תאי HROC296

‏800.00 ‏$*

המוצרים נשלחים קפואים בקרח יבש בתוך צינורות קריוגניים. כל צינור קריוגני מכיל בדרך כלל 3 × 10 ⁶ תאים עבור קווי תאים נצמדים או 5 × 10⁶ תאים עבור קווי תאים בתמיסה (לפרטים נוספים, עיין בתעודת ה-CoA של האצווה).

מחירים לא כולל מיסים בתוספת עלויות משלוח

cryovial

מספר מוצר: 300853

גיליון בטיחות

גיליון מוצר

תיאור	זהו קו תאים אחד מתוך סדרה של קווי תאים סרטניים שהוקמו על ידי ד"ר מיכאל לינבכר (PD Dr. Michael Linnebacher) מדגימות כריתה ראשוניות של סרטן המעי הגס מאז 2006.
אורגניזם	אדם
רקמה	קולון עולה, UICC Iia
מחלה	אדנוקרצינומה ראשונית, שלב TNM T3N0M0R0L0V0, דירוג G2, Lk(n) +0, Σ Lk(n) 35

גיל	92 שנים
מגדר	נקבה
מוצא אתני	קווקזי
מורפולוגיה	דמוי אפיתל
תכונות צמיחה	דבק

ציטוט	HROC296 (מספר קטלוגי Cytion 300853)
רמת בטיחות ביולוגית	1
NCBI_TaxID	9606
CellosaurusAccession	CVCL_1V02

ביטוי אנטיגן	CD326+
נגיפים	נקי מווירוסים פתוגניים לבני אדם SV40, JC/BK, HBV, HCV, HIV.

תרבית ביניים	DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 g/L גלוקוז, w: 2.5 mM L-גלוטמין, w: 15 mM HEPES, w: 0.5 mM נתרן פירובט, w: 1.2 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי Cytion 820400a)
תוספים	הוסף לתווך 10% FBS
חומר מפרק	אקוטאז
זמן הכפלה	29 שעות
תת-תרבות	הסר את המדיום ושטוף את התאים הדבוקים באמצעות PBS ללא סידן ומגנזיום (3-5 מ"ל PBS עבור T25, 5-10 מ"ל עבור צלוחיות תרבית תאים T75). הוסף TrypLE Express (1-2 מ"ל לכל T25, 2.5 מ"ל לכל צלוחית תרבית תאים T75), יש לכסות את יריעת התאים לחלוטין. השרו בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס למשך 10 עד 15 דקות. השרו את התאים בזהירות במדיום (10 מ"ל), סובבו בצנטריפוגה למשך 3 דקות ב-300xg, השרו את התאים במדיום טרי והעבירו לצלחות חדשות המכילות מדיום טרי. קו תאים זה יניב תמיסת תאים בודדים. מומלץ להשתמש בצלחות מצופות קולגן.
צפיפות זריעה	2 x 10⁴ תאים/סמ^"ר
חידוש נוזלים	כל 3 עד 5 ימים
התאוששות לאחר הפשרה	מהיר
חומר הקפאה	כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
הפשרה וגידול תאים	ודא שהבקבוקון נשאר קפוא לחלוטין בעת המסירה, שכן התאים נשלחים בקרח יבש כדי לשמור על טמפרטורה אופטימלית במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, אחסן את הבקבוקון הקריוגני מיד בטמפרטורה נמוכה מ-150°C כדי להבטיח את שמירת שלמות התאים, או המשך לשלב 3 אם נדרשת תרבית מיידית. לצורך תרבית מיידית, הפשיר את הבקבוקון במהירות על ידי טבילתו באמבט מים בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס עם מים נקיים וחומר אנטי-מיקרוביאלי, תוך ערבוב עדין במשך 40-60 שניות עד שנותר גוש קרח קטן. בצע את כל השלבים הבאים בתנאים סטריליים במנדף, וחטא את בקבוקון הקריוואלי באתנול 70% לפני הפתיחה. פתח בזהירות את הבקבוקון המחוטא והעבר את תמיסת התאים לצינור צנטריפוגה בנפח 15 מ"ל המכיל 8 מ"ל של מצע תרבית בטמפרטורת החדר, תוך ערבוב עדין. סובבו את התערובת בצנטריפוגה ב-300 x g למשך 3 דקות כדי להפריד את התאים, וזרקו בזהירות את הנוזל העליון המכיל את שאריות מצע ההקפאה. השרו בעדינות את משקע התאים ב-10 מ"ל של מצע תרבית טרי. עבור תאים נצמדים, חלקו את התמיסה בין שני צלוחיות תרבית T25; עבור תרבויות תמיסה, העבירו את כל המצע לצלוחית T25 אחת כדי לקדם אינטראקציה וצמיחה יעילות של התאים. הקפידו על פרוטוקולי תת-תרבות קבועים להמשך צמיחה ותחזוקה של קו התאים, כדי להבטיח תוצאות ניסוי אמינות.
אטמוספירת דגירה	37°C, 5%_CO2, אווירה לחה.
ציפוי בקבוק	אף אחד
הליך ההקפאה	שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
תנאי משלוח	שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
תנאי אחסון	לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

עקרות	זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה. כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

תאי HROC296

מידע כללי

מאפיינים

נתונים רגולטוריים

נתונים ביו-מולקולריים

טיפול

בקרת איכות / פרופיל גנטי / HLA