Bunky B-LCL-HROC60
800,00 €*
Produkty sa dodávajú zmrazené na suchom ľade v kryotrubkách. Každá kryotrubka obsahuje zvyčajne 3 × 10 6 buniek pre adhezívne línie alebo 5 × 106 buniek pre suspenzné línie (podrobnosti nájdete v certifikáte analýzy šarže).
Všeobecné informácie
| Popis | B-LCL-HROC60 je ľudská B-lymfoblastová bunka imortalizovaná vírusom Epstein-Barrová (EBV), vytvorená z nádorových infiltrujúcich B-buniek (TiBc) izolovaných z primárneho kolorektálneho karcinómu označeného ako HROC60. Pôvodný nádor pochádzal od dospelého mužského pacienta s pravostranným kolorektálnym karcinómom molekulárneho subtypu CpG island methylator phenotype-high (CIMP-H). Čerstvá nádorová tkanina bola mechanicky disociovaná, aby sa získali suspenzie jednotlivých buniek, a B bunky boli selektívne imortalizované in vitro pomocou supernatantu obsahujúceho EBV odvodeného z bunky B95/8 marmoset v prítomnosti cyklosporínu A na potlačenie rastu T a NK buniek. Dlhodobá expanzia viedla k monoklonálnej kultúre B-buniek, čo potvrdila analýza reorganizácie génov ťažkých a ľahkých reťazcov imunoglobulínu pomocou štandardizovaných testov klonality. B-LCL-HROC60 vylučuje imunoglobulín M (IgM) ako svoj dominantný izotyp so stabilnou produkciou počas dlhodobej kultivácie. V širšej sérii nádorových infiltrujúcich B-buniek generovaných z kolorektálneho karcinómu bola sekrécia imunoglobulínu obmedzená na jeden hlavný izotyp na klon a v neprítomnosti exogénneho EBV nedošlo k spontánnemu rastu, čo vylučuje latentnú in vivo transformáciu spôsobenú EBV. Ako monoklonálna, antigénom skúsená línia odvodená od TiBc z kolorektálneho karcinómu CIMP-H, B-LCL-HROC60 poskytuje relevantný in vitro model na skúmanie humorálnych imunitných reakcií v mikroprostredí kolorektálneho nádoru a na charakterizovanie funkčných vlastností protilátok odvodených od B-buniek infiltrujúcich nádor. |
|---|---|
| Organizmus | Ľudské |
| Tkanivo | Periférna krv |
| Choroba | Karcinóm |
| Synonymá | Bc HROC60, TiBcHROC60 |
Charakteristika
| Vek | 71 rokov |
|---|---|
| Pohlavie | Muži |
| Etnická príslušnosť | Kaukazský |
| Morfológia | Okrúhle bunky |
| Typ bunky | B lymfoblast |
| Rastové vlastnosti | Pozastavenie |
Regulačné údaje
| Citácie | B-LCL-HROC60 (katalógové číslo Cytion 302004) |
|---|---|
| Úroveň biologickej bezpečnosti | 2 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_A7UT |
Biomolekulárne údaje
| Povrchové antigény | CD19 |
|---|---|
| Vírusy | Transformant: EBV |
Spracovanie
| Kultúrne médium | RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilný glutamín, w: 2,0 g/L NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a) |
|---|---|
| Doplnky | Doplňte médium o 10 % tepelne inaktivovaného FBS |
| Subkultivácia | Jemne homogenizujte bunkovú suspenziu v banke pipetovaním hore a dole, potom odoberte reprezentatívnu vzorku na stanovenie hustoty buniek na ml. Suspenziu zrieďte čerstvým kultivačným médiom, aby ste dosiahli koncentráciu buniek 1 x 105 buniek/ml, a upravenú suspenziu rozdeľte do nových baniek na ďalšie kultivovanie. |
| Zmrazovacie médium | Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie regenerácie a zníženie stresu spôsobeného kryo. |
| Rozmrazovanie a kultivácia buniek |
|
| Inkubačná atmosféra | 37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra. |
| Povrchová úprava banky | Žiadne |
| Postup zmrazovania | Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu. |
| Podmienky prepravy | Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu. |
| Podmienky skladovania | Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka. |
Kontrola kvality / Genetický profil / HLA
| Sterilita | Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii. Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú. |
|---|---|
| Alely HLA |
A*: '02:01:01, '11:01:01
B*: '44:02:01, '55:01:01
C*: '03:03:01, '05:01:01
DRB1*: '01:01:01, '13:01:01
DQA1*: '01:01:01, '01:03:01
DQB1*: '05:01:01, '06:03:01
DPB1*: '04:01:01
E: '01:01:01
|