Celice Wilms8

800,00 €*

Izdelki se pošiljajo zamrznjeni v suhem ledu v kriotubah. Vsaka kriotuba običajno vsebuje 3 × 10 ⁶ celic za adhezivne linije ali 5 × 10⁶ celic za suspenzijske linije (podrobnosti so navedene v certifikatu o analizi serije).

Cene brez davkov in stroškov dostave

cryovial

Številka izdelka: 300416

Varnostni list

List izdelka

Sporazum o prenosu materiala

Opis	Celična linija Wilms8 je bila pridobljena iz primarnega Wilmsovega tumorja pri pediatričnem bolniku z zarodno mutacijo WT1. Za to celično linijo je značilna homozigotna nesmiselna mutacija v genu WT1 (c.1168 C>T, p.R390X), ki povzroči popolno izgubo funkcije WT1. WT1 je ključnega pomena za normalen razvoj ledvic, njegova inaktivacija pa je skupna značilnost nekaterih agresivnih podtipov Wilmsovega tumorja, zlasti tistih, ki kažejo mezenhimsko diferenciacijo. Wilms8 je zato dragocen model za preučevanje učinkov izgube WT1 na tumorigenezo, zlasti v okviru Wilmsovih tumorjev, ki nastanejo z izrazito stromalno komponento. Poleg mutacije WT1 imajo celice Wilms8 tudi mutacijo v genu CTNNB1 (p.S45A), ki kodira β-katenin, ključni regulator signalne poti Wnt. Mutacija na serinu 45 prekine normalen proces fosforilacije, ki vodi do razgradnje β-katenina, kar povzroči njegovo stabilizacijo in kopičenje v jedru. To povzroči konstitutivno aktivacijo signalizacije Wnt, ki spodbuja proliferacijo celic in prispeva k onkogenim lastnostim celične linije Wilms8. Zaradi medsebojnega vpliva med izgubo WT1 in aberantno signalizacijo Wnt je linija Wilms8 ključni model za razumevanje molekularnih mehanizmov, na katerih temeljijo te poti v biologiji tumorjev Wilms. Celice Wilms8 imajo mezenhimski fenotip, za katerega je značilno izražanje vimentina in odsotnost epitelijskih označevalcev, kot je citokeratin. To se ujema s stromalno diferenciacijo, opaženo v prvotnem tumorju. Celice kažejo omejeno sposobnost nadaljnje mezenhimske diferenciacije, na primer oblikovanje mišicam podobnih celic pod posebnimi pogoji. Proteomske analize Wilms8 so razkrile aktivacijo številnih receptorskih tirozin kinaz (RTK), vključno s PDGFRβ in AXL, ki sodelujejo pri ključnih procesih, kot so preživetje, migracija in proliferacija celic. K agresivnim značilnostim celic Wilms8 prispeva tudi aktivacija signalnih poti, zlasti poti MAPK in PI3K/AKT. Na splošno je celična linija Wilms8 pomembno orodje za raziskovanje molekularne osnove tumorja Wilms, ki ga povzročata izguba WT1 in aberantna signalizacija Wnt. Zaradi svojih genetskih in fenotipskih značilnosti je zanesljiva platforma za preučevanje interakcije med temi kritičnimi potmi in za ugotavljanje morebitnih terapevtskih ciljev pri tumorjih Wilms s stromalno komponento.
Organizem	Človek
Tkivo	Ledvice
Bolezen	Wilmsov tumor
Aplikacije	In vitro model celične kulture. Biokemične študije

Starost	8 mesecev
Spol	Moški
Etnična pripadnost	Kavkaški
Morfologija	Vretenasta oblika
Vrsta celice	Wilmsove celice
Lastnosti rasti	Pripadajoče

Citiranje	Wilms8 (kataloška številka Cytion 300416)
Raven biološke varnosti	1
NCBI_TaxID	9606
CellosaurusAccession	CVCL_A5SJ

