תאי HEK293-Rpn11-HTBH

‏800.00 ‏$*

המוצרים נשלחים קפואים בקרח יבש בתוך צינורות קריוגניים. כל צינור קריוגני מכיל בדרך כלל 3 × 10 ⁶ תאים עבור קווי תאים נצמדים או 5 × 10⁶ תאים עבור קווי תאים בתמיסה (לפרטים נוספים, עיין בתעודת ה-CoA של האצווה).

מחירים לא כולל מיסים בתוספת עלויות משלוח

cryovial

מספר מוצר: 305719

גיליון בטיחות

גיליון מוצר

תעודת ניתוח (CoA)

תיאור	תאי HEK293 יציבים - Rpn11-HTBH הם נגזרת שעברה טרנספקציה יציבה של קו התאים HEK293 (Human Embryonic Kidney 293), שהונדסו לביטוי גרסה מתויגת של Rpn11 (הידוע גם כ-PSMD14 או POH1), יחידת המשנה של הדוביקוויטינאז במכלול מכסה הפרוטאזום 26S. Rpn11 הוא דה-אוביקוויטינאז בעל תחום JAMM התלוי ב-Zn²⁺, המסיר שרשראות אוביקוויטין מסובסטרטים הקשורים לפרוטאזום במהלך פירוק פרוטאזומי. התג HTBH (הקס-היסטידין-TEV-פפטיד מקבל ביוטין-הקס-היסטידין) מאפשר טיהור על בסיס זיקה של קומפלקסים המכילים Rpn11 בתנאים טבעיים, מה שהופך את קו התאים הזה למתאים במיוחד לטיהור קומפלקסי פרוטאזום ולמחקרי אינטראקטום. קו תאים זה מתאים למחקרים על ביולוגיית הפרוטאזום 26S, ויסות מסלול האוביקוויטין-פרוטאזום (UPS), תפקוד Rpn11/PSMD14 בבקרת איכות החלבונים, הרכבת הפרוטאזום ודינמיקתו, ומנגנון הפעולה של מעכבי הפרוטאזום. הקו משמש גם לטיהור זיקה של קומפלקסי פרוטאזום טבעיים וכמודל לחקר הביולוגיה של דה-אוביקוויטינאז בהקשר של הפרוטאזום. מערכת התיוג HTBH מאפשרת טיהור קפדני ביותר של קומפלקסים ביוטיניליים באמצעות שיטת "פול-דאון" (pulldowns) המבוססת על סטרפטאווידין. תאי HEK293 יציבים-Rpn11-HTBH מוחזקים כתרבות צמודה ב-DMEM בתוספת 10% FBS והאנטיביוטיקה המתאימה לבחירה, כדי לשמור על ביטוי הגן המהונדס בטמפרטורה של 37°C באטמוספירה לחה של 5% CO₂. התאים עוברים תרבית משנה באמצעות Accutase כאשר הם מגיעים לצפיפות של 80–90% (יחס חלוקה של 1:5 עד 1:10). המדיום מוחלף כל 2–3 ימים.
אורגניזם	אדם
רקמה	כליה
מחלה	כליה עוברית שעברה שינוי/הונצחה (רקע HEK293; טרנסגן Rpn11-HTBH)
יישומים	ביולוגיה של הפרוטאזום 26S; תפקוד Rpn11/PSMD14; מסלול האוביקוויטין-פרוטאזום; טיהור קומפלקס הפרוטאזום; ביולוגיה של דה-אוביקוויטינאז; טיהור על בסיס זיקה באמצעות תווית HTBH; מחקרים על האינטראקטום של הפרוטאזום

מורפולוגיה	דמוי אפיתל
סוג התא	תאי אפיתל
תכונות צמיחה	דבק

ציטוט	תאי HEK293 יציבים - Rpn11-HTBH (מספר קטלוג Cytion 305719)
רמת בטיחות ביולוגית	1
NCBI_TaxID	9606
סטטוס GMO	GMO-S1: נגזרת HEK293 זו מכילה קלטת ביטוי Rpn11-HTBH המשולבת באופן יציב (Rpn11/PSMD14 המסומן בהקס-היסטידין-TEV-פפטיד מקבל ביוטין-הקס-היסטידין). סיווג זה חל אך ורק בגרמניה ועשוי להיות שונה במקומות אחרים.

תרבית ביניים	DMEM, w: 4.5 g/L גלוקוז, w: 4 mM L-גלוטמין, w: 3.7 g/L NaHCO3, w: 1.0 mM נתרן פירובט (מספר קטלוגי Cytion 820300a)
תוספים	הוסף לתווך 10% FBS
חומר מפרק	רוב התאים מתנתקים ב-PBS; במידת הצורך, יש להוסיף Accutase למשך 5 דקות בטמפרטורת החדר
זמן הכפלה	כ-24 עד 36 שעות
תת-תרבות	יש להסיר את התרבית מהמדיום, לשטוף אותה ב-PBS ללא סידן ומגנזיום, לכסות ב-Accutase, להשאיר באינקובציה במשך 8–10 דקות בטמפרטורת החדר, להחזיר את התאים לתמיסה במדיום, לצנטריפוג ב-300×g למשך 3 דקות, לשפוך את הנוזל העליון, ולשתול מחדש במדיום טרי.
יחס פיצול	1 עד 10
צפיפות זריעה	2 עד 4 × 10⁴ תאים/סמ^"ר
חידוש נוזלים	כל 2-3 ימים
חומר הקפאה	כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה.
הפשרה וגידול תאים	ודא שהבקבוקון נשאר קפוא לחלוטין בעת המסירה, שכן התאים נשלחים בקרח יבש כדי לשמור על טמפרטורה אופטימלית במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, אחסן את הבקבוקון הקריוגני מיד בטמפרטורה נמוכה מ-150°C כדי להבטיח את שמירת שלמות התאים, או המשך לשלב 3 אם נדרשת תרבית מיידית. לצורך תרבית מיידית, הפשיר את הבקבוקון במהירות על ידי טבילתו באמבט מים בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס עם מים נקיים וחומר אנטי-מיקרוביאלי, תוך ערבוב עדין במשך 40-60 שניות עד שנותר גוש קרח קטן. בצע את כל השלבים הבאים בתנאים סטריליים במנדף, וחטא את בקבוקון הקריוואלי באתנול 70% לפני הפתיחה. פתח בזהירות את הבקבוקון המחוטא והעבר את תמיסת התאים לצינור צנטריפוגה בנפח 15 מ"ל המכיל 8 מ"ל של מצע תרבית בטמפרטורת החדר, תוך ערבוב עדין. סובבו את התערובת בצנטריפוגה ב-200 x g למשך 5 דקות, והיפטרו בזהירות מהנוזל העליון המכיל את מצע ההקפאה. פעל לפי ההליך המתואר תחת התאוששות לאחר הפשרה
אטמוספירת דגירה	37°C, 5%_CO2, אווירה לחה.
תנאי משלוח	שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
תנאי אחסון	לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

מספר לוט	סוג התעודה	תאריך	מספר קטלוגי
305719-040526	תעודת ניתוח	24. Jun. 2026	305719

תאי HEK293-Rpn11-HTBH

מידע כללי

מאפיינים

נתונים רגולטוריים

נתונים ביו-מולקולריים

טיפול

בקרת איכות וניתוח מולקולרי

תעודת ניתוח (CoA)