Bunky LLC-MK2 (pôvodné)

Mraziace médium CM-1 spoločnosti Cytion je najmodernejšie kryokonzervačné médium navrhnuté na zabezpečenie najvyššej úrovne životaschopnosti a funkčnosti buniek po rozmrazení. Toto univerzálne médium je vhodné pre široké spektrum typov buniek vrátane ľudských aj živočíšnych buniek, čo z neho robí základný nástroj pre rôzne výskumné aplikácie. Médium Freeze Medium CM-1, ktorého zloženie obsahuje starostlivo vyváženú kombináciu kryoprotektantov a základných živín, minimalizuje tvorbu ľadových kryštálov a bunkový stres počas procesu zmrazovania, čím zachováva bunkovú integritu.
Kľúčové vlastnosti Freeze Medium CM-1 zahŕňajú:

Široká kompatibilita: Účinné pre širokú škálu typov buniek vrátane primárnych buniek, kmeňových buniek a zavedených bunkových línií.
Vysoká životaschopnosť: Optimalizované na maximalizáciu obnovy a životaschopnosti buniek po rozmrazení, čo zaručuje spoľahlivé výsledky experimentov.
Pripravené na použitie: Pohodlne pripravené a sterilizované na okamžité použitie, čo skracuje čas prípravy a znižuje riziko kontaminácie.
Zvýšená stabilita: Zachováva konzistentný výkon za štandardných podmienok kryokonzervácie, čím zabezpečuje reprodukovateľné výsledky.
Dlhá skladovateľnosť: CM-1 je médium na kryokonzerváciu s obsahom séra, pripravené na použitie, ktoré sa môže skladovať v chladničke až jeden rok.


Používanie CM-1 na zmrazovanie buniek

Ak chcete použiť CM-1 na zmrazovanie adherentných aj suspenzných buniek, postupujte podľa nasledujúcich krokov

V prípade adherentných buniek ich umyte a oddeľte od kultivačného substrátu. V prípade suspenzných buniek prejdite priamo na ďalší krok.
Spočítajte bunky, aby ste sa uistili, že majú správnu koncentráciu.
Odstreďte bunky, aby sa z nich vytvorili pelety, a potom ich znovu rozpusťte v zmrazovacom médiu CM-1.
Resuspendované bunky preneste do kryovínií.
Pred prenosom buniek na dlhodobé uskladnenie použite metódu pomalého zmrazovania





Metóda
Popis
Kroky





❄️
Manuálne zmrazenie

Postupná metóda zahŕňajúca postupné znižovanie teploty na zabezpečenie životaschopnosti buniek

1️⃣ Umiestnite bunky do zmrazovacieho média do mrazničky s teplotou 4 °C na 40 minút.
2️⃣ Preneste do mrazničky s teplotou -80 °C na 24 hodín.
3️⃣ Uskladnite bunky v tekutom dusíku na dlhodobé uchovanie



❄️
Používanie pána Frostyho

Praktické zariadenie, ktoré umožňuje kontrolovanú rýchlosť zmrazovania bez elektrickej energie

1️⃣ Pripravte bunky v kryovíniách s mraziacim médiom.
2️⃣ Umiestnite kryovílie do nádoby Mr. Frosty.
3️⃣ Pred prenesením do tekutého dusíka uchovávajte pri teplote -80 °C po dobu 24 hodín



❄️
Mraznička s riadenou rýchlosťou

Vysoko presná mraznička od spoločnosti Thermo Fisher alebo iných výrobcov určená na riadené znižovanie teploty

1️⃣ Naprogramujte zariadenie na postupné znižovanie teploty.
2️⃣ Umiestnite pripravené bunky do mrazničky.
3️⃣ Po skončení zmrazovacieho cyklu preneste bunky do tekutého dusíka









Kryovílie skladujte pri teplote nižšej ako -130 °C alebo v tekutom dusíku na dlhodobé uchovávanie.


Zloženie

Obsahuje FBS, DMSO, glukózu, soli
Pufrovacia kapacita: pH = 7,2 až 7,6


Mraziace médium CM-1 spoločnosti Cytion ponúka spoľahlivé riešenie na kryokonzerváciu, ktoré zabezpečuje vysokú životaschopnosť a funkčnosť buniek po rozmrazení pre širokú škálu výskumných aplikácií.

