Bunky Wilms3

800,00 €*

Produkty sa dodávajú zmrazené na suchom ľade v kryotrubkách. Každá kryotrubka obsahuje zvyčajne 3 × 10 ⁶ buniek pre adhezívne línie alebo 5 × 10⁶ buniek pre suspenzné línie (podrobnosti nájdete v certifikáte analýzy šarže).

Ceny bez daní plus náklady na dopravu

cryovial

Číslo výrobku: 300414

Karta bezpečnostných údajov

Karta výrobku

Certifikát o analýze (CoA)

Dohoda o prenose materiálu

Popis	Bunková línia Wilms3 bola vytvorená z primárneho Wilmsovho nádoru u detského pacienta, ktorý bol charakterizovaný somatickou mutáciou WT1. Na rozdiel od mnohých iných bunkových línií Wilmsovho nádoru je Wilms3 nositeľom heterozygotnej mutácie v géne WT1 (c.1293-1294insA, p.V432SfsX87), ktorá vedie k produkcii skráteného proteínu WT1. Táto čiastočná strata funkcie WT1 je spojená s rozvojom nádorov, ktoré vykazujú stromálny alebo mezenchymálny fenotyp. Mutácia WT1 v bunke Wilms3 však nie je homozygotná, čo zvyšuje zložitosť jej štúdia, keďže si zachováva určitú funkciu WT1, ktorá môže ovplyvňovať biológiu nádoru odlišne v porovnaní s bunkovými líniami s úplnou stratou WT1. Wilms3 nesie aj mutáciu v géne CTNNB1, konkrétne postihujúcu treonín 41 (p.T41A), ktorý zohráva kritickú úlohu v signálnej dráhe Wnt. Táto mutácia stabilizuje β-katenín, čím zabraňuje jeho degradácii a vedie ku konštitutívnej aktivácii dráhy Wnt. Pretrvávajúca aktivácia signalizácie Wnt poháňa proliferáciu buniek a prispieva k nádorovému bujneniu u Wilms3, čo z neho robí kľúčový model na štúdium vplyvu mutácií CTNNB1 v kontexte čiastočne funkčného pozadia WT1. Fenotypovo bunky Wilms3 vykazujú mezenchýmovú morfológiu, exprimujú vimentín a chýba im cytokeratín, čo zodpovedá stromálnym charakteristikám pozorovaným v pôvodnom nádore. Tieto bunky vykazujú obmedzený diferenciačný potenciál so schopnosťou prejsť určitou mezenchýmovou diferenciáciou za špecifických podmienok. Proteomické analýzy Wilms3 odhalili aktiváciu niekoľkých receptorových tyrozínkináz (RTK) vrátane PDGFRβ a AXL, ktoré podporujú prežívanie a proliferáciu buniek. Okrem toho sa aktivujú nadväzujúce signálne dráhy, ako sú MAPK a PI3K/AKT, čo posilňuje malígne vlastnosti buniek Wilms3. Jedným z jedinečných aspektov Wilms3 je jeho čiastočná funkčnosť WT1, ktorá poskytuje osobitný pohľad na to, ako mutácie WT1 prispievajú k biológii Wilmsovho nádoru, keď mutácia nie je úplná. Vzájomné pôsobenie signalizácie WT1 a Wnt v Wilms3 ponúka cennú príležitosť na štúdium diferencovaných úloh, ktoré tieto dráhy zohrávajú pri vývoji nádorov. Celkovo Wilms3 slúži ako dôležitý model na skúmanie molekulárnych mechanizmov, ktoré sú základom Wilmsovho nádoru v prítomnosti čiastočnej straty WT1 a konštitutívnej aktivácie dráhy Wnt.
Organizmus	Ľudské
Tkanivo	Obličky
Choroba	Wilmsov nádor
Aplikácie	Model bunkovej kultúry in vitro. Biochemické štúdie

Vek	11-12 mesiacov
Pohlavie	Muži
Etnická príslušnosť	Kaukazský
Morfológia	Vreteno v tvare vretena
Typ bunky	Wilmsove bunky
Rastové vlastnosti	Adherent

Citácie	Wilms3 (katalógové číslo Cytion 300414)
Úroveň biologickej bezpečnosti	1
NCBI_TaxID	9606
CellosaurusAccession	CVCL_A5SF

