורית).מוטציה, BRAF, פשוטה, p.Val600Glu (c.1799T>A), הטרוזיגוטית (משורת תאים הורית). מוטציה, PIK3CA, פשוטה, p.Pro449Thr (c.1345C>A), הטרוזיגוטית (משורת תאים הורית).מוטציה, SMAD4, פשוטה, p.Gln311Ter (c.931C>T), הומוזיגוטית (משורת תאים הורים). מוטציה, TP53, פשוטה, p.Arg273His (c.818G>A), הומוזיגוטית (משורת תאים הורים).

תרבית ביניים	EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2.2 g/L NaHCO3, w: EBSS (מספר קטלוגי Cytion 820100a)
תוספים	הוסף לתמיסה 10% FBS ו-1% NEAA
חומר מפרק	אקוטאז
חומר הקפאה	כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
הפשרה וגידול תאים	ודא שהבקבוקון נשאר קפוא לחלוטין בעת המסירה, שכן התאים נשלחים בקרח יבש כדי לשמור על טמפרטורה אופטימלית במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, אחסן את הבקבוקון הקריוגני מיד בטמפרטורה נמוכה מ-150°C כדי להבטיח את שמירת שלמות התאים, או המשך לשלב 3 אם נדרשת תרבית מיידית. לצורך תרבית מיידית, הפשיר את הבקבוקון במהירות על ידי טבילתו באמבט מים בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס עם מים נקיים וחומר אנטי-מיקרוביאלי, תוך ערבוב עדין במשך 40-60 שניות עד שנותר גוש קרח קטן. בצע את כל השלבים הבאים בתנאים סטריליים במנדף, וחטא את בקבוקון הקריוואלי באתנול 70% לפני הפתיחה. פתח בזהירות את הבקבוקון המחוטא והעבר את תמיסת התאים לצינור צנטריפוגה בנפח 15 מ"ל המכיל 8 מ"ל של מצע תרבית בטמפרטורת החדר, תוך ערבוב עדין. סובבו את התערובת בצנטריפוגה ב-300 x g למשך 3 דקות כדי להפריד את התאים, וזרקו בזהירות את הנוזל העליון המכיל את שאריות מצע ההקפאה. השרו בעדינות את משקע התאים ב-10 מ"ל של מצע תרבית טרי. עבור תאים נצמדים, חלקו את התמיסה בין שני צלוחיות תרבית T25; עבור תרבויות תמיסה, העבירו את כל המצע לצלוחית T25 אחת כדי לקדם אינטראקציה וצמיחה יעילות של התאים. הקפידו על פרוטוקולי תת-תרבות קבועים להמשך צמיחה ותחזוקה של קו התאים, כדי להבטיח תוצאות ניסוי אמינות.
אטמוספירת דגירה	37°C, 5%_CO2, אווירה לחה.
ציפוי בקבוק	אף אחד
הליך ההקפאה	שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
תנאי משלוח	שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
תנאי אחסון	לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

עקרות	זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה. כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

מספר לוט	סוג התעודה	תאריך	מספר קטלוגי
305801-151225	תעודת ניתוח	11. Feb. 2026	305801
305801-221225	תעודת ניתוח	11. Feb. 2026	305801
305801-291225	תעודת ניתוח	11. Feb. 2026	305801

תאי HT-29 MTX E12

מידע כללי

מאפיינים

נתונים רגולטוריים

נתונים ביו-מולקולריים

טיפול

בקרת איכות וניתוח מולקולרי

תעודת ניתוח (CoA)