תאי CHO-BCMA
מידע כללי
| תיאור | הצהרת פטור מאחריות: המחירים המוצגים עבור קווי התאים מיועדים אך ורק ללקוחות אקדמיים או ללא כוונת רווח. עבור גופים מסחריים, המחיר הוא כ-6,250 אירו. CHO-BCMA הוא קו תאים רקומביננטי יציב של שחלות אוגר סיני (CHO), שהונדס כדי לבטא את האנטיגן האנושי המלא של התבגרות תאי B (BCMA; TNFRSF17/CD269). קו התאים נוצר באמצעות מערכת רקומבינציה עם "משטח נחיתה" ספציפי לאתר, המאפשרת שילוב גנומי ניתן לשחזור וביטוי יציב של הגן היעד. BCMA הוא קולטן טרנסממברני המתבטא בעיקר בתאי B בוגרים ובתאי פלזמה, שם הוא מווסת את הישרדות התאים ואת התרבותם באמצעות אינטראקציה עם הליגנדים BAFF ו-APRIL. לקולטן חשיבות רבה במיאלומה נפוצה ובמחלות ממאירות אחרות של תאי B, מה שהופך את תאי CHO-BCMA לשימושיים לסינון נוגדנים טיפוליים, לפיתוח CAR-T ומפעילים דו-ספציפיים של תאי T, למחקרי קישור לקולטנים ולפיתוח בדיקות מבוססות ציטומטריית זרימה. |
|---|---|
| אורגניזם | אוגר סיני |
| רקמה | שחלה |
| מחלה | שחלה של אוגר סיני, שאינה ממאירה; מהונדסת גנטית לביטוי שטח של BCMA (CD269/TNFRSF17) |
| יישומים | בדיקת נוגדנים; פיתוח טיפול המכוון ל-BCMA; אימות תאי CAR-T; מחקר על מיאלומה נפוצה; ציטומטריית זרימה |
מאפיינים
| מורפולוגיה | דמוי אפיתל |
|---|---|
| סוג התא | תאי אפיתל |
| תכונות צמיחה | דבק/השעיה |
נתונים רגולטוריים
| ציטוט | CHO-BCMA (מספר קטלוגי של Cytion: 305972) |
|---|---|
| רמת בטיחות ביולוגית | 1 |
| NCBI_TaxID | 10029 |
| CellosaurusAccession | CVCL_A8V3 |
| סטטוס GMO | GMO-S1: קו תאים CHO זה מכיל קלטת ביטוי של BCMA התומכת בניתוחי תפקוד הקולטן. סיווג זה חל אך ורק בגרמניה ועשוי להיות שונה במקומות אחרים. |
נתונים ביו-מולקולריים
| קולטנים מבוטאים | BCMA, TNFRSF17/CD269 |
|---|
טיפול
| תרבית ביניים | לתרבויות דבקות: DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 g/L גלוקוז, w: 2.5 mM L-גלוטמין, w: 15 mM HEPES, w: 0.5 mM נתרן פירובט, w: 1.2 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי Cytion 820400a) לתרבויות בתמיסה: CHO Growth Medium A (מ-InSCREENeX; מספר קטלוגי InSCREENeX INS-ME-1039) |
|---|---|
| תוספים | לתרבויות דבקות: הוסף לתמיסה 5% FBS. הוסף Geneticin (G418-Sulfat) כדי להגיע לריכוז סופי של 0.5 מ"ג/מ"ל. |
| חומר מפרק | לתרבויות דבקות: טריפסין-EDTA |
| זמן הכפלה | כ-14–16 שעות |
| תת-תרבות | לגידול תאים נצמדים שגרתי: שאבו את המדיום הישן מהתאים הנצמדים ושטפו אותם ב-PBS כדי להסיר את כל שאריות המדיום. לאחר שאיבת ה-PBS, הוסף את הנפח המתאים של תמיסת טריפסין/EDTA בהתאם לגודל כלי התרבית (לדוגמה, 1 מ"ל עבור בקבוק T25, 3 מ"ל עבור בקבוק T75) והדגיר בטמפרטורת החדר או ב-37°C למשך 5-10 דקות, או עד שהתאים יתנתקו. עקבו אחר ההתנתקות תחת מיקרוסקופ, ובמידת הצורך טפחו קלות על הכלי כדי לשחרר את התאים. לאחר ההתנתקות, הוסיפו מצע מלא כדי להשבית את הטריפסין/EDTA, ערבבו קלות את התאים והעבירו חלק מהתאים המושהים לכלי תרבית חדש המכיל מצע טרי. הכניסו את הכלי לאינקובטור המכוון ל-37°C עם 5%CO2, והחליפו את המצע כל 2-3 ימים. |
| יחס פיצול | מומלץ להשתמש ביחס של 1:5 עד 1:10 |
| צפיפות זריעה | 2 עד 4 × 10⁵ תאים/מ"ל |
| חידוש נוזלים | 2 עד 3 פעמים בשבוע |
| אטמוספירת דגירה | 37°C, 5%CO2, אווירה לחה. |