תאי A375

‏395.00 ‏$*

המוצרים נשלחים קפואים בקרח יבש בתוך צינורות קריוגניים. כל צינור קריוגני מכיל בדרך כלל 3 × 10 ⁶ תאים עבור קווי תאים נצמדים או 5 × 10⁶ תאים עבור קווי תאים בתמיסה (לפרטים נוספים, עיין בתעודת ה-CoA של האצווה).

מחירים לא כולל מיסים בתוספת עלויות משלוח

cryovial

מספר מוצר: 300110

גיליון בטיחות

גיליון מוצר

תעודת ניתוח (CoA)

תיאור	קו תאי מלנומה אנושית A375, המבודד מעורה של חולה בת 54 עם מלנומה ממאירה, הוא משאב משמעותי במחקר הסרטן, במיוחד בחקר מלנומה אנושית, אחת מצורות הסרטן העור האגרסיביות ביותר. קו התאים A375 ידוע בקצב הגדילה המהיר ובפוטנציאל הגידול הגבוה שלו, מה שהופך אותו מתאים ליישומים ניסיוניים שונים, כולל מחקרים במבחנה על התרבות תאים, נדידה וחדירה, וכן בדיקות גידולים in vivo. תאי A375 מפגינים פוטנציאל גבוה ליצירת גידולים בעכברים עם דיכוי חיסוני, ויוצרים מלנומות אמלנוטיות הצומחות במהירות. נוכחות המוטציה BRAFV600E בתאי A375 הופכת אותם לרגישים ביותר לעיכוב MEK, מה שהופך אותם לכלי חשוב לחקר טיפולים ממוקדים בטיפול במלנומה. הטיפול בתאי A375 באמצעות vemurafenib, למשל, הוכח כמשפר את האינדוקציה של מולקולות MHC Class I ו-Class II, ומספק תובנות על האינטראקציות בין תאי מלנומה למערכת החיסון. בנוסף לתפקידם במחקר בסיסי על מלנומה, תאי A375 משמשים בסינון תרופות ובחקר מסלולי איתות המעורבים בהישרדות, התרבות וגרורות של תאי סרטן. תאי A375 שימשו גם במחקרים על אפופטוזיס, וקווי תאים איזוגניים A375 והכנסת חלבוני דיווח כמו-Luc (luc2) מאפשרים לחקור את תפקוד הגנים ולעקוב אחר התגובות התאיות בזמן אמת. התאמתם של תאי A375 כמאכסנים לטרנספקציה ושימושם בקווי תאים יציבים לדיווח תורמים גם הם לרב-תכליתיותם ביישומים מחקריים. לסיכום, קו התאים A375 של מלנומה אנושית הוא כלי מרכזי בחקר מלנומה אנושית, המציע מודל מקיף לחקר המנגנונים המולקולריים והתאיים העומדים בבסיס התקדמות המלנומה, היעילות של חומרים טיפוליים והאינטראקציה בין תאי סרטן למערכת החיסון.
אורגניזם	אדם
רקמה	עור
מחלה	מלנומה
מילים נרדפות	A 375, A-375, A375-MEL, A375-mel, A375mel

גיל	54 שנים
מגדר	נקבה
מורפולוגיה	דמוי אפיתל
תכונות צמיחה	דבק

ציטוט	A375 (מספר קטלוגי Cytion 300110)
רמת בטיחות ביולוגית	1
NCBI_TaxID	9606
CellosaurusAccession	CVCL_0132

ביטוי אנטיגן	P53 חיובי
Tumorigenic	כן, בעכברים עירומים
פרופיל מוטציוני	BRAF V600Emut
קריוטיפ	תאי A375 מאופיינים בקריוטיפ היפותריפלואידי, עם מספר כרומוזומים מודאלי של 62, ונוכחות של תשעה כרומוזומים סמנים בכל תא, המדגישים את השינויים הגנטיים הקשורים למלנומה ממאירה.

