Komórki RBL-2H3 - znaczenie RBL-2H3 w odpowiedzi alergicznej i badaniach immunologicznych

Linia komórkowa RBL-2H3 to szczurza linia komórek białaczki bazofilowej wykorzystywana w badaniach immunologicznych. Służy jako modelowy system do badania fizjologii, zachowania i funkcji komórek tucznych. Komórki te są również wykorzystywane do badania reakcji alergicznych, procesów immunologicznych oraz testowania i opracowywania leków.

W artykule przedstawiono pochodzenie komórek RBL-2H3, ich ogólne cechy, wymagania hodowlane i zastosowania badawcze.

Komórki RBL-2H3: Pochodzenie i ogólna charakterystyka

Przed użyciem linii komórkowej bazofilów w badaniach należy poznać jej pochodzenie i ogólne cechy. Ta sekcja artykułu zawiera informacje na temat podstaw komórek RBL-2H3. Na przykład: Czym są komórki tuczne RBL-2H3? Dlaczego warto używać komórek RBL-2H3? Czym są komórki RBL-2H3 w szczurzej białaczce bazofilowej? Jaka jest morfologia komórek RBL-2H3? Czy komórki RBL-2H3 są nieśmiertelne?

RBL-2H3 to komórki białaczki bazofilowej uzyskane z komórek bazofilowych szczura Wistar w 1978 roku w National Institute of Dental Research Laboratory of Immunology.
Komórki RBL-2H3 posiadają receptory kinazy tyrozynowej c-kit i proteazy komórek tucznych II (RMCP-II), co czyni je potencjalnym modelem komórek tucznych. Dlatego też są one powszechnie nazywane komórkami tucznymi, mimo że pochodzą od bazofilów szczurów [1].
Uwalniają histaminę i inne mediatory po aktywacji i wyrażają receptory IgE o wysokim powinowactwie.
Komórki RBL-2H3 wykazują morfologię podobną do fibroblastów.

Wizualizacja mikroskopowa komórki tucznej.

Komórki RBL-2H3: Informacje dotyczące hodowli

Ta sekcja pomoże ci poznać niektóre kluczowe aspekty hodowli linii komórkowej RBL-2H3. Dowiesz się: Jaki jest czas podwojenia komórek RBL-2H3? Jaka jest gęstość wysiewu komórek RBL-2H3? Jaki jest protokół hodowli komórek RBL-2H3? Co to jest pożywka do zamrażania linii komórkowej RBL-2H3?

Kluczowe punkty dotyczące hodowli komórek RBL-2H3

Czas podwojenia populacji:	Czas podwojenia populacji komórek tucznych RBL-2H3 wynosi około 50-60 godzin.
Adherentne lub w zawiesinie:	RBL-2H3 jest linią komórek przylegających.
Stosunek podhodowli:	W przypadku komórek RBL-2H3 stosunek podziału wynosi od 1:2 do 1:4. Komórki adherentne są przemywane roztworem 1 x PBS niezawierającym magnezu i wapnia. Dodawany jest roztwór do pasażowania Accutase, a komórki są utrzymywane w temperaturze otoczenia przez 10 minut w celu oderwania od dna naczynia hodowlanego. Dodawana jest świeża pożywka, a komórki są odwirowywane. Zebrane komórki są ostrożnie ponownie zawieszane w świeżej pożywce i przelewane do nowych kolb zawierających pożywkę wzrostową.
Pożywka hodowlana:	Do hodowli komórek RBL-2H3 stosuje się pożywkę EMEM zawierającą 10% FBS, 2 mM L-glutaminy, 2,2 g/L NaHCO3 i sól EBSS. Pożywka powinna być wymieniana 2-3 razy w tygodniu.
Warunki wzrostu:	Komórki RBL-2H3 są hodowane w nawilżanym inkubatorze ustawionym na temperaturę 37 °C i podłączonym do źródła 5%_CO2.
Przechowywanie:	Komórki są przechowywane w fazie gazowej ciekłego azotu lub w temperaturze poniżej -150 °C w zamrażarce elektrycznej w celu ochrony żywotności komórek przez długi czas.
Proces zamrażania i medium:	Pożywka CM-1 lub CM-ACF jest używana do zamrażania komórek RBL-2H3 w procesie powolnego zamrażania. Metoda ta pozwala na obniżenie temperatury o 1°C na minutę i chroni komórki przed szokiem.
Proces rozmrażania:	Komórki RBL-2H3 są rozmrażane we wstępnie ustawionej łaźni wodnej (37 °C) przez około 60 sekund. Następnie komórki są dodawane do świeżej pożywki i odwirowywane. Ten krok jest niezbędny do usunięcia składników pożywki zamrażającej. Następnie osad komórkowy jest ponownie zawieszany w pożywce wzrostowej, a komórki są dozowane do kolby w celu hodowli.
Poziom bezpieczeństwa biologicznego:	Komórki RBL-2H3 powinny być przechowywane w laboratoriach o poziomie bezpieczeństwa biologicznego 1.