Médium 199 je univerzálne a široko používané médium na kultiváciu buniek špeciálne vyvinuté na kultiváciu primárnych explantátov. Toto komplexné médium kombinuje základné vitamíny, aminokyseliny a ďalšie faktory, aby poskytlo plne definovaný zdroj živín pre rôzne typy buniek. Je obzvlášť vhodné pre netransformované bunky, čo z neho robí neoceniteľný nástroj pre biologický výskum.
Médium 199 ponúka celý rad aplikácií v tejto oblasti. Dokáže účinne udržiavať komplex kumulus-oocyt (COC) a podporovať dozrievanie oocytov in vitro. Okrem toho sa používa pri oplachovaní aspiračných línií počas odberu vajíčok od nemeckých holštajnských kráv. Okrem toho médium 199 slúži ako vynikajúce médium na kultiváciu srdcových endotelových buniek získaných z potkanov. Tieto aplikácie dokazujú všestrannosť a prispôsobivosť média 199 rôznym experimentálnym potrebám.
História
Vývoj média 199 v 50. rokoch 20. storočia znamenal významný pokrok v oblasti médií na kultiváciu tkanív. Pred jeho zavedením sa mnohé kultivačné médiá spoliehali na produkty živočíšneho pôvodu a tkanivové extrakty. Morgan a jeho kolegovia však spôsobili revolúciu v tejto oblasti tým, že vytvorili úplne definovaný zdroj výživy pre bunkové kultúry. Prostredníctvom experimentov s rôznymi kombináciami vitamínov, aminokyselín a iných faktorov objavili výnimočné vlastnosti média 199 podporujúce rast.
Kontrola kvality

pH = 7,2 +/
- 0,02 pri 20
- 25 °C.
Každá šarža bola testovaná na sterilitu a neprítomnosť mykoplazmy a baktérií.

Údržba

Uchovávajte v chladničke pri teplote +2 °C až +8 °C v tme. Mrazenie a zahrievanie do +37 °C minimalizuje kvalitu výrobku.
Neohrievajte médium na viac ako 37 °C ani nepoužívajte nekontrolovateľné zdroje tepla (napr. mikrovlnné zariadenia).
Ak sa má použiť len časť média, odoberte toto množstvo z fľaše a zohrejte ho pri izbovej teplote.
Trvanlivosť akéhokoľvek média okrem základného média je 8 týždňov od dátumu výroby.