תרבית ביניים	DMEM, w: 4.5 g/L גלוקוז, w: 4 mM L-גלוטמין, w: 3.7 g/L NaHCO3, w: 1.0 mM נתרן פירובט (מספר קטלוגי Cytion 820300a)
תוספים	הוסף לתווך 10% FBS
חומר מפרק	אקוטאז
זמן הכפלה	20 שעות
תת-תרבות	הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
צפיפות זריעה	1 x 10⁴ תאים/סמ^"ר יניבו שכבה חד-תאית מלוכדת תוך 4 ימים.
חידוש נוזלים	2 עד 3 פעמים בשבוע
התאוששות לאחר הפשרה	לאחר ההפשרה, צלחו את התאים ב-4 x 10⁴ תאים/סמ"^ר והניחו לתאים להתאושש מתהליך ההקפאה ולהידבק למשך 24 שעות לפחות.
חומר הקפאה	כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
הפשרה וגידול תאים	ודא שהבקבוקון נשאר קפוא לחלוטין בעת המסירה, שכן התאים נשלחים בקרח יבש כדי לשמור על טמפרטורה אופטימלית במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, אחסן את הבקבוקון הקריוגני מיד בטמפרטורה נמוכה מ-150°C כדי להבטיח את שמירת שלמות התאים, או המשך לשלב 3 אם נדרשת תרבית מיידית. לצורך תרבית מיידית, הפשיר את הבקבוקון במהירות על ידי טבילתו באמבט מים בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס עם מים נקיים וחומר אנטי-מיקרוביאלי, תוך ערבוב עדין במשך 40-60 שניות עד שנותר גוש קרח קטן. בצע את כל השלבים הבאים בתנאים סטריליים במנדף, וחטא את בקבוקון הקריוואלי באתנול 70% לפני הפתיחה. פתח בזהירות את הבקבוקון המחוטא והעבר את תמיסת התאים לצינור צנטריפוגה בנפח 15 מ"ל המכיל 8 מ"ל של מצע תרבית בטמפרטורת החדר, תוך ערבוב עדין. סובבו את התערובת בצנטריפוגה ב-300 x g למשך 3 דקות כדי להפריד את התאים, וזרקו בזהירות את הנוזל העליון המכיל את שאריות מצע ההקפאה. השרו בעדינות את משקע התאים ב-10 מ"ל של מצע תרבית טרי. עבור תאים נצמדים, חלקו את התמיסה בין שני צלוחיות תרבית T25; עבור תרבויות תמיסה, העבירו את כל המצע לצלוחית T25 אחת כדי לקדם אינטראקציה וצמיחה יעילות של התאים. הקפידו על פרוטוקולי תת-תרבות קבועים להמשך צמיחה ותחזוקה של קו התאים, כדי להבטיח תוצאות ניסוי אמינות.
אטמוספירת דגירה	37°C, 5%_CO2, אווירה לחה.
ציפוי בקבוק	אף אחד
הליך ההקפאה	שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
תנאי משלוח	שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
תנאי אחסון	לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

עקרות	זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה. כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.
אללים HLA	A: '01:01:01, '02:01:01 B: '44:03:01, '57:01:01 C: 06:02:01, 16:01:01 DRB1: 04:05:01, 07:01:01 DQA1: '02:01:01, '03:03:01 DQB1: 03:02:01, 03:03:02 DPB1*: 04:01:01 E: '01:01:01, '01:03

מספר לוט	סוג התעודה	תאריך	מספר קטלוגי
300110-190525	תעודת ניתוח	21. Jul. 2025	300110
300110-931122w	תעודת ניתוח	15. Apr. 2025	300110

מופעל על ידי Bioz לפרטים נוספים על Bioz

תאי A375

עובדות מרכזיות אודות תאי A375

תכונות של קו תאי מלנומה A375

מפרט טכני

גנוטיפ של קו התאים A375

טיפול

פרופיל גנטי

תעודת ניתוח (CoA)