תאי HCT116-GFP

‏800.00 ‏$*

המוצרים נשלחים קפואים בקרח יבש בתוך צינורות קריוגניים. כל צינור קריוגני מכיל בדרך כלל 3 × 10 ⁶ תאים עבור קווי תאים נצמדים או 5 × 10⁶ תאים עבור קווי תאים בתמיסה (לפרטים נוספים, עיין בתעודת ה-CoA של האצווה).

מחירים לא כולל מיסים בתוספת עלויות משלוח

מבחנה קריוגנית

מספר מוצר: 305649

גיליון בטיחות

גיליון מוצר

תעודת ניתוח (CoA)

תיאור	HCT116-GFP הוא נגזרת מהונדסת גנטית של קו התאים HCT116 של קרצינומה של המעי הגס האנושי, שהונדסה כך שתבטא באופן קבוע חלבון פלואורסצנטי ירוק (GFP). קו HCT116 ההורי מקורו בסרטן המעי הגס של מטופל בוגר, והוא נמצא בשימוש נרחב כמודל לסרטן המעי הגס עם חוסר בתיקון אי-התאמות (MMR-deficient). ניתוחים ציטוגנטיים הראו שתאי HCT116 מציגים בדרך כלל קריוטיפ כמעט דיפלואידי עם שינויים כרומוזומליים מוגדרים, כולל שינויים מבניים וריאציות במספר העותקים האופייניות לגידולים במעי הגס עם חוסר יציבות במיקרו-סאטליטים. הכנסת גן הדיווח GFP מאפשרת הדמיה בזמן אמת של ההתנהגות התאית מבלי לשנות באופן משמעותי את התכונות הגנטיות והפנוטיפיות הפנימיות של הקו ההורי. תיוג ה-GFP בתאי HCT116-GFP מושג בדרך כלל באמצעות טרנספקציה יציבה, מה שמביא לפלואורסצנציה אחידה המקלה על הדמיית תאים חיים, מעקב אחר תאים וניתוח כמותי של התרבות, נדידה ודינמיקת צמיחת הגידול. שינוי זה בעל ערך רב במיוחד בבדיקות במבחנה ובמודלים של שתלים זרים in vivo, שבהם ביטוי GFP מאפשר ניטור לא פולשני של התקדמות הגידול, התפשטות גרורתית ותגובה להתערבויות טיפוליות. גישות לפרופיל פנוטיפי מבוסס פלואורסצנציה הוכיחו כי קווי תאים של סרטן המעי הגס, כולל HCT116, מפגינים חתימות תאיות מובחנות הניתנות לזיהוי באמצעות מתודולוגיות מבוססות הדמיה, דבר התומך בשימוש בסמנים פלואורסצנטיים כגון GFP ליישומי סינון בעלי תוכן גבוה. HCT116-GFP משמש ככלי אמין לחקר הביולוגיה של סרטן המעי הגס, ומאפשר ניתוח מפורט של התנהגות תאי הגידול, אינטראקציות מיקרו-סביבתיות ויעילות טיפולית הן במחקר בסיסי והן במחקר תרגומי. שינוי גנטי: עבר שינוי יציב באמצעות העברה לנטרווירוס שאינו מסוגל לשכפל את עצמו, כדי לבטא את הרפורט של החלבון הזוהר הירוק ZsGreen1; נשמר כאוכלוסייה פוליקלונלית תחת סלקציה של פורומיצין (1–5 µg/mL). רמת אבטחה S1/BSL-1.
אורגניזם	אדם
רקמה	קולון
מחלה	קרצינומה של המעי הגס
מילים נרדפות	HCT-116, HCT.116, HCT_116, HCT116, HCT116wt, HCT-116/P, HCT-116/parental, CoCL2

גיל	48 שנים
מגדר	זכר
מוצא אתני	קווקזי
תכונות צמיחה	דבק

ציטוט	HCT116-GFP (מספר קטלוג Cytion 305649)
רמת בטיחות ביולוגית	1
NCBI_TaxID	9606
CellosaurusAccession	CVCL_0291
סטטוס GMO	GMO-S1: קו תאים זה מכיל רפורט של חלבון פלואורסצנטי ירוק ZsGreen1, המשולב באופן יציב, שהוכנס באמצעות העברה לנטרווירוס שאינו מסוגל לשכפל את עצמו. אוכלוסיית התאים הפוליקלונלית שהתקבלה נשמרה תחת סלקציה של פורומיצין (1–5 µg/mL). נדרשת רמת בטיחות S1. סיווג זה חל רק בגרמניה ועשוי להיות שונה במקומות אחרים.

