Bunky HaCaT
Základné fakty o bunkách Hacat
| Popis | Bunky HaCaT sú kľúčovým modelom v dermatologickom výskume, ktorý ponúka pohľad na komplexné mechanizmy biológie a patológie kože. Spontánne imortalizovaná línia buniek HaCaT je odvodená z dospelých ľudských epidermálnych buniek a zachováva si schopnosť proliferácie a diferenciácie podobne ako bazálne keratinocyty in vivo. Bunky HaCaT slúžia ako spoľahlivá platforma na skúmanie procesu epidermálnej diferenciácie a štúdium markerov epidermálnej diferenciácie nevyhnutných na zachovanie integrity kože. Náchylnosť buniek HaCaT na apoptózu a ich citlivosť na látky indukujúce apoptózu sa podrobne študuje, najmä v súvislosti s cytotoxickými látkami, ako je RIPL. Výskumníci hodnotia cytotoxicitu týchto látok a rozsah cytotoxicity pomocou buniek HaCaT, pričom na vizualizáciu bunkových zmien využívajú techniky, ako je fluorescenčná mikroskopia. Výskumníci využili bunky HaCaT na skúmanie účinkov rôznych látok vrátane antimikrobiálnych substrátov a ich vplyvu na životaschopnosť buniek. Tieto bunky sú vynikajúcim substrátom na testovanie antimikrobiálnych biomateriálov a antimikrobiálnych atelokolagénových substrátov, ktoré sú kľúčové pre obnovu kože a lekárske aplikácie. Epidermálna línia HaCaT zohráva kľúčovú úlohu aj pri štúdiu bunkovej senescencie, cytokínov a profilov génovej expresie súvisiacich so starnutím a chronickými chorobami. Transkripčné profily buniek HaCaT vrátane úlohy κB a mikroRNA umožňujú nahliadnuť do regulačných mechanizmov na molekulárnej úrovni. Línia keratinocytov HaCaT so svojimi vlastnosťami epidermálnych keratinocytov ponúka sledovateľný systém na rozbor zložitej interakcie medzi epidermálnymi bunkami a imunitným systémom, konkrétne úlohy keratinocytov v chorobných stavoch. Umožňujú skúmať epigenetické modifikácie a ich vplyv na diferenciáciu keratinocytov vrátane tvorby rohovinového obalu, ktorý je kľúčovým prvkom bariérovej funkcie kože. Celkovo možno povedať, že bunky HaCaT sú nenahraditeľným modelom v dermatologickom výskume, ktorý umožňuje hlbšie pochopenie biológie a patológie kože vďaka ich podobnosti s bazálnymi keratinocytmi a ich schopnosti podstupovať rast a diferenciáciu buniek. Ich využitie siaha od štúdia epidermálnej diferenciácie a antimikrobiálnych účinkov až po skúmanie bunkových reakcií, ako je apoptóza, čo z nich robí základný kameň bunkovej biológie a biomedicínskeho výskumu. |
|---|---|
| Organizmus | Ľudské |
| Tkanivo | Koža |
Podrobnosti na
| Vek | 62 rokov |
|---|---|
| Pohlavie | Muži |
| Etnická príslušnosť | Kaukazský |
| Typ bunky | Keratinocyty s priemerom 20-25 mikrometrov. |
| Rastové vlastnosti | Adherent |
Dokumentácia
| Citácie | HaCaT (katalógové číslo Cytion 300493) |
|---|---|
| Úroveň biologickej bezpečnosti | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_0038 |
Genetika bunkovej línie keratinocytov HaCaT
| Nádorové | Nie |
|---|---|
| Karyotyp | Aneuploidné (hypotetraploidné) |
Manipulácia s bunkovou líniou Hacat
| Kultúrne médium | DMEM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutamínu, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pyruvátu sodného (číslo výrobku Cytion 820300a) |
|---|---|
| Doplnky | Doplňte médium o 10 % FBS |
| Disociačné činidlo | Zmes EDTA (zásoba 0,05 %) a trypsínu (zásoba 0,1 %) v pomere 1:1 sa musí pripraviť vždy pred oddelením buniek pomocou PBS bez Ca2+ a Mg2+, aby sa zabezpečila fyziologická osmolarita. Neodporúča sa používať zmesi trypsínu/EDTA pripravené na použitie, pretože môžu spôsobiť zhlukovanie buniek. Ako alternatívu možno namiesto trypsínu/EDTA použiť TrypLE Express (Life Technologies). Mal by sa dodržiavať protokol výrobcu. |
| Zdvojnásobenie času | Čas zdvojenia buniek HaCaT je 28 hodín. |
| Subkultivácia |
|
| Pomer rozdelenia | A ratio of 1:5 to 1:10 is recommended |
| Hustota výsevu | 1 x 104 buniek/cm2 |
| Obnova tekutín | 2 krát týždenne |
| Zmrazovacie médium | Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie regenerácie a zníženie stresu spôsobeného kryo. |
| Rozmrazovanie a kultivácia buniek |
|
| Inkubačná atmosféra | 37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra. |
| Povrchová úprava banky | Na dosiahnutie optimálneho uchytenia a životaschopnosti po rozmrazení odporúčame používať banky alebo platne s kolagénom. |
| Postup zmrazovania | Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu. |
| Podmienky prepravy | Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu. |
| Podmienky skladovania | Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka. |
Zabezpečenie kvality
| Sterilita | Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii. Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú. |
|---|---|
| STR profile |
Amelogenín: x,x
CSF1PO: 9,11
D13S317: 10,12
D16S539: 9,12
D5S818: 12
D7S820: 9,11
TH01: 09. Mrz
TPOX: 11,12
vWA: 16,17
D3S1358: 16
D21S11: 28,30.2
D18S51: 12
Penta E: 7,12
Penta D: 11,13
D8S1179: 14
FGA: 24
D1S1656: 11,12
D2S1338: 17,25
D12S391: 18,23
D19S433: 13,14
|
| Alely HLA |
A*: '31:01:02
B*: '40:01:02, '51:01:01
C*: '03:04:01, '15:02:01
DRB1*: '04:01:01, '15:01:01
DQA1*: '01:02:01, '03:03:01
DQB1*: '03:01:01, '06:02:01
DPB1*: '03:01:01, '04:01:01
E: '01:03:01, '01:03:02
|
Certifikát o analýze (CoA)
| Číslo pozemku | Typ certifikátu | Dátum | Katalógové číslo |
|---|---|---|---|
| 300493-250324 | Certifikát o analýze | 23. May. 2025 | 300493 |
| 300493-190723 | Certifikát o analýze | 23. May. 2025 | 300493 |
| 300493-190124 | Certifikát o analýze | 23. May. 2025 | 300493 |
| 300493-170225SF | Certifikát o analýze | 23. May. 2025 | 300493 |
| 300493-170225 | Certifikát o analýze | 23. May. 2025 | 300493 |
| 300493-040424 | Certifikát o analýze | 23. May. 2025 | 300493 |