תאי AKATA

‏550.00 ‏$*

המוצרים נשלחים קפואים בקרח יבש בתוך צינורות קריוגניים. כל צינור קריוגני מכיל בדרך כלל 3 × 10 ⁶ תאים עבור קווי תאים נצמדים או 5 × 10⁶ תאים עבור קווי תאים בתמיסה (לפרטים נוספים, עיין בתעודת ה-CoA של האצווה).

מחירים לא כולל מיסים בתוספת עלויות משלוח

cryovial

מספר מוצר: 305510

גיליון בטיחות

גיליון מוצר

תעודת ניתוח (CoA)

תיאור	קו התאים AKATA, שמקורו בלימפומה של בורקיט, הוא מודל נפוץ לחקר רדמת נגיף אפשטיין-בר (EBV) והפעלתו מחדש. EBV הוא נגיף הרפס נפוץ הקשור למגוון סוגי סרטן, כולל לימפומה של בורקיט, ובדרך כלל יוצר זיהום רדום בתאי B. בתאי AKATA, EBV נשמר במצב אפיסומלי עם תוכנית רדמת מסוג I, ומבטא קבוצה מוגבלת של גנים נגיפיים כגון EBNA-1, EBER RNAs ו-BamHI-A rightward transcripts (BARTs). ביטוי גנים מוגבל זה מאפשר לנגיף להישאר במארח מבלי ליזום מחזור ליטי מלא. עם זאת, תאי AKATA יכולים להיות מופעלים כדי להיכנס לשלב הליטי, שבו הנגיף מתרבה באופן פעיל ומייצר צאצאים. הפעלה מחדש זו נגרמת בדרך כלל באמצעות קישור צולב של אימונוגלובולינים על פני השטח, מה שהופך את תאי AKATA לכלי מצוין לחקר הדינמיקה של הפעלה מחדש של EBV וויסות גנים נגיפיים. מחקרים המשתמשים בקו התאים AKATA בחנו גם את ההשפעה של חומרים כימותרפיים על הפעלה מחדש של EBV. לדוגמה, תרופות כמו אתופוסיד ודוקסורוביצין הוכחו כמשפיעות על רמת הרדמות הנגיף. אתופוסיד גורם לאפופטוזיס בתאי AKATA, אך מפעיל מחדש את EBV בצורה פחות יעילה מדוקסורוביצין, המקדמת רמות גבוהות יותר של ביטוי גנים ליטיים וייצור צאצאים נגיפיים. בנוסף, מחקרים העוסקים בטכניקות עריכת גנים, כגון CRISPR/Cas9, בחנו את תפקידם של רגולטורים אפיגנטיים בתאי AKATA. לדוגמה, נוקאאוט של היסטון מתילטרנספראז EZH2 בתאי AKATA משבש את שמירת הרדמת הנגיף על ידי הפחתת הטרימתילציה של היסטון H3K27, מה שמוביל לעלייה בביטוי של גנים רדומים וליטיים של EBV, כמו גם לשכפול נגיפי מוגבר ולהתרבות תאים. תאי AKATA מציגים גם מאפיינים פנוטיפיים מובהקים המבוססים על נוכחות EBV, כגון רגישות מוגברת לחומרים המשרים אפופטוזיס וריאציות בביטוי גנים הקשורים למסלולי אפופטוזיס. הבדלים אלה הופכים את תאי AKATA החיוביים ל-EBV למודל רב עוצמה לניתוח השפעת EBV על הישרדות תאי המארח, ביטוי גנים ומחזור החיים של הנגיף, במיוחד בהקשר של התפתחות סרטן והתערבויות טיפוליות פוטנציאליות המכוונות לגידולים ממאירים הקשורים ל-EBV.
אורגניזם	אדם
רקמה	דם
מחלה	לימפומה מסוג ברקיט
מילים נרדפות	אקאטה, אקאטה-BL, אקאטה BL, אקאטה-EC, אקאטה-תרבות מוקדמת

