Celice Wilms3

800,00 €*

Izdelki se pošiljajo zamrznjeni v suhem ledu v kriotubah. Vsaka kriotuba običajno vsebuje 3 × 10 ⁶ celic za adhezivne linije ali 5 × 10⁶ celic za suspenzijske linije (podrobnosti so navedene v certifikatu o analizi serije).

Cene brez davkov in stroškov dostave

cryovial

Številka izdelka: 300414

Varnostni list

List izdelka

Potrdilo o analizi (CoA)

Sporazum o prenosu materiala

Opis	Celična linija Wilms3 je bila pridobljena iz primarnega Wilmsovega tumorja pri pediatričnem bolniku, za katerega je bila značilna somatska mutacija WT1. Za razliko od številnih drugih celičnih linij tumorjev Wilms ima Wilms3 heterozigotsko mutacijo premik okvirja v genu WT1 (c.1293-1294insA, p.V432SfsX87), zaradi česar nastaja skrajšana beljakovina WT1. Ta delna izguba funkcije WT1 je povezana z razvojem tumorjev, ki imajo stromalni ali mezenhimski fenotip. Vendar mutacija WT1 pri Wilms3 ni homozigotna, kar še dodatno zaplete njeno preučevanje, saj ohrani del funkcije WT1, ki lahko drugače vpliva na biologijo tumorja v primerjavi s celičnimi linijami s popolno izgubo WT1. Wilms3 ima tudi mutacijo v genu CTNNB1, ki prizadene predvsem treonin 41 (p.T41A), ki ima ključno vlogo v signalni poti Wnt. Ta mutacija stabilizira β-katenin, kar preprečuje njegovo razgradnjo in vodi do konstitutivne aktivacije poti Wnt. Vztrajna aktivacija signalizacije Wnt spodbuja proliferacijo celic in prispeva k tumorigenezi pri Wilms3, zaradi česar je Wilms3 ključni model za preučevanje vpliva mutacij CTNNB1 v okviru delno funkcionalnega ozadja WT1. Fenotipsko imajo celice Wilms3 mezenhimsko morfologijo, izražajo vimentin in nimajo citokeratina, kar ustreza stromalnim značilnostim, opaženim v prvotnem tumorju. Te celice imajo omejen diferenciacijski potencial, pod posebnimi pogoji pa so sposobne mezenhimske diferenciacije. Proteomske analize Wilms3 so razkrile aktivacijo več receptorskih tirozinskih kinaz (RTK), vključno s PDGFRβ in AXL, ki podpirajo preživetje in proliferacijo celic. Poleg tega se aktivirajo signalne poti, kot sta MAPK in PI3K/AKT, kar krepi maligne lastnosti celic Wilms3. Edinstven vidik Wilms3 je delna funkcionalnost WT1, kar omogoča poseben pogled na to, kako mutacije WT1 prispevajo k biologiji tumorjev Wilms, kadar mutacija ni popolna. Vzajemno delovanje med signalizacijo WT1 in Wnt v Wilms3 ponuja dragoceno priložnost za preučevanje raznolikih vlog, ki jih imata ti poti pri razvoju tumorjev. Na splošno je Wilms3 pomemben model za raziskovanje molekularnih mehanizmov, ki so podlaga za nastanek tumorja Wilms ob delni izgubi WT1 in konstitutivni aktivaciji poti Wnt.
Organizem	Človek
Tkivo	Ledvice
Bolezen	Wilmsov tumor
Aplikacije	In vitro model celične kulture. Biokemične študije

Starost	11-12 mesecev
Spol	Moški
Etnična pripadnost	Kavkaški
Morfologija	Vretenasta oblika
Vrsta celice	Wilmsove celice
Lastnosti rasti	Pripadajoče

Citiranje	Wilms3 (kataloška številka Cytion 300414)
Raven biološke varnosti	1
NCBI_TaxID	9606
CellosaurusAccession	CVCL_A5SF

