תאי HROC24 T1 M1

‏800.00 ‏$*

המוצרים נשלחים קפואים בקרח יבש בתוך צינורות קריוגניים. כל צינור קריוגני מכיל בדרך כלל 3 × 10 ⁶ תאים עבור קווי תאים נצמדים או 5 × 10⁶ תאים עבור קווי תאים בתמיסה (לפרטים נוספים, עיין בתעודת ה-CoA של האצווה).

מחירים לא כולל מיסים בתוספת עלויות משלוח

cryovial

מספר מוצר: 300813

גיליון בטיחות

גיליון מוצר

תיאור	זהו אחד מסדרת קווי תאים סרטניים שהוקמו על ידי ד"ר מיכאל לינבכר מ-PDTx (שתלי גידול שמקורם בחולים) מאז 2006.
אורגניזם	אדם
רקמה	מעי גס, שנוצר מ-PDx (שתל זר שמקורו בחולה) של רקמת CRC ראשונית (מעי גס עולה, UICC I, שלב TNM T2N0M0R0L0V1, דירוג G2). Lk(n) + 0, Σ Lk(n) 13
מחלה	אפיתל
אתר גרורתי	לא רלוונטי (שלב I לפי סיווג UICC; TNM T2N0M0; ללא גרורות אזוריות או מרוחקות)
יישומים	מחקר בנושא סרטן המעי הגס; מודלים של סרטן המעי הגס מסוג MSI-H (חוסר יציבות במיקרו-לוויינים); הביולוגיה של סרטן המעי הגס המונעת על ידי מוטציה ב-BRAF V600E; הביולוגיה של סרטן המעי הגס בשלב מוקדם; חיזוי התגובה לאימונותרפיה; מחקר בנושא סרטן המעי הגס הנגזר מ-PDx; מחקרים בבנק ביולוגי המותאם לחולים בעלי HROC
מילים נרדפות	HROC24x

גיל	98 שנים
מגדר	זכר
מוצא אתני	קווקזי
מורפולוגיה	תאים קטנים במושבות
סוג התא	תאי אפיתל
תכונות צמיחה	דבק

ציטוט	HROC24 T1 M1 (מספר קטלוגי Cytion 300813)
רמת בטיחות ביולוגית	1
NCBI_TaxID	9606
CellosaurusAccession	CVCL_1U80
סטטוס GMO	ללא שינוי גנטי; קו תאים מסוג MSI-H של סרטן המעי הגס (CRC) מהטיפוס הפראי, שמקורו בחולה, שהוקם על ידי ד"ר לינבכר (PD) מתוך שתל זר שמקורו בחולה.

Tumorigenic	כן, בעכברים עירומים עם דיכוי חיסוני
נגיפים	נקי מווירוסים פתוגניים לבני אדם SV40, JC/BK, HBV, HCV, HIV.
סטטוס פלואידיות	איופלואידי
סטטוס MSI	MSI-H
פרופיל מוטציוני	APCmut, p53wt, K-Raswt, N-Raswt, H-Ras wt , B-RAFV600E, PIK3CAwt

תרבית ביניים	DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 g/L גלוקוז, w: 2.5 mM L-גלוטמין, w: 15 mM HEPES, w: 0.5 mM נתרן פירובט, w: 1.2 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי Cytion 820400a)
תוספים	הוסף לתווך 10% FBS
חומר מפרק	אקוטאז
זמן הכפלה	20 שעות
תת-תרבות	הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
יחס פיצול	1 עד 3
צפיפות זריעה	2 x 10⁴ תאים/סמ^"ר
חידוש נוזלים	כל 3 עד 5 ימים
התאוששות לאחר הפשרה	מהיר מאוד
חומר הקפאה	כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
הפשרה וגידול תאים	ודא שהבקבוקון נשאר קפוא לחלוטין בעת המסירה, שכן התאים נשלחים בקרח יבש כדי לשמור על טמפרטורה אופטימלית במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, אחסן את הבקבוקון הקריוגני מיד בטמפרטורה נמוכה מ-150°C כדי להבטיח את שמירת שלמות התאים, או המשך לשלב 3 אם נדרשת תרבית מיידית. לצורך תרבית מיידית, הפשיר את הבקבוקון במהירות על ידי טבילתו באמבט מים בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס עם מים נקיים וחומר אנטי-מיקרוביאלי, תוך ערבוב עדין במשך 40-60 שניות עד שנותר גוש קרח קטן. בצע את כל השלבים הבאים בתנאים סטריליים במנדף, וחטא את בקבוקון הקריוואלי באתנול 70% לפני הפתיחה. פתח בזהירות את הבקבוקון המחוטא והעבר את תמיסת התאים לצינור צנטריפוגה בנפח 15 מ"ל המכיל 8 מ"ל של מצע תרבית בטמפרטורת החדר, תוך ערבוב עדין. סובבו את התערובת בצנטריפוגה ב-300 x g למשך 3 דקות כדי להפריד את התאים, וזרקו בזהירות את הנוזל העליון המכיל את שאריות מצע ההקפאה. השרו בעדינות את משקע התאים ב-10 מ"ל של מצע תרבית טרי. עבור תאים נצמדים, חלקו את התמיסה בין שני צלוחיות תרבית T25; עבור תרבויות תמיסה, העבירו את כל המצע לצלוחית T25 אחת כדי לקדם אינטראקציה וצמיחה יעילות של התאים. הקפידו על פרוטוקולי תת-תרבות קבועים להמשך צמיחה ותחזוקה של קו התאים, כדי להבטיח תוצאות ניסוי אמינות.
אטמוספירת דגירה	37°C, 5%_CO2, אווירה לחה.
ציפוי בקבוק	אף אחד
הליך ההקפאה	שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
תנאי משלוח	שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
תנאי אחסון	לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

עקרות	זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה. כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

תאי HROC24 T1 M1

מידע כללי

מאפיינים

נתונים רגולטוריים

נתונים ביו-מולקולריים

טיפול

בקרת איכות וניתוח מולקולרי