תאי CHO-K1 (מותאמים לגידול בתמיסה)
מידע כללי
| תיאור | תאי CHO-K1 הם תת-קו תאים הנגזר מקו התאים CHO, אשר הוקם במקור בתחילת שנות ה-50 משחלה של אוגר סיני. תאי CHO-K1 נמצאים בשימוש נרחב בייצור נוגדנים מונוקלונליים טיפוליים ותרופות ביולוגיות אחרות. השימוש הנרחב בהם בייצור חלבונים ביולוגיים ותרופות ביולוגיות מיוחס לאופיים האוקריוטי, המאפשר קיפול, הרכבה ושינויים פוסט-תרגומיים כגון גליקוזילציה, המשפיעים על היציבות, היעילות והבטיחות של החלבונים המיוצרים. בתחום ייצור החלבונים הרקומביננטיים, קו התאים CHO-K1 משמש לביטוי מגוון רחב של חלבונים, כולל נוגדנים מונוקלונליים, גורמי גדילה, ציטוקינים ואנזימים. לחלבונים אלה יש יישומים בטיפולים תרפויטיים, בדיקות אבחון ופורמולות חיסונים. תאי CHO-K1 מציגים קצב גדילה חזק ומסתגלים לתנאי תרבית שונים, כולל תרבית בתמיסה ותרבית דבוקה, מה שהופך אותם ליקרי ערך בתהליכי ייצור ביולוגי בקנה מידה גדול. הם בעלי רמת יציבות גנטית גבוהה ומשמשים לפיתוח קווי תאים יציבים, שכן הם מסוגלים להגביר ולבטא גנים אקסוגניים ביעילות, דבר חיוני לייצור תשואות גבוהות של חלבונים רקומביננטיים. תאי CHO-K1 של אוגר סיני ניתנים בקלות להחדרה באמצעות מגוון וקטורים לביטוי גנים, מה שמקל על עריכת גנים או השבתתם. גמישות זו מאפשרת לחוקרים להחדיר גנים ספציפיים, להשתיק גנים או אפילו לבצע עריכת גנים ממוקדת באמצעות טכנולוגיות כמו CRISPR-Cas9 בתאי מארח CHO-K1. לסיכום, תאי האוגר הסיני CHO-K1 ותאי CHO הם מרכזיים במחקר ביוטכנולוגי ובייצור ביו-פרמצבטי, ומספקים פלטפורמה רב-תכליתית לחקר תפקוד גנים וייצור בקנה מידה גדול של חלבונים רקומביננטיים. |
|---|---|
| אורגניזם | אוגר סיני |
| רקמה | שחלה |
| יישומים | קו תאים זה הוא הבחירה האופטימלית עבור טוקסיקולוגיה, ביוטכנולוגיה תעשייתית וביו-ייצור. |
| מילים נרדפות | CHO K1, CHOK1, שיבוט תאים CHO K1, GM15452 |
מאפיינים
| גיל | מבוגר |
|---|---|
| מגדר | נקבה |
| מורפולוגיה | דמוי אפיתל |
| תכונות צמיחה | השעיה |
נתונים רגולטוריים
| ציטוט | תמיסת CHO-K1 שעברה התאמה (מספר קטלוג Cytion 603486) |
|---|---|
| רמת בטיחות ביולוגית | 1 |
| NCBI_TaxID | 10029 |
| CellosaurusAccession | CVCL_0214 |
נתונים ביו-מולקולריים
| רגישות לנגיפים | סטומטיטיס שלפוחיתית (אינדיאנה), נגיף גטה עמידות לנגיפים: נגיף פוליו 2, נגיף מודוק, נגיף באטון ווילו |
|---|---|
| טרנסקריפטאז הפוך | שלילי |
| קריוטיפ | התפלגות תדירות הכרומוזומים 50 תאים: 2n = 22. מספר הגזע הוא היפודיפלואידי |
טיפול
| תרבית ביניים | CD CHO של ThermoFisher, ללא סרום, מוכן לשימוש. |
|---|---|
| תוספים | L-גלוטמין: יש להוסיף עד לריכוז סופי של 8 מ"מ (בדרך כלל 40 מ"ל לכל ליטר של תמיסת בסיס בריכוז 200 מ"מ) לפני השימוש. זהו תנאי הכרחי עבור תאי CD CHO. יש להוסיף לתמיסת התאים חומר מונע התגבשות ביחס של 1:100 ותוסף HT ביחס של 1:100. |
| חומר מפרק | אף אחד |
| זמן הכפלה | 22 שעות |
| תת-תרבות | הומוגניזציה עדינה של תמיסת התאים בבקבוק באמצעות פיפטה למעלה ולמטה, ולאחר מכן לקיחת דגימה מייצגת כדי לקבוע את צפיפות התאים למ"ל. דילול התמיסה כדי להשיג ריכוז תאים של 1 x 105 תאים/מ"ל עם מצע תרבית טרי, וחלוקת התמיסה המותאמת לבקבוקים חדשים להמשך התרבית. |
| צפיפות זריעה | 4 × 105 תאים/מ"ל |
| חידוש נוזלים | 2 עד 3 פעמים בשבוע |
| חומר הקפאה | כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה. |
| הפשרה וגידול תאים |
|
| אטמוספירת דגירה | 37°C, 5% CO₂, אווירה לחה. יש לגדל את התאים על מנענע אורביטלי בבקבוקי ארלנמאייר עם מחיצות, במהירות של 110 סיבובים לדקה. |
| תנאי משלוח | שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים. |
| תנאי אחסון | לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי. |
בקרת איכות וניתוח מולקולרי
| עקרות | זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה. כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות. |
|---|
תעודת ניתוח (CoA)
| מספר לוט | סוג התעודה | תאריך | מספר קטלוגי |
|---|---|---|---|
| 603486-160126 | תעודת ניתוח | 26. Mar. 2026 | 603480 |