Celice Wilms6

800,00 €*

Izdelki se pošiljajo zamrznjeni v suhem ledu v kriotubah. Vsaka kriotuba običajno vsebuje 3 × 10 ⁶ celic za adhezivne linije ali 5 × 10⁶ celic za suspenzijske linije (podrobnosti so navedene v certifikatu o analizi serije).

Cene brez davkov in stroškov dostave

cryovial

Številka izdelka: 300415

Varnostni list

List izdelka

Potrdilo o analizi (CoA)

Sporazum o prenosu materiala

Opis	Celična linija Wilms6 je bila pridobljena iz primarnega Wilmsovega tumorja pri pediatričnem bolniku z zarodno mutacijo WT1. To celično linijo opredeljuje homozigotna mutacija nonsense v genu WT1 (c.1168 C>T, p.R390X), ki povzroča skrajšano in nefunkcionalno beljakovino WT1. WT1 je ključni regulator razvoja ledvic, njegova izguba pa je močno povezana z Wilmsovim tumorjem, zlasti v primerih z mezenhimsko diferenciacijo. Celična linija Wilms6 je pomemben model za preučevanje tumorigenih učinkov popolne izgube WT1, zlasti pri tumorjih, ki imajo tako epitelijske kot mezenhimske značilnosti. Celice Wilms6 imajo tudi mutacijo v genu CTNNB1, ki prizadene predvsem serin 45 (p.S45F), ključno mesto za fosforilacijo, ki uravnava razgradnjo β-katenina. Ta mutacija povzroči stabilizacijo in jedrno kopičenje β-katenina, kar povzroči konstitutivno aktivacijo signalne poti Wnt. Nenormalna aktivacija signalizacije Wnt je znano gonilo celične proliferacije in tumorigeneze v tumorjih Wilms, zato je Wilms6 dragoceno orodje za raziskovanje vloge disregulacije poti Wnt v tumorjih z mutacijami WT1. Fenotipsko imajo celice Wilms6 mezenhimsko morfologijo z močnim izražanjem vimentina in odsotnostjo epitelijskih označevalcev, kot je citokeratin, kar odraža stromalno naravo prvotnega tumorja. Pokazalo se je, da imajo te celice omejen, vendar opazen diferenciacijski potencial, vključno s sposobnostjo diferenciacije v mišične celice pod posebnimi pogoji, kar odraža mezenhimsko diferenciacijo, opaženo pri nekaterih tumorjih Wilms. Proteomske študije Wilms6 so pokazale aktivacijo številnih receptorskih tirozinskih kinaz (RTK), vključno s PDGFRβ in AXL, ki sodelujejo pri spodbujanju preživetja, proliferacije in migracije celic. Aktivacija signalnih poti, kot sta MAPK in PI3K/AKT, še dodatno poudarja agresivno naravo te celične linije. Na splošno je celična linija Wilms6 ključni model za raziskovanje molekularnih mehanizmov, na katerih temelji razvoj tumorjev Wilms, zlasti v primerih popolne izgube WT1 v kombinaciji z aktivacijo signalizacije Wnt. Zaradi svojih genetskih in fenotipskih značilnosti je odlična platforma za preučevanje medsebojnega vpliva med pomanjkanjem WT1 in aberantnimi signalnimi potmi, kar omogoča vpogled v možne terapevtske cilje za to agresivno vrsto tumorja.
Organizem	Človek
Tkivo	Ledvice
Bolezen	Wilmsov tumor
Aplikacije	In vitro model celične kulture. Biokemične študije

Starost	15 mesecev
Spol	Moški
Etnična pripadnost	Kavkaški
Morfologija	Vretenasta oblika
Vrsta celice	Wilmsove celice
Lastnosti rasti	Pripadajoče

Citiranje	Wilms6 (kataloška številka Cytion 300415)
Raven biološke varnosti	1
NCBI_TaxID	9606
CellosaurusAccession	CVCL_A5SI

