תאי CLS-ACI-1

‏650.00 ‏$*

המוצרים נשלחים קפואים בקרח יבש בתוך צינורות קריוגניים. כל צינור קריוגני מכיל בדרך כלל 3 × 10 ⁶ תאים עבור קווי תאים נצמדים או 5 × 10⁶ תאים עבור קווי תאים בתמיסה (לפרטים נוספים, עיין בתעודת ה-CoA של האצווה).

מחירים לא כולל מיסים בתוספת עלויות משלוח

cryovial

מספר מוצר: 500459

גיליון בטיחות

גיליון מוצר

תיאור	קו התאים CLS-ACI-1 הוקם בשנת 1998 מקרצינומה מוצקה של השד, אשר הושגה באורגניזם מודל באמצעות מתן פומי של 7,12-dimethylbenzo[a]anthracene (DMBA) במינון של 20 מ"ג לכל קילוגרם משקל גוף. DMBA הוא מוטגן וקרצינוגן חזק וידוע, הנמצא בשימוש נרחב באונקולוגיה ניסויית להשראת סרטן, במיוחד במחקרים הקשורים לסרטן השד. הקמת קו התאים CLS-ACI-1 מרקמת הגידול מאפשרת מחקר מקיף במבחנה של הביולוגיה של סרטן השד, במיוחד בהבנת המנגנונים של קרצינוגנזה המושרית על ידי חומרים כימיים כמו DMBA. מחקרים במבחנה המשתמשים בקו התאים CLS-ACI-1 מספקים תובנות חשובות על המסלולים התאיים והשינויים הגנטיים הקשורים לקרצינומות בשד. קו תאים זה משמש ככלי חשוב למחקר אונקולוגי, כולל בדיקת תרופות, מנגנוני עמידות ותגובה תאית לחומרים פרמקולוגיים. כקו תאים רציף, CLS-ACI-1 מציע מודל עקבי וניתן לשכפול לחקר ההתקדמות והטיפול בסרטן השד, ומקל על פיתוח אסטרטגיות טיפוליות יעילות יותר נגד קרצינומות דומות הנגרמות על ידי חומרים כימיים בבני אדם.
אורגניזם	חולדה
רקמה	שד
מחלה	אדנוקרצינומה
מילים נרדפות	CLS-ACI-I

זן/תת-זן	ACI
גיל	3 חודשים
מגדר	נקבה
מורפולוגיה	דמוי אפיתל
תכונות צמיחה	דבק/השעיה

ציטוט	CLS-ACI-1 (מספר קטלוגי Cytion 500459)
רמת בטיחות ביולוגית	1
NCBI_TaxID	10116
CellosaurusAccession	CVCL_5729

אונקוגנים	ביטוי יתר של הגן Mycn.
Tumorigenic	כן, בעכברים עירומים, ACI-rat
קריוטיפ	קרוב לשלישייה. 88.4% מציגים 51-69 כרומוזומים, 5% 38-50 כרומוזומים, 6.6% קרוב לרביעייה או רמת פלואידיות גבוהה יותר.

תרבית ביניים	DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 g/L גלוקוז, w: 2.5 mM L-גלוטמין, w: 15 mM HEPES, w: 0.5 mM נתרן פירובט, w: 1.2 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי Cytion 820400a)
תוספים	הוסף לתווך 10% FBS
חומר מפרק	אקוטאז
תת-תרבות	אסוף את תאי התרחיף בצינור של 15 מ"ל ושטוף בעדינות את התאים הנצמדים עם PBS ללא סידן ומגנזיום (השתמש ב-3-5 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-5-10 מ"ל עבור בקבוקי T75). החל Accutase (1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25, 2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75) תוך הקפדה על כיסוי מלא של שכבת התאים. אפשר לתאים להתפתח בטמפרטורת החדר למשך 10 דקות. לאחר ההתפתחות, שלב וצנטריפוג את התאים המרחפים והדבוקים. לאחר הצנטריפוגה, השב בזהירות את משקע התאים והעבר את תמיסת התאים לבקבוקים חדשים המכילים מדיום טרי.
צפיפות זריעה	2 x 10⁴ תאים/סמ^"ר יניבו שכבה צפופה תוך כ-6 עד 7 ימים.
חידוש נוזלים	כל 3 עד 5 ימים
התאוששות לאחר הפשרה	לאחר ההפשרה, צלחת את התאים ב-5 x 10⁴ תאים/סמ"^ר והניח לתאים להתאושש מתהליך ההקפאה ולהידבק למשך 24 שעות לפחות.
חומר הקפאה	כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
הפשרה וגידול תאים	ודא שהבקבוקון נשאר קפוא לחלוטין בעת המסירה, שכן התאים נשלחים בקרח יבש כדי לשמור על טמפרטורה אופטימלית במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, אחסן את הבקבוקון הקריוגני מיד בטמפרטורה נמוכה מ-150°C כדי להבטיח את שמירת שלמות התאים, או המשך לשלב 3 אם נדרשת תרבית מיידית. לצורך תרבית מיידית, הפשיר את הבקבוקון במהירות על ידי טבילתו באמבט מים בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס עם מים נקיים וחומר אנטי-מיקרוביאלי, תוך ערבוב עדין במשך 40-60 שניות עד שנותר גוש קרח קטן. בצע את כל השלבים הבאים בתנאים סטריליים במנדף, וחטא את בקבוקון הקריוואלי באתנול 70% לפני הפתיחה. פתח בזהירות את הבקבוקון המחוטא והעבר את תמיסת התאים לצינור צנטריפוגה בנפח 15 מ"ל המכיל 8 מ"ל של מצע תרבית בטמפרטורת החדר, תוך ערבוב עדין. סובבו את התערובת בצנטריפוגה ב-300 x g למשך 3 דקות כדי להפריד את התאים, וזרקו בזהירות את הנוזל העליון המכיל את שאריות מצע ההקפאה. השרו בעדינות את משקע התאים ב-10 מ"ל של מצע תרבית טרי. עבור תאים נצמדים, חלקו את התמיסה בין שני צלוחיות תרבית T25; עבור תרבויות תמיסה, העבירו את כל המצע לצלוחית T25 אחת כדי לקדם אינטראקציה וצמיחה יעילות של התאים. הקפידו על פרוטוקולי תת-תרבות קבועים להמשך צמיחה ותחזוקה של קו התאים, כדי להבטיח תוצאות ניסוי אמינות.
אטמוספירת דגירה	37°C, 5%_CO2, אווירה לחה.
ציפוי בקבוק	אף אחד
הליך ההקפאה	שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
תנאי משלוח	שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
תנאי אחסון	לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

עקרות	זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה. כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

תאי CLS-ACI-1

מידע כללי

מאפיינים

נתונים רגולטוריים

נתונים ביו-מולקולריים

טיפול

בקרת איכות וניתוח מולקולרי