ביטוי אנטיגן	ZsGreen1 (חלבון פלואורסצנטי ירוק)
פרופיל מוטציוני	מוטציה: p.Lys437Argfs5, הומוזיגוטית; מוטציה: p.Ile2675Aspfs6, הטרוזיגוטית; מוטציה: p.Arg24Serfs20, הטרוזיגוטית; מוטציה: p.Glu33Argfs20, הטרוזיגוטית; מוטציה: p.Asp74fs21, הטרוזיגוטית; מוטציה: p.Ser45del, הטרוזיגוטית; מוטציה: p.Met1470Cysfs22, הטרוזיגוטית; מוטציה: p.Asn1700Thrfs9, הטרוזיגוטית; מוטציה: p.Gly13Asp, הטרוזיגוטית; מוטציה: p.His1047Arg, הטרוזיגוטית; מוטציה: p.Leu450Ter, הטרוזיגוטית; מוטציה: p.Lys128Serfs35, הומוזיגוטית

תרבית ביניים	McCoys 5a, w: 3.0 g/L גלוקוז, w: יציב גלוטמין, w: 2.0 mM נתרן פירובט, w: 2.2 g/L NaHCO3 (מספר פריט Cytion 820200a)
תוספים	הוסף לתווך 10% FBS
חומר מפרק	אקוטאז
זמן הכפלה	27 שעות; 17.1 שעות; 22 שעות; 25.02 שעות; 36 שעות; 18.14 ± 0.051 שעות; כ-25–48 שעות; 17.4 שעות; כ-21 שעות
צפיפות זריעה	2 עד 4 x 10⁴ תאים/סמ^"ר
חומר הקפאה	כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה.
הפשרה וגידול תאים	ודא שהבקבוקון נשאר קפוא לחלוטין בעת המסירה, שכן התאים נשלחים בקרח יבש כדי לשמור על טמפרטורה אופטימלית במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, אחסן את הבקבוקון הקריוגני מיד בטמפרטורה נמוכה מ-150°C כדי להבטיח את שמירת שלמות התאים, או המשך לשלב 3 אם נדרשת תרבית מיידית. לצורך תרבית מיידית, הפשיר את הבקבוקון במהירות על ידי טבילתו באמבט מים בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס עם מים נקיים וחומר אנטי-מיקרוביאלי, תוך ערבוב עדין במשך 40-60 שניות עד שנותר גוש קרח קטן. בצע את כל השלבים הבאים בתנאים סטריליים במנדף, וחטא את בקבוקון הקריוואלי באתנול 70% לפני הפתיחה. פתח בזהירות את הבקבוקון המחוטא והעבר את תמיסת התאים לצינור צנטריפוגה בנפח 15 מ"ל המכיל 8 מ"ל של מצע תרבית בטמפרטורת החדר, תוך ערבוב עדין. סובבו את התערובת בצנטריפוגה ב-200 x g למשך 5 דקות, והיפטרו בזהירות מהנוזל העליון המכיל את מצע ההקפאה. פעל לפי ההליך המתואר תחת התאוששות לאחר הפשרה
אטמוספירת דגירה	37°C, 5%_CO2, אווירה לחה.
תנאי משלוח	שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
תנאי אחסון	לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

מספר לוט	סוג התעודה	תאריך	מספר קטלוגי
305649-040326	תעודת ניתוח	08. Apr. 2026	305649

תאי HCT116-GFP

מידע כללי

מאפיינים

נתונים רגולטוריים

נתונים ביו-מולקולריים

טיפול

בקרת איכות וניתוח מולקולרי

תעודת ניתוח (CoA)