เซลล์ HK-CRISPR-Nup188-mEGFP

€800.00*การแปล: "การแปล"

ผลิตภัณฑ์จะถูกจัดส่งในสภาพแช่แข็งบนน้ำแข็งแห้งในหลอดเก็บตัวอย่างแบบฉนวนความเย็น (cryotubes) โดยแต่ละหลอดจะบรรจุเซลล์ประมาณ 3 × 10 ⁶ เซลล์ สำหรับสายเซลล์ที่เกาะผนัง หรือ 5 × 10⁶ เซลล์ สำหรับสายเซลล์แบบแขวนลอย (โปรดดูรายละเอียดเพิ่มเติมในใบรับรองการวิเคราะห์ (CoA) ของแต่ละล็อต)

ราคาไม่รวมภาษีและค่าจัดส่ง

cryovial

หมายเลขสินค้า: 300657

เอกสารข้อมูลความปลอดภัย

แผ่นข้อมูลผลิตภัณฑ์

ใบรับรองการวิเคราะห์ (CoA)

ข้อตกลงบุคคลที่สาม

คำอธิบาย	HK-CRISPR-Nup188-mEGFP เป็นสายพันธุ์เซลล์ Hela Kyoto ที่ถูกดัดแปลงพันธุกรรม โดยใช้เทคโนโลยี CRISPR/Cas9 เพื่อแทรกยีน mEGFP (โปรตีนเรืองแสงสีเขียวที่เพิ่มประสิทธิภาพแบบโมโนเมอร์) เข้าสู่ตำแหน่ง Nup188Nup188 เป็นโปรตีนนิวคลีโอพอรินที่สำคัญซึ่งเกี่ยวข้องกับคอมเพล็กซ์รูพรุนนิวเคลียส มีความจำเป็นสำหรับการขนส่งโมเลกุลระหว่างนิวเคลียสและไซโทพลาสซึม การติดแท็ก mEGFP ช่วยให้สามารถมองเห็น Nup188 แบบเรียลไทม์ ช่วยในการศึกษาพลวัตและการทำงานของคอมเพล็กซ์รูพรุนนิวเคลียส สายเซลล์นี้มีประโยชน์อย่างยิ่งสำหรับนักวิจัยที่มุ่งเน้นการศึกษาการขนส่งผ่านนิวเคลียสและชีววิทยาของคอมเพล็กซ์รูพรุนนิวเคลียส การติดแท็กด้วยสารเรืองแสงช่วยให้สามารถสังเกต Nup188 ได้ภายใต้สภาวะต่างๆ รวมถึงการทดลองด้วยยาและการดัดแปลงพันธุกรรม การประยุกต์ใช้รวมถึงการคัดกรองแบบเนื้อหาสูง การถ่ายภาพเซลล์มีชีวิต และเทคนิคที่ใช้การเรืองแสงอื่นๆ ซึ่งให้ข้อมูลเชิงลึกที่มีคุณค่าเกี่ยวกับการขนส่งระหว่างนิวเคลียสและไซโตพลาสซึม รวมถึงความสมบูรณ์ของเยื่อหุ้มนิวเคลียส
สิ่งมีชีวิต	มนุษย์
เนื้อเยื่อ	ปากมดลูกส่วนใน
โรค	อะดีโนคาร์ซิโนมา

อายุ	30 ปี
เพศ	เพศหญิง
เชื้อชาติ	แอฟริกันอเมริกัน
สัณฐานวิทยา	เซลล์คล้ายเยื่อบุผิวที่มีรูปร่างเป็นหินแบบโมเสก
คุณสมบัติการเติบโต	ยึดติด

การอ้างอิง	HK-CRISPR-Nup188-mEGFP (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 300657)
ระดับความปลอดภัยทางชีวภาพ	1
NCBI TaxID	9606
ผู้ฝากเงิน	ห้องปฏิบัติการเอลเลนเบิร์ก (EMBL)
สถานะของสิ่งมีชีวิตดัดแปลงพันธุกรรม	GMO-S1: สายพันธุ์ HeLa Kyoto นี้มีการแทรก CRISPR ของ mEGFP ที่ตำแหน่ง Nup188 ซึ่งช่วยให้สามารถมองเห็นพลวัตของโครงสร้างโครงร่างรูพรุนในนิวเคลียสได้ การจำแนกประเภทนี้ใช้เฉพาะในเยอรมนีเท่านั้นและอาจแตกต่างกันในที่อื่น

