Linia komórkowa T98G
KomórkiT98G stanowią ludzką linię komórkową glejaka, powszechnie wykorzystywaną w badaniach biomedycznych. W szczególności komórki te są wykorzystywane w badaniach nad rakiem mózgu w celu zbadania kluczowych komórek i czynników molekularnych przyczyniających się do jego rozwoju. Co więcej, pomagają one naukowcom w badaniach przesiewowych i testowaniu nowych leków przeciwnowotworowych, które mogą pomóc w opracowywaniu leków.
Niniejszy artykuł zawiera wszystkie istotne szczegóły dotyczące linii komórkowej T98G, które będą potrzebne przed rozpoczęciem pracy z nią, takie jak:
- Ogólna charakterystyka i pochodzenie linii komórkowej T98G
- Informacje na temat hodowli linii komórkowej T98G
- Linia komórkowa T98G: Zalety i wady
- Zastosowania komórek T98G
- Publikacje badawcze dotyczące komórek T98G
- Zasoby dotyczące komórek T98G: Protokoły, filmy i nie tylko
1. Ogólna charakterystyka i pochodzenie linii komórkowej T98G
Ta sekcja artykułu pomoże ci zbadać podstawowe cechy linii komórkowej T98G. Obejmuje ona pochodzenie linii komórkowej, morfologię, rozmiar i informacje o ploidii. Co więcej, kompleksowo zrozumie następujące pytania: Czym są komórki T98G? Jakim typem komórek jest T98G? Skąd pochodzą komórki T98G? Jakie są cechy charakterystyczne linii komórkowej T98G? Czym jest linia komórkowa glejaka T98G U87?
- Linia komórkowa T98G została stworzona przez GH Steina. Składa się ona z komórek podobnych do fibroblastów, które pochodzą z tkanki mózgowej 61-letniego mężczyzny rasy kaukaskiej z glejakiem wielopostaciowym [1].
- Komórki T98G są nienowotworowe; nie powodują nowotworów po wstrzyknięciu nagim myszom. Mają jednak tendencję do proliferacji z odpowiednim zakotwiczeniem w hodowli komórkowej.
- Komórki te mają morfologię podobną do komórek fibroblastów.
- Linia komórkowa glejaka T98G reprezentuje hiperpentaploidię. Modalna liczba chromosomów waha się od 128 do 132. Wyższe ploidie mogą występować w 1,39% populacji komórek.
T98 vs T98G
Obie linie komórkowe glejaka ludzkiego mają podobne pochodzenie. Jedyną różnicą między tymi liniami komórkowymi jest liczba chromosomów. T98G ma prawie dwa razy więcej chromosomów niż T98. Dlatego T98G jest znany jako poliploidalny wariant T98.
T98G vs U87
U87 i T98G to ludzkie linie komórkowe glejaka wielopostaciowego wykorzystywane w badaniach nad rakiem mózgu. U87 wykazuje bardziej agresywny fenotyp w porównaniu do GBM T98G.
2. Informacje o hodowli linii komórkowej T98G
Informacje dotyczące hodowli linii komórkowej mają kluczowe znaczenie przed rozpoczęciem pracy z nią. Pomoże to w łatwej i wygodnej obsłudze linii komórkowej w laboratorium. Powinieneś wiedzieć: Jaki jest czas podwojenia dla linii komórkowej T98G? Jakie pożywki są najlepsze dla komórek T98G? Jaka jest charakterystyka wzrostu T98G? Jaka jest gęstość wysiewu komórek T98G? Jak zamrozić komórki T98G?