Adherentne monowarstwy komórek RBL-2H3 o różnej konfluencji w 20- i 10-krotnym powiększeniu.

Zalety i ograniczenia linii komórkowej bazofilów RBL-2H3

Komórki RBL-2H3 są powszechnie wykorzystywane w badaniach immunologicznych. W tej sekcji przedstawiono ich podstawowe zalety i ograniczenia.

Zalety

Łatwość hodowli: Komórki RBL-2H3 można łatwo hodować i utrzymywać w środowisku laboratoryjnym. Ułatwia to opłacalne i powtarzalne eksperymenty, co czyni je popularnym wyborem do wstępnych badań w immunologii.

Ograniczenia

Pochodzenie inne niż ludzkie: Pochodzące ze szczurzych bazofilów komórki RBL-2H3 mogą niedokładnie naśladować ludzkie procesy biologiczne, co może ograniczać ich zastosowanie w badaniach specyficznych dla ludzi. Wymaga to ostrożnej interpretacji danych podczas ekstrapolacji wyników na systemy ludzkie.
Uproszczony model komórek tucznych: Chociaż komórki te stanowią podstawowy model do badania funkcji komórek tucznych, nie reprezentują one w pełni złożonej natury interakcji komórek tucznych w ludzkim układzie odpornościowym. W związku z tym mogą one nie modelować odpowiednio wieloaspektowej roli komórek tucznych w odpowiedziach immunologicznych lub stanach chorobowych in vivo.

Linia komórkowa RBL-2H3: Kamień węgielny w badaniach immunologicznych

Badania nad bazofilami i komórkami tucznymi z wykorzystaniem linii komórkowej RBL-2H3

Linia komórkowa RBL-2H3, pochodząca od szczura Rattus norvegicus, służy jako kluczowy model do badania biologii bazofilów i komórek tucznych. Te szczurze komórki tuczne zapewniają istotny wgląd w uwalnianie mediatorów komórek tucznych, co ma kluczowe znaczenie dla zrozumienia stanów alergicznych, takich jak alergiczny nieżyt nosa. Dzięki tym komórkom naukowcy badają dynamikę receptorów komórkowych i tworzenie synaps immunologicznych, które mają kluczowe znaczenie dla odpowiedzi układu odpornościowego na alergeny. W interesującym badaniu opublikowanym w 2019 r. wykorzystano linię komórkową RBL-2H3 i zbadano mechanizmy reakcji pseudoalergicznych wywołanych wstrzyknięciem Qingkailing. Badanie wykazało, że kaskada sygnalizacyjna PI3K-RAC1 częściowo wywołuje tę odpowiedź alergiczną w komórkach [2]

Dynamika synaps immunologicznych w badaniach nad alergią

Komórki RBL-2H3, szeroko stosowane w badaniach immunologicznych, są szczególnie skuteczne w badaniu dynamiki synaps immunologicznych. Pomaga to w wyjaśnieniu procesów komunikacyjnych układu odpornościowego, z zastosowaniami w badaniu zarówno krwi obwodowej, jak i komórek tucznych otrzewnej. Takie badania są niezbędne do kompleksowego zrozumienia odpowiedzi immunologicznej zarówno w kontekście ogólnoustrojowym, jak i lokalnym

Badania przesiewowe leków i testy toksyczności

W badaniach przesiewowych i testowaniu leków wykorzystuje się reaktywność komórek RBL na różne bodźce, w tym badanie, w jaki sposób H2O2 hamuje odpowiedzi za pośrednictwem IgE. Komórki te odgrywają istotną rolę w opracowywaniu metod leczenia chorób, takich jak infekcje paciorkowcowe, w których paciorkowce z grupy mitis hamują aktywację komórek tucznych. Poza tym naukowcy oceniają toksyczne działanie różnych substancji, w tym chemikaliów, leków i nanocząstek, przy użyciu tego modelu RBL 2H3 mc. Na przykład w niedawnym badaniu (2022) oceniano cytotoksyczność mikroplastików polistyrenowych na komórkach RBL-2H3. Stwierdzono, że mikroplastiki uszkadzają organelle komórkowe RBL-2H3 i sprzyjają śmierci komórek [3]. W innym badaniu z 2021 r. oceniano potencjał przeciwalergiczny i przeciwzapalny naturalnego produktu, neferyny, przy użyciu modelu RBL 2H3 mc. Badanie wykazało dobre właściwości przeciwalergiczne i przeciwzapalne związku [4]