Mutacijski profil	Status mutacije WT1: homozigotna c.1293-1294insA, p.V432fsx87, LOH: 11p11-11pter, status mutacije CTNNB1: divji tip

Medij za gojenje	Komplet MSCGM (Lonza)
Reagent za disociacijo	Accutase
Subkultiviranje	Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Sredstvo za zamrzovanje	Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Odmrzovanje in gojenje celic	Prepričajte se, da je viala ob dostavi globoko zamrznjena, saj se celice pošiljajo na suhem ledu, da se med prevozom ohranijo optimalne temperature. Po prejemu kriovial takoj shranite pri temperaturi pod -150 °C, da zagotovite ohranitev celične celovitosti, ali pa nadaljujte s korakom 3, če je potrebno takojšnje gojenje. Za takojšnje gojenje vialo hitro odtalite tako, da jo potopite v vodno kopel s čisto vodo in protimikrobnim sredstvom pri 37 °C ter 40-60 sekund nežno mešate, dokler ne ostane majhen ledeni kepica. Vse nadaljnje korake izvajajte v sterilnih pogojih v pretočni nape, pred odprtjem pa kriovial razkužite s 70 % etanolom. Previdno odprite razkuženo vialo in celično suspenzijo prenesite v 15-mililitrsko centrifugirno epruveto, ki vsebuje 8 ml gojišča sobne temperature, ter nežno premešajte. Mešanico centrifugirajte pri 300 x g 3 minute, da ločite celice, in previdno zavrzite supernatant, ki vsebuje ostanke zamrzovalnega gojišča. Pelet celic nežno ponovno suspendirajte v 10 ml svežega gojišča. Pri adherentnih celicah suspenzijo razdelite med dve bučki T25; pri suspenzijskih kulturah prenesite vse gojišče v eno bučko T25, da spodbudite učinkovito interakcijo in rast celic. Upoštevajte uveljavljene protokole subkultur za nadaljnjo rast in vzdrževanje celične linije ter tako zagotovite zanesljive rezultate poskusov.
Inkubacijska atmosfera	37 °C, 5 %_CO2, vlažno ozračje.
Prevleka za bučke	Nič
Postopek zamrzovanja	Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.
Pogoji pošiljanja	Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.
Pogoji shranjevanja	Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Sterilnost	Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence. Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.
Aleli HLA	A: '03:01:01 B: '35:01:01, '35:03:01 C: '04:01:01 DRB1: '04:03:01, '11:04:01 DQA1: '03:01:01, '05:05:01 DQB1: '03:01:01, '03:02:01 DPB1*: '01:01:01, '04:01:01 E: '01:03:02, '01:06:01

Številka parcele	Vrsta potrdila	Datum	Kataloška številka
300414-221	Potrdilo o analizi	23. May. 2025	300414

Če nameravate celične linije Cytion uporabljati izključno za notranje raziskave na enem raziskovalnem mestu, izpolnite in podpišite našo pogodbo o prenosu materiala (MTA) in jo predložite skupaj z vašim naročilom.

Za vse komercialne namene – vključno z, vendar ne omejeno na, delo za plačilo, testiranje kakovosti, sproščanje izdelkov, diagnostično uporabo ali regulativne študije – izpolnite obrazec za nameravano uporabo, da bomo lahko pripravili ustrezno pogodbo, prilagojeno vašemu projektu.

Opomba: MTA velja le za določene celične linije. Če se to obvestilo in dokument MTA pojavita na strani izdelka, sporazum velja. Za celične linije, ki niso zajete v MTA, se sklic na sporazum ne prikaže. MTA ne velja za stranke v Ameriki, na Kitajskem ali Tajvanu. Za ustrezen sporazum se obrnite na našo ameriško podružnico.

Celice Wilms3

Splošne informacije

Značilnosti

Regulativni podatki

Biomolekularni podatki

Ravnanje s spletno stranjo

Nadzor kakovosti / Genetski profil / HLA

Potrdilo o analizi (CoA)

Sporazum o prenosu materiala