Kluczowe punkty dotyczące hodowli komórek T98G
|
Czas podwojenia: |
Przybliżony czas podwojenia komórek T98G wynosi 40 godzin. Może się on różnić w zależności od warunków hodowli. |
|
Przylegające lub w zawiesinie: |
Komórki T98G są adherentne. Przyczepiają się do dna naczyń hodowlanych i tworzą monowarstwy. |
|
Stosunek podziału: |
Komórki T98G są subkulturowane w stosunku podziału od 1:2 do 1:5. W tym celu komórki są najpierw przemywane 1 X buforem PBS, a następnie inkubowane z roztworem do pasażowania (Accutase) przez 8 do 10 minut w temperaturze otoczenia. Po inkubacji odłączone komórki są dodawane do świeżej pożywki wzrostowej i odwirowywane. Następnie zebrany osad komórkowy jest ostrożnie zawieszany, a komórki są dozowane do kolby hodowlanej zawierającej pożywkę wzrostową. |
|
Pożywka wzrostowa: |
Do hodowli komórek T98G używana jest pożywka EMEM zawierająca 10% płodowej surowicy bydlęcej, 2 mM L-glutaminy, 2,2 g/L NaHCO3 i EBSS. Pożywka powinna być wymieniana 3 do 4 razy w tygodniu. |
|
Warunki wzrostu: |
Komórki T98G są hodowane w nawilżanym inkubatorze ustawionym na 37°C i podłączonym do źródła CO2. |
|
Przechowywanie: |
Zamrożone komórki mogą być przechowywane w temperaturze poniżej -150°C lub w fazie gazowej ciekłego azotu w celu ochrony żywotności komórek przez dłuższy czas. |
|
Proces zamrażania i pożywka: |
Komórki T98G zaleca się zamrażać w pożywce CM-1 lub CM-ACF. W tym celu zaleca się powolny proces zamrażania, który pozwala na obniżenie temperatury tylko o 1°C na minutę. Zapobiega to szokowi komórek i utrzymuje ich żywotność. |
|
Proces rozmrażania: |
Zamrożone komórki są delikatnie rozmrażane poprzez umieszczenie ich we wstępnie ogrzanej łaźni wodnej o temperaturze 37 stopni Celsjusza na 40 do 60 sekund. Następnie są one ponownie zawieszane w świeżej pożywce i przenoszone do nowej kolby. Po 24 godzinach inkubacji pożywka jest zmieniana w celu wyeliminowania składników pożywki zamrażającej. |
|
Poziom bezpieczeństwa biologicznego: |
Kultury T98G są utrzymywane w laboratorium o poziomie bezpieczeństwa biologicznego 1. |
3. Linia komórkowa T98G: Zalety i wady
T98G jest szeroko stosowaną linią komórkową glejaka ludzkiego. Ma ona kilka zalet i wad, które odróżniają ją od innych. Kilka z nich zostało omówionych w tej części artykułu.
Zalety
Zalety komórek T98G są następujące:
-
Dobrze scharakteryzowane
Ugruntowana i dobrze scharakteryzowana linia komórkowa. Szeroko przebadana i udokumentowana w literaturze.
-
Model in vitro
Reprezentuje cechy glejaka, najbardziej agresywnego nowotworu mózgu. Cenne narzędzie do badania choroby, zrozumienia biologii i rozwoju leczenia.
Wady
Wady związane z komórkami T98G są następujące:
-
Heterogeniczność
Niejednorodność genetyczna w populacji komórek T98G może prowadzić do niespójności w wynikach eksperymentów i komplikować interpretację danych.
4. Zastosowania komórek T98G
Linia komórkowa T98G jest cennym narzędziem wykorzystywanym w badaniach nad rakiem. Poniżej wymieniono kilka głównych zastosowań badawczych komórek T98G:
- Badania nad rakiem: Linia komórkowa T98G jest cennym narzędziem do badania biologii guzów glejaka. Komórki te są wykorzystywane głównie do badania skomplikowanych szlaków molekularnych leżących u podstaw rozwoju i progresji choroby glejaka. Co więcej, są one wykorzystywane do identyfikacji mutacji genetycznych, które napędzają wzrost guza i inne mechanizmy komórek nowotworowych. Yang Chen i współpracownicy pracowali nad tymi komórkami i odkryli, że nadekspresja miRNA-21 obniża poziom PDCD4 (białka programowanej śmierci komórki 4) w komórkach T98G. Prowadzi to do zahamowania apoptozy komórek T98G, w której pośredniczy PDCD4. W związku z tym badanie sugeruje miRNa-21 jako potencjalny cel dla rozwoju terapii [2]. Podobnie jak w tym badaniu, Fanqiang Kong i współpracownicy badali rolę mikroRNA-15a w proliferacji i inwazji komórek glejaka T98G. Odkryli oni, że miRNA-15a-5p promuje te procesy komórkowe poprzez celowanie w cząsteczkę adhezji komórkowej 1 (CADM1) [3].