גיל	4 שנים
מגדר	נקבה
מוצא אתני	יפנית
מורפולוגיה	לימפוציט
סוג התא	תא B
תכונות צמיחה	השעיה

ציטוט	AKATA (מספר קטלוגי Cytion 305510)
רמת בטיחות ביולוגית	2
NCBI_TaxID	9606
CellosaurusAccession	CVCL_0148

נגיפים	טרנספורמנט: EBV

תרבית ביניים	RPMI 1640, w: 2.0 mM גלוטמין יציב, w: 2.0 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי של Cytion 820700a)
תוספים	הוסף לתווך 10% FBS
תת-תרבות	אסוף את תאי התרחיף בצינור של 15 מ"ל ושטוף בעדינות את התאים הנצמדים עם PBS ללא סידן ומגנזיום (השתמש ב-3-5 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-5-10 מ"ל עבור בקבוקי T75). החל Accutase (1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25, 2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75) תוך הקפדה על כיסוי מלא של שכבת התאים. אפשר לתאים להתפתח בטמפרטורת החדר למשך 10 דקות. לאחר ההתפתחות, שלב וצנטריפוג את התאים המרחפים והדבוקים. לאחר הצנטריפוגה, השב בזהירות את משקע התאים והעבר את תמיסת התאים לבקבוקים חדשים המכילים מדיום טרי.
חומר הקפאה	כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
הפשרה וגידול תאים	ודא שהבקבוקון נשאר קפוא לחלוטין בעת המסירה, שכן התאים נשלחים בקרח יבש כדי לשמור על טמפרטורה אופטימלית במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, אחסן את הבקבוקון הקריוגני מיד בטמפרטורה נמוכה מ-150°C כדי להבטיח את שמירת שלמות התאים, או המשך לשלב 3 אם נדרשת תרבית מיידית. לצורך תרבית מיידית, הפשיר את הבקבוקון במהירות על ידי טבילתו באמבט מים בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס עם מים נקיים וחומר אנטי-מיקרוביאלי, תוך ערבוב עדין במשך 40-60 שניות עד שנותר גוש קרח קטן. בצע את כל השלבים הבאים בתנאים סטריליים במנדף, וחטא את בקבוקון הקריוואלי באתנול 70% לפני הפתיחה. פתח בזהירות את הבקבוקון המחוטא והעבר את תמיסת התאים לצינור צנטריפוגה בנפח 15 מ"ל המכיל 8 מ"ל של מצע תרבית בטמפרטורת החדר, תוך ערבוב עדין. סובבו את התערובת בצנטריפוגה ב-300 x g למשך 3 דקות כדי להפריד את התאים, וזרקו בזהירות את הנוזל העליון המכיל את שאריות מצע ההקפאה. השרו בעדינות את משקע התאים ב-10 מ"ל של מצע תרבית טרי. עבור תאים נצמדים, חלקו את התמיסה בין שני צלוחיות תרבית T25; עבור תרבויות תמיסה, העבירו את כל המצע לצלוחית T25 אחת כדי לקדם אינטראקציה וצמיחה יעילות של התאים. הקפידו על פרוטוקולי תת-תרבות קבועים להמשך צמיחה ותחזוקה של קו התאים, כדי להבטיח תוצאות ניסוי אמינות.
אטמוספירת דגירה	37°C, 5%_CO2, אווירה לחה.
ציפוי בקבוק	אף אחד
הליך ההקפאה	שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
תנאי משלוח	שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
תנאי אחסון	לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

עקרות	זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה. כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

מספר לוט	סוג התעודה	תאריך	מספר קטלוגי
305510-130225	תעודת ניתוח	23. May. 2025	305510
305510-200326	תעודת ניתוח	04. May. 2026	305510

תאי AKATA

מידע כללי

מאפיינים

נתונים רגולטוריים

נתונים ביו-מולקולריים

טיפול

בקרת איכות וניתוח מולקולרי

תעודת ניתוח (CoA)