Zloženie




Zložky
mg/l


Anorganické soli
Chlorid vápenatý x 2H2O
264,92



Dusičnan železitý (III) x 9H2O
0,72



Síran horečnatý
97,67



Chlorid draselný
400,00



Octan sodný x 3H2O
82,95



Chlorid sodný
6,800.00



Dihydrogénfosforečnan sodný x H2O
140,00


Ostatné zložky
Adenín sulfát
10,00



AMP
0,20



ATP
1,00



Cholesterol
0,20



2'-deoxyribóza
0,50



D(+)-glukóza bezvodá
1,000.00



Glutatión (červený)
0,05



Guanín x HCl
0,30



Hypoxantín
0,30



Fenolová červená
10,00



D-ribóza
0,50



Tymín
0,30



Tween 80
4,90



Uracil
0,30



Xantín
0,30



NaHCO3
2,200.00


Aminokyseliny
L-alanín
25,00



L-Arginín x HCl
70,00



Kyselina L-aspartová
30,00



L-cysteín x HCl x H2O
0,10



L-Cystín
20,00



L-Glutamín stabilný
149,00



Kyselina L-glutámová
67,00



Glycín
50,00



L-histidín x HCl x H2O
21,88



L-hydroxyprolín
10,00



L-izoleucín
20,00



L-leucín
60,00



L-Lyzín x HCl
70,00



L-metionín
15,00



L-fenylalanín
25,00



L-Prolín
40,00



L-serín
25,00



L-Treonín
30,00



L-tryptofán
10,00



L-Tyrozín
40,00



L-Valín
25,00


Vitamíny
kyselina 4-amino-benzoová
0,05



Kyselina askorbová
0,05



D(+)-Biotín
0,01



Kalciferol
0,10



D-pantotenát vápenatý
0,01



Cholín chlorid
0,50



Kyselina listová
0,01



myo-izozitol
0,05



Menadion
0,01



Kyselina nikotínová
0.025



Nikotínamid
0.025



Pyridoxal x HCl
0.025



Pyridoxol x HCl
0.025



Riboflavín
0,01



DL-α-tokoferolfosforečnan disodná soľ
0,01



Tiamín x HCl
0,01



Vitamín A acetát
0,14

Reagent na disociáciu buniek Accutase
- šetrná alternatíva trypsínu
Accutase je roztok na oddeľovanie buniek, ktorý spôsobuje revolúciu v odvetví bunkových kultúr. Je to zmes proteolytických a kolagenolických enzýmov, ktorá napodobňuje účinok trypsínu a kolagenázy. Na rozdiel od trypsínu Accutase neobsahuje žiadne cicavčie ani bakteriálne zložky a je oveľa šetrnejší k bunkám, čo z neho robí ideálny roztok na rutinné oddeľovanie buniek od štandardného plastového riadu na kultiváciu tkanív a plastového riadu s adhéznym povlakom. V tomto príspevku na blogu sa budeme venovať výhodám a použitiu Accutase a tomu, ako mení pravidlá hry v oblasti bunkových kultúr.
Výhody Accutase
Accutase má oproti tradičným roztokom trypsínu niekoľko výhod. Po prvé, možno ju použiť vždy, keď je potrebné jemné a účinné oddelenie akejkoľvek adherentnej bunkovej línie, čím priamo nahrádza trypsín. Po druhé, Accutase funguje veľmi dobre na embryonálnych a neurónových kmeňových bunkách a bolo preukázané, že zachováva životaschopnosť týchto buniek po pasážovaní. Po tretie, Accutase zachováva väčšinu epitopov pre následnú analýzu prietokovou cytometriou, takže je ideálna na analýzu markerov bunkového povrchu.
Okrem toho sa Accutase nemusí neutralizovať pri pasážovaní adherentných buniek. Pridaním väčšieho množstva média po rozdelení buniek sa Accutase zriedi, takže už nie je schopná oddeliť bunky. Tým sa eliminuje potreba inaktivácie a šetrí sa čas technikov bunkových kultúr. A nakoniec, Accutase sa nemusí alikvótovať a fľaša je stabilná v chladničke 2 mesiace.
Aplikácie Accutase
Accutase je priamou náhradou roztoku trypsínu a môže sa použiť na pasážovanie bunkových línií. Okrem toho sa Accutase dobre osvedčuje pri oddeľovaní buniek na analýzu mnohých povrchových markerov buniek pomocou prietokovej cytometrie a na triedenie buniek. Medzi ďalšie následné aplikácie ošetrenia Accutase patrí analýza povrchových markerov buniek, test rastu vírusov, proliferácia buniek, testy migrácie nádorových buniek, rutinné pasážovanie buniek, zväčšovanie výroby (bioreaktor) a prietoková cytometria.
Zloženie Accutase
Accutase neobsahuje žiadne cicavčie ani bakteriálne zložky a je zmesou prírodných enzýmov s proteolytickou a kolagenolytickou enzýmovou aktivitou. Je formulovaná v oveľa nižšej koncentrácii ako trypsín a kolagenáza, takže je menej toxická a šetrnejšia, ale rovnako účinná.
Účinnosť Accutase
Ukázalo sa, že Accutase je účinná pri oddeľovaní primárnych a kmeňových buniek a udržiavaní vysokej životaschopnosti buniek v porovnaní s enzýmami živočíšneho pôvodu, ako je trypsín. po 10 minútach sa obnoví 100 % buniek a vďaka autodigescii Accutase nie je na škodu ponechať bunky v Accutase až 45 minút.
Zhrnutie
Na záver možno povedať, že Accutase je výkonné riešenie, ktoré mení pravidlá hry v oblasti bunkových kultúr. Vďaka svojej šetrnosti, účinnosti a všestrannosti je Accutase ideálnou alternatívou trypsínu. Ak hľadáte spoľahlivé a účinné riešenie na oddeľovanie buniek, Accutase je riešenie pre vás.