Mutačný profil	Stav mutácie WT1: homozygotná c.1293-1294insA, p.V432fsx87, LOH: 11p11-11pter, stav mutácie CTNNB1: divoký typ

Kultúrne médium	Súprava MSCGM (od spoločnosti Lonza)
Disociačné činidlo	Accutase
Subkultivácia	Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Zmrazovacie médium	Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie regenerácie a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Rozmrazovanie a kultivácia buniek	Overte si, že injekčná liekovka zostane pri doručení hlboko zmrazená, pretože bunky sa prepravujú na suchom ľade, aby sa počas prepravy udržala optimálna teplota. Po prijatí buď okamžite uskladnite kryovialku pri teplote nižšej ako -150 °C, aby ste zabezpečili zachovanie bunkovej integrity, alebo prejdite na krok 3, ak je potrebná okamžitá kultivácia. V prípade okamžitej kultivácie injekčnú liekovku rýchlo rozmrazte ponorením do vodného kúpeľa s teplotou 37 °C s čistou vodou a antimikrobiálnym prostriedkom, pričom ju jemne miešajte 40 - 60 sekúnd, kým nezostane malý ľadový chumáč. Všetky ďalšie kroky vykonajte v sterilných podmienkach v prietokovom digestore a pred otvorením kryovialku dezinfikujte 70 % etanolom. Opatrne otvorte dezinfikovanú fľaštičku a preneste bunkovú suspenziu do 15 ml centrifugačnej skúmavky obsahujúcej 8 ml kultivačného média s izbovou teplotou a jemne premiešajte. Zmes odstreďujte pri 300 x g počas 3 minút, aby sa bunky oddelili, a opatrne zlikvidujte supernatant obsahujúci zvyšky zmrazovacieho média. Pelet buniek jemne resuspendujte v 10 ml čerstvého kultivačného média. V prípade adherentných buniek rozdeľte suspenziu medzi dve kultivačné banky T25; v prípade suspenzných kultúr preneste všetko médium do jednej banky T25, aby ste podporili účinnú interakciu a rast buniek. Dodržiavajte zavedené subkultivačné protokoly na nepretržitý rast a udržiavanie bunkovej línie, čím sa zabezpečia spoľahlivé výsledky experimentov.
Inkubačná atmosféra	37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.
Povrchová úprava banky	Žiadne
Postup zmrazovania	Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.
Podmienky prepravy	Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.
Podmienky skladovania	Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Sterilita	Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii. Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.
Alely HLA	A: '03:01:01 B: '35:01:01, '35:03:01 C: '04:01:01 DRB1: '04:03:01, '11:04:01 DQA1: '03:01:01, '05:05:01 DQB1: '03:01:01, '03:02:01 DPB1*: '01:01:01, '04:01:01 E: '01:03:02, '01:06:01

Číslo pozemku	Typ certifikátu	Dátum	Katalógové číslo
300414-221	Certifikát o analýze	23. May. 2025	300414

Ak máte v úmysle používať bunkové línie Cytion výlučne na interný výskum v jednom výskumnom zariadení, vyplňte a podpíšte našu Zmluvu o prevode materiálu (MTA) a odošlite ju spolu s objednávkou.

V prípade akéhokoľvek komerčného využitia – vrátane, ale nielen, práce za odmenu, testovania kontroly kvality, uvedenia produktu na trh, diagnostického využitia alebo regulačných štúdií – vyplňte formulár o zamýšľanom využití, aby sme mohli pripraviť zmluvu prispôsobenú vášmu projektu.

Upozornenie: Zmluva MTA sa vzťahuje iba na určité bunkové línie. Ak sa toto upozornenie a dokument MTA nachádzajú na stránke produktu, zmluva je platná. V prípade bunkových línií, na ktoré sa zmluva MTA nevzťahuje, nebude uvedený žiadny odkaz na zmluvu. Zmluva MTA nie je platná pre zákazníkov v Amerike, Číne alebo na Taiwane. Kontaktujte našu americkú pobočku, aby ste získali príslušnú zmluvu.

Bunky Wilms3

Všeobecné informácie

Charakteristika

Regulačné údaje

Biomolekulárne údaje

Spracovanie

Kontrola kvality / Genetický profil / HLA

Certifikát o analýze (CoA)

Dohoda o prenose materiálu