- Testowanie leków i rozwój terapii: T98G służy jako doskonały model glejaka in vitro do badań przesiewowych nowych leków i stanowi platformę do oceny skuteczności potencjalnych terapii przeciwnowotworowych. Naukowcy testują również różne związki i terapie, aby zidentyfikować i odkryć kandydatów na leki o najbardziej obiecujących właściwościach przeciw glejakowi. Prowadzi to do opracowania nowych leków i strategii leczenia, dając nadzieję pacjentom z glejakiem. Takie badanie dotyczyło potencjału przeciwnowotworowego naturalnego związku o nazwie corilagin w opornej na temozolomid linii komórkowej T98G GBM. Wyniki badania sugerowały, że corilagin, w połączeniu z temozolomidem, indukuje wyższe poziomy działania antyproliferacyjnego i antyapoptotycznego w komórkach [4].
5. Publikacje badawcze dotyczące komórek T98G
Poniżej przedstawiamy kilka interesujących i często cytowanych publikacji badawczych dotyczących linii komórkowej glejaka T98G.
Chemoterapeutyczny wpływ SR9009, agonisty REV-ERB, na ludzkie komórki glejaka T98G
W publikacji w ASN Neuro (2019) zbadano przeciwnowotworowe działanie agonisty REV-ERB o nazwie SR9009 na komórki glejaka T98G.
W artykule opublikowanym w Neurochemical Research (2019) zaproponowano, że maślan sodu i kwercetyna synergistycznie hamują ochronną autofagię w komórkach T98G i zwiększają apoptozę komórek.
W badaniu opublikowanym w Genes (2023) poddano linię komórkową T98G przystosowaną do hipoksji sekwencjonowaniu RNA i zaproponowano IRE1 (enzym wymagający inozytolu 1) jako obiecujący cel terapeutyczny.
MikroRNA-548c-3p hamuje proliferację i migrację komórek glejaka T98G poprzez obniżenie poziomu c-Myb
Ten artykuł został opublikowany w Oncology Letters (2017). W badaniu zbadano, że miRNA-548c-3p celuje w onkogeny T98G (c-Myb) w celu zahamowania proliferacji i migracji komórek T98G.
W artykule opublikowanym w Journal of Medicinal Plants Research (2011) zaproponowano, że ekstrakt chloroformowy Dracocephalum tanguticum wywiera działanie antyproliferacyjne na komórki T98G poprzez modulację kaspazy-3, Bax i genów P21.
6. Zasoby dla komórek T98G: Protokoły, filmy i nie tylko
Poniżej wymieniono dostępne zasoby zawierające protokoły hodowli i transfekcji komórek T98G.
- Transfekcja komórek T98G: Ten artykuł badawczy zawiera protokół transfekcji komórek T98G. Pokrótce wyjaśnia on metodę i wymagane odczynniki.
Poniższe linki znacznie ułatwią zapoznanie się z protokołem hodowli komórek T98G i ułatwią pracę z nim.
- Komórki T98G: Ta strona internetowa zawiera kluczowe informacje dotyczące protokołów hodowli komórek T98G, w tym podhodowli i postępowania z kulturami proliferacyjnymi i kriokonserwowanymi. Co więcej, pomoże ci ona również poznać pożywki do wzrostu komórek, warunki i czas podwojenia.
Odniesienia
- Haehl, E., Radiooporność indukowana przez komórki śródbłonka w glejaku. 2021, Universität Tübingen.
- Chen, Y., et al., MicroRNA-21 obniża ekspresję supresora nowotworu PDCD4 w ludzkiej komórce glejaka T98G. Cancer letters, 2008. 272(2): p. 197-205.
- Kong, F., et al., MicroRNA-15a-5ppromuje proliferację i inwazję komórek glejaka T98G poprzez celowanie w cząsteczkę adhezji komórkowej 1. Oncology Letters, 2021. 21(2): p. 1-1.
- Milani, R., et al., Corilagin Induces High Levels of Apoptosis in the Temozolomide-Resistant T98G Glioma Cell Line. Oncol Res, 2018. 26(9): p. 1307-1315.