תאי AAV-293

‏395.00 ‏$*

המוצרים נשלחים קפואים בקרח יבש בתוך צינורות קריוגניים. כל צינור קריוגני מכיל בדרך כלל 3 × 10 ⁶ תאים עבור קווי תאים נצמדים או 5 × 10⁶ תאים עבור קווי תאים בתמיסה (לפרטים נוספים, עיין בתעודת ה-CoA של האצווה).

מחירים לא כולל מיסים בתוספת עלויות משלוח

cryovial

מספר מוצר: 305127

גיליון בטיחות

גיליון מוצר

תעודת ניתוח (CoA)

תיאור	קו התאים AAV-293 הוא קו תאים קבוע שהוקם מתאי כליה עובריים ראשוניים של אדם שעברו שינוי באמצעות DNA של אדנו-וירוס מסוג 5. הגנים המקודדים על ידי אזור E1 של האדנו-וירוס (E1a ו-E1b) באים לידי ביטוי בתאים אלה ומשתתפים בהפעלה צולבת של מקדמי וירוסים, מה שמאפשר לתאים אלה לייצר רמות גבוהות של חלבון. AAV-293 נגזר מקו התאים ההורי 293, באמצעות שיבוט וסבבים מרובים של בדיקות, AAV-293 נבחר במיוחד לרמת ייצור AAV גבוהה במערכת ללא עזרה. הוא מציע מספר יתרונות על פני תאי 293 הרגילים: שטח פנים גדול יותר של התא, מה שמביא לטרנספקציה גבוהה יותר ותפוקה טובה יותר של AAV. היתרונות הם מורפולוגיה שטוחה, היצמדות איתנה לצלחת התרבית, והתאים אידיאליים לתרבית בקנה מידה גדול וייצור AAV. נגיף אדנו-אסוציאטיבי (AAV) שייך למשפחת Parvoviridae, קבוצת נגיפים מהקטנים ביותר מבין נגיפי ה-DNA החד-גדיליים וחסרי המעטפת. עד היום דווח על תשעה סרוטיפים שונים של AAV. AAV יכול להדביק תאים מתחלקים ולא מתחלקים כאחד, וניתן לשמור אותו בתא המארח האנושי, מה שיוצר פוטנציאל להעברת גנים לטווח ארוך. AAV-2 רקומביננטי הוא הסרוטיפ הנפוץ ביותר המשמש להעברת גנים, וניתן לייצר אותו בריכוזים גבוהים באמצעות נגיף עוזר או תאי AAV-293.
אורגניזם	אדם
רקמה	כליה עוברת
מילים נרדפות	AAV293

גיל	עובר
מגדר	נקבה
מורפולוגיה	אפיתל
תכונות צמיחה	דבק

ציטוט	AAV-293 (מספר קטלוגי Cytion 305127)
רמת בטיחות ביולוגית	1
NCBI_TaxID	9606
CellosaurusAccession	CVCL_6871
סטטוס GMO	GMO-S1: קו AAV-293 זה, שמקורו ב-HEK293, מכיל שינויים קלונליים התומכים בייצור וקטור AAV. סיווג זה חל רק בגרמניה ועשוי להיות שונה במקומות אחרים.

תרבית ביניים	DMEM, w: 4.5 g/L גלוקוז, w: 4 mM L-גלוטמין, w: 3.7 g/L NaHCO3, w: 1.0 mM נתרן פירובט (מספר קטלוגי Cytion 820300a)
תוספים	הוסף לתמיסה 10% FBS, 0.1 mM NEAA
חומר מפרק	אקוטאז
תת-תרבות	הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים באינקובציה בטמפרטורת החדר למשך 5 דקות כדי לנתק אותם. לאחר האינקובציה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
חידוש נוזלים	2 עד 3 פעמים בשבוע
חומר הקפאה	כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
הפשרה וגידול תאים	ודא שהבקבוקון נשאר קפוא לחלוטין בעת המסירה, שכן התאים נשלחים בקרח יבש כדי לשמור על טמפרטורה אופטימלית במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, אחסן את הבקבוקון הקריוגני מיד בטמפרטורה נמוכה מ-150°C כדי להבטיח את שמירת שלמות התאים, או המשך לשלב 3 אם נדרשת תרבית מיידית. לצורך תרבית מיידית, הפשיר את הבקבוקון במהירות על ידי טבילתו באמבט מים בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס עם מים נקיים וחומר אנטי-מיקרוביאלי, תוך ערבוב עדין במשך 40-60 שניות עד שנותר גוש קרח קטן. בצע את כל השלבים הבאים בתנאים סטריליים במנדף, וחטא את בקבוקון הקריוואלי באתנול 70% לפני הפתיחה. פתח בזהירות את הבקבוקון המחוטא והעבר את תמיסת התאים לצינור צנטריפוגה בנפח 15 מ"ל המכיל 8 מ"ל של מצע תרבית בטמפרטורת החדר, תוך ערבוב עדין. סובבו את התערובת בצנטריפוגה ב-300 x g למשך 3 דקות כדי להפריד את התאים, וזרקו בזהירות את הנוזל העליון המכיל את שאריות מצע ההקפאה. השרו בעדינות את משקע התאים ב-10 מ"ל של מצע תרבית טרי. עבור תאים נצמדים, חלקו את התמיסה בין שני צלוחיות תרבית T25; עבור תרבויות תמיסה, העבירו את כל המצע לצלוחית T25 אחת כדי לקדם אינטראקציה וצמיחה יעילות של התאים. הקפידו על פרוטוקולי תת-תרבות קבועים להמשך צמיחה ותחזוקה של קו התאים, כדי להבטיח תוצאות ניסוי אמינות.
אטמוספירת דגירה	37°C, 5%_CO2, אווירה לחה.
ציפוי בקבוק	אף אחד
הליך ההקפאה	שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
תנאי משלוח	שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
תנאי אחסון	לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

עקרות	זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה. כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

מספר לוט	סוג התעודה	תאריך	מספר קטלוגי
305127-120825	תעודת ניתוח	22. Oct. 2025	305127

תאי AAV-293

מידע כללי

מאפיינים

נתונים רגולטוריים

נתונים ביו-מולקולריים

טיפול

בקרת איכות וניתוח מולקולרי

תעודת ניתוח (CoA)