תאי DAKIKI

DAKIKI הוא קו תאים לימפובלסטואידיים מסוג B, החיובי לנגיף אפשטיין-בר (EBV) האנושי, המבטא IgA1 על פני השטח ומפריש IgA1 פולימרי. קו התאים נגזר במקור מלימפוציטים היקפיים של חולה בוגר הסובל מסרטן האף והלוע, ולאחר מכן הוקם כתרבות תאים בתמיסה המתרבה ברציפות. התאים מציגים מורפולוגיה לימפובלסטית טיפוסית וגדלים במדיום מבוסס RPMI בתוספת סרום. DAKIKI נמצא בשימוש נרחב כמודל לתאי B אנושיים המייצרים IgA1, במיוחד במחקרים הבוחנים סינתזה של אימונוגלובולינים, ויסות הפרשה וגליקוזילציה פוסט-תרגומית.

ניתוחים ביוכימיים ומבוססי לקטין הראו כי IgA1 המופרש על ידי תאי DAKIKI מציג גליקנים מקושרים O חסרי גלקטוז באזור הציר. ניתוח הרכב המונוסכרידים ו-ELISA לקטין מאשרים העשרה של שאריות N-אצטילגלקטוזאמין (GalNAc) סופיות או α2,6-סיאליליות, צורה גליקנית האופיינית ל-IgA1 בעל גליקוזילציה חריגה הנצפה בנפרופתיה מסוג IgA. טיפול בנוירמינידאז מגביר באופן ניכר את תגובתיות האגלוטינין של Helix aspersa, מה שמעיד על נוכחות של מבנים של GalNAc עם סיאלילציה. בדיקות תפקודיות המשתמשות בשברים מועשרים בגולגי מתאי DAKIKI מדגימות פעילות של CMP-NeuAc:GalNAc-IgA1 α2,6-sialyltransferase, מה שמאשר את היכולת של תאים אלה לבצע סיאלילציה ישירה של גליקנים O-linked חסרי גלקטוז. ניתוחים טרנסקריפציוניים מגלים ביטוי של ST6-GalNAcII אך לא של ST6-GalNAcI, מה שתומך בתפקידו של ST6-GalNAcII בתיווך סיאלילציה α2,6 של GalNAc באזור הציר ב-IgA1.

בנוסף לשימושיותו במחקר הגליקוזילציה, DAKIKI נבדק על תגובתו לגורמים המווסתים תאי B ולאסטרים של פורבול, אשר יכולים לווסת את הפרשת האימונוגלובולינים בקווי תאי B אנושיים מסוימים. בעוד ש-DAKIKI מפריש IgA באופן קבוע, הוא נכלל בין מודלי תאי B שעברו טרנספורמציה על ידי EBV המשמשים לחקר הוויסות של ייצור האימונוגלובולינים ומצבי ההבחנה. בזכות פרופיל הפרשת ה-IgA1 היציב שלו והייצור הניתן לשחזור של גליקנים באזור הציר, חסרי גלקטוז ומצופים בסיאלילציה α2,6, DAKIKI מייצג מערכת in vitro מאופיינת היטב לחקירת מנגנוני גליקוזילציה של IgA1, התמיינות תאי B והפתוגנזה המולקולרית של הפרעות הקשורות ל-IgA.