Prehľad produktov
Objem: 100 ml Skladovanie: ≤-15 °C Sterilita: Sterilná filtrácia
Roztok antibiotík/antimykotík (100x ) je sterilný koncentrát pripravený na použitie určený na zníženie rizika mikrobiálnej kontaminácie v bunkových kultúrach a súvisiacich laboratórnych aplikáciách. Tento 100x roztok obsahuje osvedčenú kombináciu penicilínu, streptomycínu a amfotericínu B, ktorá poskytuje široké spektrum antimikrobiálnej aktivity proti grampozitívnym a gramnegatívnym baktériám, kvasinkám a vláknitým hubám. Prípravok je vhodný na použitie v kultúrach eukaryotických buniek, bakteriálnych médiách a iných systémoch citlivých na kontamináciu, čím podporuje čistú a konzistentnú laboratórnu prevádzku.
Použitie a výhody Tento roztok optimalizovaný pre bežné výskumné protokoly sa široko používa na udržiavanie aseptických podmienok v pracovných postupoch bunkových kultúr. Ponúka spoľahlivý výkon v prostrediach citlivých na kontamináciu, čím pomáha výskumníkom znížiť riziko nadmerného rastu mikroorganizmov bez toho, aby bolo ohrozené zdravie buniek alebo reprodukovateľnosť experimentov. Sterilne filtrované zloženie eliminuje potrebu ďalších krokov solubilizácie, čím podporuje zjednodušenú prípravu médií a znižuje variabilitu každodenných laboratórnych postupov.
Použitie a kompatibilita Na dosiahnutie štandardných pracovných koncentrácií roztok zrieďte v pomere 1:100 do kompletného kultivačného média. Produkt je kompatibilný so širokou škálou bunkových línií cicavcov a základných médií. Vďaka stálej dostupnosti zásob môžu výskumní pracovníci využívať výhody spoľahlivej kontinuity dodávok a zjednodušeného plánovania logistiky. Roztok by sa mal skladovať pri teplote ≤ -15 °C a chrániť pred opakovanými cyklami zmrazovania a rozmrazovania, aby sa zachovala jeho stabilita. Len na výskumné účely. Nie je určený na použitie pri diagnostických alebo terapeutických postupoch. Nie je určený na použitie u ľudí alebo zvierat.

Roztok fosfátového tlmivého roztoku (PBS)
Fyziologický roztok s fosfátovým pufrom (PBS) je široko používaný tlmivý roztok v biologickom a chemickom výskume. Zohráva kľúčovú úlohu pri udržiavaní rovnováhy pH a osmolarity počas rôznych experimentálnych postupov vrátane spracovania tkanív a bunkových kultúr. Náš roztok PBS je starostlivo pripravený z vysoko čistých zložiek, aby sa zabezpečila stabilita a spoľahlivosť pri každom experimente. Osmolarita a koncentrácie iónov nášho roztoku PBS presne kopírujú koncentrácie v ľudskom tele, takže je izotonický a netoxický pre väčšinu buniek.

Zloženie nášho roztoku PBS
Náš roztok PBS je zmesou fosfátových pufrov a fyziologických roztokov ultračistej kvality s upraveným pH. V 1X pracovnej koncentrácii obsahuje:

8000 mg/l chloridu sodného (NaCl)
200 mg/L chlorid draselný (KCl)
1150 mg/L fosforečnan sodný dvojzložkový bezvodý (Na2HPO4)
200 mg/L Fosforečnan draselný jednozložkový bezvodý (KH2PO4)

Toto zloženie zabezpečuje optimálne pH a iónovú rovnováhu, vhodné pre širokú škálu biologických aplikácií.

Aplikácie nášho roztoku PBS
Náš roztok PBS je ideálny na rôzne aplikácie v biologickom výskume. Vďaka svojim izotonickým a netoxickým vlastnostiam je vhodný na riedenie látok a oplachovanie bunkových nádob. Roztoky PBS obsahujúce EDTA sú účinné na uvoľnenie prichytených a zhlukovaných buniek. Do PBS by sa však nemali pridávať dvojmocné kovy, ako napríklad zinok, pretože môžu spôsobiť zrážanie. V takýchto prípadoch sa odporúčajú Goodove pufre. Okrem toho je náš roztok PBS prijateľnou alternatívou vírusového transportného média na transport a skladovanie RNA vírusov vrátane SARS-CoV-2.

Kontrola kvality

Sterilne filtrované


Skladovanie a trvanlivosť

Skladujte pri teplote +2 °C až +25 °C, chránené pred svetlom.
Po otvorení skladujte pri teplote 2 °C až 25 °C a spotrebujte do 24 mesiacov.


Podmienky prepravy

Okolitá teplota


Údržba

Uchovávajte v chlade pri teplote +2°C až +8°C v tme. Vyhnite sa zmrazovaniu a častému zohrievaniu na +37 °C, pretože sa tým znižuje kvalita výrobku.
Neohrievajte médium na teplotu vyššiu ako 37 °C ani nepoužívajte nekontrolované zdroje tepla, napríklad mikrovlnné zariadenia.
Ak sa má použiť len časť média, odoberte požadované množstvo a pred použitím ho zohrejte na izbovú teplotu.

Zloženie



Kategória
Zložky
Koncentrácia (mg/l)


Soli
Chlorid draselný
200



Fosforečnan draselný monobázický bezvodý
200



Chlorid sodný
8000



Fosforečnan sodný dvojzložkový bezvodý
1150