Mutacijski profil	Status mutacije WT1: homozigotna c.1168C>T, p.R390x, LOH: 11p11-11pter, status mutacije CTNNB1: homozigotna del TCT, p.DS45

Medij za gojenje	Komplet MSCGM (Lonza)
Reagent za disociacijo	Accutase
Subkultiviranje	Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Sredstvo za zamrzovanje	Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Odmrzovanje in gojenje celic	Prepričajte se, da je viala ob dostavi globoko zamrznjena, saj se celice pošiljajo na suhem ledu, da se med prevozom ohranijo optimalne temperature. Po prejemu kriovial takoj shranite pri temperaturi pod -150 °C, da zagotovite ohranitev celične celovitosti, ali pa nadaljujte s korakom 3, če je potrebno takojšnje gojenje. Za takojšnje gojenje vialo hitro odtalite tako, da jo potopite v vodno kopel s čisto vodo in protimikrobnim sredstvom pri 37 °C ter 40-60 sekund nežno mešate, dokler ne ostane majhen ledeni kepica. Vse nadaljnje korake izvajajte v sterilnih pogojih v pretočni nape, pred odprtjem pa kriovial razkužite s 70 % etanolom. Previdno odprite razkuženo vialo in celično suspenzijo prenesite v 15-mililitrsko centrifugirno epruveto, ki vsebuje 8 ml gojišča sobne temperature, ter nežno premešajte. Mešanico centrifugirajte pri 300 x g 3 minute, da ločite celice, in previdno zavrzite supernatant, ki vsebuje ostanke zamrzovalnega gojišča. Pelet celic nežno ponovno suspendirajte v 10 ml svežega gojišča. Pri adherentnih celicah suspenzijo razdelite med dve bučki T25; pri suspenzijskih kulturah prenesite vse gojišče v eno bučko T25, da spodbudite učinkovito interakcijo in rast celic. Upoštevajte uveljavljene protokole subkultur za nadaljnjo rast in vzdrževanje celične linije ter tako zagotovite zanesljive rezultate poskusov.
Inkubacijska atmosfera	37 °C, 5 %_CO2, vlažno ozračje.
Prevleka za bučke	Nič
Postopek zamrzovanja	Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.
Pogoji pošiljanja	Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.
Pogoji shranjevanja	Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Sterilnost	Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence. Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.
Aleli HLA	A: '02:05:01, '29:01:01 B: '07:05:01, '13:02:01 C: '06:02:01, '15:05:02 DRB1: '07:01:01, '10:01:01 DQA1: '01:05:01, '02:01:01 DQB1: '02:02:01, '05:01:01 DPB1*: '04:02:01, '17:01:01 E: '01:01:01

Številka parcele	Vrsta potrdila	Datum	Kataloška številka
300415-221	Potrdilo o analizi	23. May. 2025	300415

Če nameravate celične linije Cytion uporabljati izključno za notranje raziskave na enem raziskovalnem mestu, izpolnite in podpišite našo pogodbo o prenosu materiala (MTA) in jo predložite skupaj z vašim naročilom.

Za vse komercialne namene – vključno z, vendar ne omejeno na, delo za plačilo, testiranje kakovosti, sproščanje izdelkov, diagnostično uporabo ali regulativne študije – izpolnite obrazec za nameravano uporabo, da bomo lahko pripravili ustrezno pogodbo, prilagojeno vašemu projektu.

Opomba: MTA velja le za določene celične linije. Če se to obvestilo in dokument MTA pojavita na strani izdelka, sporazum velja. Za celične linije, ki niso zajete v MTA, se sklic na sporazum ne prikaže. MTA ne velja za stranke v Ameriki, na Kitajskem ali Tajvanu. Za ustrezen sporazum se obrnite na našo ameriško podružnico.

Celice Wilms6

Splošne informacije

Značilnosti

Regulativni podatki

Biomolekularni podatki

Ravnanje s spletno stranjo

Nadzor kakovosti / Genetski profil / HLA

Potrdilo o analizi (CoA)

Sporazum o prenosu materiala