תאים מסוג B-LCL-HROG02
777.00 $*
המוצרים נשלחים קפואים בקרח יבש בתוך צינורות קריוגניים. כל צינור קריוגני מכיל בדרך כלל 3 × 10 6 תאים עבור קווי תאים נצמדים או 5 × 106 תאים עבור קווי תאים בתמיסה (לפרטים נוספים, עיין בתעודת ה-CoA של האצווה).
מידע כללי
| תיאור | B-LCL-HROG02 הוא קו תאים לימפובלסטואידיים מסוג B שעבר טרנספורמציה על ידי נגיף אפשטיין-בר (EBV) (B-LCL) שהוקמה מדם היקפי של גבר לבן בן 68, חולה בסרטן הקיבה, במסגרת סדרת הביו-בנק HROG, המקבילה לסרטן הקיבה של אוסף ה-B-LCL לסרטן המעי הגס HROC. הפיכתם של לימפוציטים B ראשוניים מדם היקפי לתאים נצחיים במבחנה, בתיווך EBV, יצרה קו תאים בתמיסה המתרבה באופן יציב ובעל מורפולוגיה דמוית לימפובלסט. תאי HROG02 מבטאים באופן קבוע אנטיגנים של EBV במצב רדום (EBNA-1, -2, -3, LMP-1, -2) וכן רמות גבוהות של מולקולות HLA מסוג I ו-II, מולקולות גירוי משותף CD80 ו-CD86, מולקולות הדבקה CD54 ו-CD58, וסמני תאי B CD19, CD20 ו-CD23. B-LCL-HROG02 משמש בבדיקות תפקודיות של תאי T ותאי NK, בסיווג HLA, בתגובות לימפוציטים מעורבות, במחקרים על הצגת אנטיגנים ובפרוטוקולים להשראת תאי CTL. במסגרת מאגר הביולוגי HROG המותאם לחולים, הוא מספק נקודת ייחוס אימונולוגית מוגדרת למחקר סרטן הקיבה, ומאפשר מחקרים אוטולוגיים או אלוגניים של תגובות חיסוניות הקשורות לגידול. הקו תומך במחקרים על תגובתיות תאי T ספציפית לסרטן הקיבה ובמערכות בדיקה חיסונית המותאמות לחולים, הרלוונטיות לאימונולוגיה של גידולי הקיבה. B-LCL-HROG02 מתורבת בתמיסה בתרבית RPMI 1640 בתוספת 15–20% FBS בטמפרטורה של 37°C באטמוספירה לחה של 5% CO₂. התאים מועברים כל 2–3 ימים על ידי דילול ל-2–5 × 10⁵ תאים/מ"ל. אין צורך בפירוק אנזימטי. כל העבודה עם קו תאים חיובי ל-EBV זה חייבת לעמוד בדרישות הבטיחות הביולוגית של BSL-2 ובתקנות המוסדיות והלאומיות החלות על חומר ביולוגי שעבר טרנספורמציה על ידי EBV. |
|---|---|
| אורגניזם | אדם |
| רקמה | דם היקפי |
| מחלה | קו תאים לימפובלסטואידיים מסוג B שעברו טרנספורמציה על ידי נגיף EBV (B-LCL); תורם הקשור לסרטן הקיבה |
| יישומים | מחקר באימונולוגיה; בדיקות תאי T ותאי NK; סיווג HLA; מחקרים על הצגת אנטיגנים; תגובות לימפוציטים מעורבות; תאי מטרה בבדיקת CTL; אימונולוגיה של סרטן הקיבה |
מאפיינים
| גיל | 68 שנים |
|---|---|
| מגדר | זכר |
| מוצא אתני | קווקזי |
| מורפולוגיה | דמוי לימפוציט |
| סוג התא | לימפוציט B |
| תכונות צמיחה | השעיה |
נתונים רגולטוריים
| ציטוט | B-LCL-HROG02 (מספר קטלוג של Cytion: 302106) |
|---|---|
| רמת בטיחות ביולוגית | 2 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| סטטוס GMO | GMO-S2: תאי B-LCL אלה מכילים אפיזום של נגיף EBV המוחזק באופן יציב, המקודד לגנים של השלב הרדום הנגיפי (EBNA-1/-2/-3, LMP-1/-2). EBV מסווג כפתוגן מקבוצת סיכון 2. הטיפול בו מחייב תנאי בידוד BSL-2. סיווג זה חל בגרמניה; התקנות עשויות להיות שונות בתחומי שיפוט אחרים. |
נתונים ביו-מולקולריים
| נגיפים | טרנספורמנט: EBV |
|---|
טיפול
| תרבית ביניים | RPMI 1640, w: 2.0 mM גלוטמין יציב, w: 2.0 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי של Cytion 820700a) |
|---|---|
| תוספים | יש להוסיף למדיום 15–20% FBS |
| זמן הכפלה | 24 עד 48 שעות |
| תת-תרבות | יש לדלל את התרבית ל-2–5 × 10⁵ תאים/מ"ל באמצעות מצע מלא טרי שחומם מראש, אחת ל-2–3 ימים. יש לספור את התאים החיים לפני העברה, כדי לשמור על צפיפות אופטימלית. אין לאפשר לתרבויות לעבור את הריכוז של 2 × 10⁶ תאים/מ"ל. ניתן להשתמש בצנטריפוגה (300 × g, 5 דקות) להחלפת התווך במידת הצורך. אין צורך בפירוק אנזימטי. |
| יחס פיצול | 1 עד 4 |
| צפיפות זריעה | 2 עד 5 × 10⁵ תאים/מ"ל |
| חידוש נוזלים | כל 2-3 ימים |
| חומר הקפאה | כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה. |
| הפשרה וגידול תאים |
|
| אטמוספירת דגירה | 37°C, 5%CO2, אווירה לחה. |
| תנאי משלוח | שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים. |
| תנאי אחסון | לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי. |