תאי ETK-1
550.00 $*
המוצרים נשלחים קפואים בקרח יבש בתוך צינורות קריוגניים. כל צינור קריוגני מכיל בדרך כלל 3 × 10 6 תאים עבור קווי תאים נצמדים או 5 × 106 תאים עבור קווי תאים בתמיסה (לפרטים נוספים, עיין בתעודת ה-CoA של האצווה).
מידע כללי
| תיאור | ETK-1 הוא קו תאים של קרצינומה של דרכי המרה תוך-כבדית (IHCCA) אנושית, שהוקם במקור מנוזל הצפק של חולה בוגר הסובל מקרצינומה של דרכי המרה מסוג סרקומטואידי. הגידול שממנו נגזר ETK-1 הציג הן אדנוקרצינומה צינורית והן מרכיבים סרקומטואידיים, וקו התאים משקף את הפנוטיפ הסרקומטואידי. תאי ETK-1 צומחים בהיצמדות כשכבה חד-תאית אפיתלית אחידה בעלת מראה של אבני ריצוף, המורכבת בעיקר מתאים מצולעים קטנים בעלי גרעינים עגולים עד אליפטיים וגרעינונים בולטים. תאים בשלבים מוקדמים של תרבית הראו זמן הכפלה של האוכלוסייה של כ-70 שעות וקריוטיפ היפרדיפלואידי עם מספר כרומוזומים מודאלי באמצע שנות ה-70, התואם לחוסר יציבות כרומוזומלית האופיינית לגידולים ממאירים אגרסיביים בדרכי המרה. מבחינה אימונופנוטיפית, תאי ETK-1 מבטאים סמנים אפיתליאליים של דרכי המרה, כולל γ-גלוטאמיל טרנספפטידאז (GGT), ציטוקראטין 18 (CK18) וציטוקראטין 19 (CK19), מה שמאשר את מקורם הכלנגיוציטי. הם שליליים לסמנים הקשורים להפטוציטים כגון אלפא-פרוטאין (AFP) ואלבומין בתנאים בסיסיים. תאי ETK-1 מבטאים וימנטין, מה שמשקף את מאפייניהם הסרקומטואידיים ואת הפנוטיפ המזנכימלי החלקי שלהם, בעוד שהם אינם מבטאים אנטיגן קרצינו-עוברי (CEA) ואנטיגן פחמימתי 19-9 (CA19-9). פרופיל סמנים זה תואם את המרכיב הסרקומטואידי שנצפה בגידול הראשוני ומדגיש תכונות העולות בקנה אחד עם מאפיינים הדומים למעבר אפיתל-מזנכימלי. ETK-1 שימש גם כמודל לחקר הגמישות התאית וההתמיינות השושלתית בקולנגיוקרצינומה. טיפול במעכב מתיל-טרנספראז ה-DNA 5-אזציטידין גרם לשינויים מורפולוגיים ופנוטיפיים, וכתוצאה מכך נוצר קו תאים נגזר בעל מאפיינים דמויי הפטוציטים, כולל ביטוי של AFP, אלבומין, אינטגרין α1 וטרומבופואטין, יחד עם אובדן של סמנים מרה מסוימים. במודלים של שתלים זרים, תאי ETK-1 שלא טופלו יוצרים גידולים התואמים אדנוקרצינומה צינורית המציגה פנוטיפ דוקטלי. ממצאים אלה מראים כי ETK-1 שומר על גמישות התמיינות ומשמש כמערכת in vitro חשובה לחקר התמיינות-על מאפיתל מרה לתאי כבד, ויסות אפיגנטי והטרוגניות הגידול בקולנגיוקרצינומה תוך-כבדית. |
|---|---|
| אורגניזם | אדם |
| רקמה | גרורתי |
| מחלה | סרטן דרכי המרה |
| אתר גרורתי | מיימת |
| מילים נרדפות | ETK1 |
מאפיינים
| גיל | 61 שנים |
|---|---|
| מגדר | נקבה |
| מוצא אתני | יפנית |
| תכונות צמיחה | דבק |
נתונים רגולטוריים
| ציטוט | ETK-1 (מספר קטלוג Cytion 305529) |
|---|---|
| רמת בטיחות ביולוגית | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_1206 |
נתונים ביו-מולקולריים
| פרופיל מוטציוני | מוטציה: p.Arg175His, הומוזיגוטית |
|---|
טיפול
| תרבית ביניים | RPMI 1640, w: 2.0 mM גלוטמין יציב, w: 2.0 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי של Cytion 820700a) |
|---|---|
| תוספים | הוסף לתווך 10% FBS |
| חומר מפרק | Accutase, 5 דקות, 37°C |
| תת-תרבות | הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי. |
| צפיפות זריעה | 1 עד 3 × 10⁴ תאים לסמ"ר |
| חידוש נוזלים | 2 עד 3 פעמים בשבוע |
| התאוששות לאחר הפשרה | לאחר ההפשרה, צלחת את התאים ב-5 x 104 תאים/סמ"ר והניח לתאים להתאושש מתהליך ההקפאה ולהידבק למשך 24 שעות לפחות. |
| חומר הקפאה | כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה. |
| הפשרה וגידול תאים |
|
| אטמוספירת דגירה | 37°C, 5%CO2, אווירה לחה. |
| תנאי משלוח | שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים. |
| תנאי אחסון | לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי. |
בקרת איכות / פרופיל גנטי / HLA
| אתר גרורתי: | מיימת |
|---|
תעודת ניתוח (CoA)
| מספר לוט | סוג התעודה | תאריך | מספר קטלוגי |
|---|---|---|---|
| 305529-260526 | תעודת ניתוח | 13. Jul. 2026 | 305529 |