การแสดงออกของโปรตีน	Nup188, mEGFP-แท็ก

อาหารเลี้ยงเชื้อ	DMEM, w: 4.5 กรัม/ลิตร กลูโคส, w: 4 มิลลิโมลาร์ แอล-กลูตามีน, w: 3.7 กรัม/ลิตร NaHCO3, w: 1.0 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต (หมายเลขบทความ Cytion 820300a)
อาหารเสริม	เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
สารละลายตัวแยก	แอคคูเทส
การเพาะเลี้ยงเชื้อแบบแยกส่วน	นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
สื่อเลี้ยงเซลล์แบบแช่แข็ง	ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
การละลายและการเพาะเลี้ยงเซลล์	ยืนยันว่าขวดยังคงแช่แข็งอย่างสมบูรณ์เมื่อได้รับสินค้า เนื่องจากเซลล์ถูกจัดส่งบนน้ำแข็งแห้งเพื่อรักษาอุณหภูมิที่เหมาะสมระหว่างการขนส่ง เมื่อได้รับแล้ว ให้เก็บ cryovial ทันทีที่อุณหภูมิต่ำกว่า -150 องศาเซลเซียส เพื่อรักษาความสมบูรณ์ของเซลล์ หรือดำเนินการตามขั้นตอนที่ 3 หากจำเป็นต้องเพาะเลี้ยงทันที สำหรับการเพาะเลี้ยงทันที ให้ละลายน้ำแข็งในหลอดอย่างรวดเร็วโดยแช่หลอดในอ่างน้ำที่อุณหภูมิ 37°C พร้อมน้ำสะอาดและสารต้านจุลชีพ คนเบา ๆ เป็นเวลา 40-60 วินาที จนกระทั่งเหลือเพียงก้อนน้ำแข็งขนาดเล็ก ดำเนินการขั้นตอนต่อไปทั้งหมดภายใต้สภาวะปลอดเชื้อในตู้ลมไหล โดยฆ่าเชื้อขวดแช่แข็งด้วยแอลกอฮอล์ 70% ก่อนเปิด เปิดขวดยาฆ่าเชื้ออย่างระมัดระวัง และถ่ายโอนสารแขวนลอยเซลล์ลงในหลอดปั่นเหวี่ยงขนาด 15 มิลลิลิตรที่มีอาหารเลี้ยงเชื้อที่อุณหภูมิห้อง 8 มิลลิลิตร โดยคนเบา ๆ ปั่นเหวี่ยงส่วนผสมที่ความเร็ว 300 x g เป็นเวลา 3 นาที เพื่อแยกเซลล์ออกจากกัน แล้วเทส่วนใสที่อยู่ด้านบนซึ่งมีสารแช่แข็งตกค้างออกอย่างระมัดระวัง ค่อยๆ ผสมเซลล์ที่ตกตะกอนให้ละลายในอาหารเลี้ยงเชื้อใหม่ 10 มิลลิลิตร สำหรับเซลล์ที่เกาะติด ให้แบ่งสารแขวนลอยลงในขวดเลี้ยงเชื้อ T25 สองขวด สำหรับการเลี้ยงแบบแขวนลอย ให้ถ่ายอาหารเลี้ยงเชื้อทั้งหมดลงในขวด T25 ขวดเดียว เพื่อส่งเสริมการปฏิสัมพันธ์และการเจริญเติบโตของเซลล์อย่างมีประสิทธิภาพ ปฏิบัติตามระเบียบปฏิบัติของกลุ่มวัฒนธรรมย่อยที่กำหนดไว้สำหรับการเติบโตและการบำรุงรักษาของเซลล์ไลน์อย่างต่อเนื่อง เพื่อให้มั่นใจในผลลัพธ์การทดลองที่เชื่อถือได้
บรรยากาศการบ่มเพาะ	37°C, 5%_CO2, บรรยากาศชื้น
การเคลือบขวด	สำหรับการยึดเกาะและการมีชีวิตที่ดีที่สุดหลังการละลาย เราแนะนำให้ใช้ขวดหรือจานเคลือบคอลลาเจน
ขั้นตอนการแช่แข็ง	เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า
เงื่อนไขการจัดส่ง	เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า
เงื่อนไขการเก็บรักษา	สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

ความปราศจากเชื้อ	การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

หมายเลขล็อต	ประเภทใบรับรอง	วันที่	หมายเลขแคตตาล็อก
300657-171123	ใบรับรองการวิเคราะห์	23. May. 2025	300657

โปรดทราบว่าสายเซลล์นี้ไม่สามารถใช้ได้ภายใต้ข้อตกลง Cytion MTA มาตรฐาน เนื่องจากต้องใช้ข้อตกลงกับบุคคลที่สามและ/หรือต้องเจรจากับผู้ให้สิทธิ์เดิม

เซลล์ HK-CRISPR-Nup188-mEGFP

ข้อมูลทั่วไป

ลักษณะ

ข้อมูลด้านกฎระเบียบ

ข้อมูลชีวโมเลกุล

การจัดการ

การควบคุมคุณภาพ / โปรไฟล์ทางพันธุกรรม / HLA

ใบรับรองการวิเคราะห์ (CoA)

ข้อตกลงบุคคลที่สาม