Mutacijski profil	Status mutacije WT1: homozigotna c.1168C>T, p.390x, LOH: , status mutacije CTNNB1: heterozigotna TCT>GCT, p.S45A

Medij za gojenje	Komplet MSCGM (Lonza)
Reagent za disociacijo	Accutase
Subkultiviranje	Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Sredstvo za zamrzovanje	Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Odmrzovanje in gojenje celic	Prepričajte se, da je viala ob dostavi globoko zamrznjena, saj se celice pošiljajo na suhem ledu, da se med prevozom ohranijo optimalne temperature. Po prejemu kriovial takoj shranite pri temperaturi pod -150 °C, da zagotovite ohranitev celične celovitosti, ali pa nadaljujte s korakom 3, če je potrebno takojšnje gojenje. Za takojšnje gojenje vialo hitro odtalite tako, da jo potopite v vodno kopel s čisto vodo in protimikrobnim sredstvom pri 37 °C ter 40-60 sekund nežno mešate, dokler ne ostane majhen ledeni kepica. Vse nadaljnje korake izvajajte v sterilnih pogojih v pretočni nape, pred odprtjem pa kriovial razkužite s 70 % etanolom. Previdno odprite razkuženo vialo in celično suspenzijo prenesite v 15-mililitrsko centrifugirno epruveto, ki vsebuje 8 ml gojišča sobne temperature, ter nežno premešajte. Mešanico centrifugirajte pri 300 x g 3 minute, da ločite celice, in previdno zavrzite supernatant, ki vsebuje ostanke zamrzovalnega gojišča. Pelet celic nežno ponovno suspendirajte v 10 ml svežega gojišča. Pri adherentnih celicah suspenzijo razdelite med dve bučki T25; pri suspenzijskih kulturah prenesite vse gojišče v eno bučko T25, da spodbudite učinkovito interakcijo in rast celic. Upoštevajte uveljavljene protokole subkultur za nadaljnjo rast in vzdrževanje celične linije ter tako zagotovite zanesljive rezultate poskusov.
Inkubacijska atmosfera	37 °C, 5 %_CO2, vlažno ozračje.
Prevleka za bučke	Nič
Postopek zamrzovanja	Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.
Pogoji pošiljanja	Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.
Pogoji shranjevanja	Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Sterilnost	Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence. Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.
Aleli HLA	A: '02:01:01, '03:01:01 B: '15:01:01, '37:01:01 C: '04:01:01, '06:02:01 DRB1: '08:01:01G, '11:01:01 DQA1: '04:01:01, '05:05:01 DQB1: '03:01:01, '04:02:01 DPB1*: '03:01:01, '06:01:01 E: '01:03:02

Če nameravate celične linije Cytion uporabljati izključno za notranje raziskave na enem raziskovalnem mestu, izpolnite in podpišite našo pogodbo o prenosu materiala (MTA) in jo predložite skupaj z vašim naročilom.

Za vse komercialne namene – vključno z, vendar ne omejeno na, delo za plačilo, testiranje kakovosti, sproščanje izdelkov, diagnostično uporabo ali regulativne študije – izpolnite obrazec za nameravano uporabo, da bomo lahko pripravili ustrezno pogodbo, prilagojeno vašemu projektu.

Opomba: MTA velja le za določene celične linije. Če se to obvestilo in dokument MTA pojavita na strani izdelka, sporazum velja. Za celične linije, ki niso zajete v MTA, se sklic na sporazum ne prikaže. MTA ne velja za stranke v Ameriki, na Kitajskem ali Tajvanu. Za ustrezen sporazum se obrnite na našo ameriško podružnico.

Celice Wilms8

Splošne informacije

Značilnosti

Regulativni podatki

Biomolekularni podatki

Ravnanje s spletno stranjo

Nadzor kakovosti / Genetski profil / HLA

Sporazum o prenosu materiala