Zaawansowane metodologie pomiarów immunologicznych

Stałe i mierzalne uwalnianie mediatorów z komórek RBL-2H3 sprawia, że są one idealne do wygodnej fluorymetrii, ułatwiając precyzyjne i dokładne pomiary kluczowe dla badania chorób i oceny środków terapeutycznych.

Linia komórkowa RBL-2H3, pochodząca od Rattus norvegicus, jest nieocenionym atutem zarówno w badaniach podstawowych, jak i stosowanych w dziedzinie immunologii. Oferuje ona ogromne możliwości rozwoju naszej wiedzy i leczenia chorób immunologicznych

Linia komórkowa RBL-2H3 do zaawansowanych badań immunologicznych

430,00 €*

Treść: 1.5 milliliter

Ceny bez podatków plus koszty wysyłki

cryovial

Numer produktu: 305194

Komórki RBL-2H3: Publikacje badawcze

Poniżej znajdują się ekscytujące publikacje badawcze dotyczące komórek tucznych RBL-2H3:

Hamujące działanie narirutyny na degranulację komórek RBL-2H3

Ten artykuł badawczy został opublikowany w Immunopharmacology and Immunotoxicology (2021). W badaniu zaproponowano, że narirutyna, naturalny związek, wywiera hamujący wpływ na degranulację RBL 2H3 poprzez regulację NF-κB, MAPK i szlaku sygnałowego kinazy tyrozynowej.

Wpływ apigeniny na komórki RBL-2H3, RAW264. 7 i HaCaT: działanie przeciwalergiczne, przeciwzapalne i ochronne dla skóry

W badaniu opublikowanym w International Journal of Molecular Sciences (2020) zaproponowano, że związek apigeniny znacząco tłumi reakcje alergiczne i zapalne komórek RBL-2H3 i RAW264.7. Dlatego może służyć jako potencjalny środek do zwalczania chorób związanych z układem odpornościowym.

Przeciwzapalne i przeciwalergiczne działanie saponaryny i jej wpływ na szlaki sygnałowe komórek RAW 264.7, RBL-2H3 i HaCaT

W artykule badawczym opublikowanym w International Journal of Molecular Sciences (2021) oceniono przeciwalergiczne i przeciwzapalne działanie naturalnego produktu, saponaryny, przy użyciu różnych linii komórkowych, w tym RBL-2H3.

Hamujący wpływ na uwalnianie β-heksozoaminidazy z komórek RBL-2H3 ekstraktów i niektórych czystych składników Benchalokawichian, tajskiego preparatu ziołowego stosowanego w leczeniu zaburzeń alergicznych

Badanie Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine (2014) wykazało, że ekstrakty Benchalokawichian i niektóre aktywne składniki wywierają potencjalny wpływ hamujący na uwalnianie ß-heksozoaminidazy z komórek RBL 2H3.

Peptydy Spirulina maxima hamują degranulację komórek tucznych poprzez inaktywację fosforylacji Akt i MAPK w komórkach RBL-2H3

Artykuł ten został opublikowany w 2018 roku w International Journal of Biological Macromolecules. W badaniu stwierdzono, że spirulina maxima, produkt naturalny, hamuje degranulację RBL 2H3 poprzez zapobieganie fosforylacji MAPK i AKT.

Zasoby dla linii komórkowej RBL-2H3: Protokoły, filmy i nie tylko

RBL-2H3 jest szeroko stosowaną linią komórek tucznych. Dostępne zasoby obejmujące protokoły hodowli i transfekcji RBL-2H3 są wymienione tutaj:

Model RBL 2H3 MC: Ten artykuł badawczy zawiera protokoły utrzymywania hodowli RBL-2H3 i transfekcji RBL-2H3.

Oto kilka zasobów wyjaśniających protokół hodowli komórek RBL-2H3:

Komórki RBL-2H3: Ta strona internetowa jest przydatna do nauki protokołów hodowli komórkowej dla linii komórkowej RBL-2H3. Poza tym zawiera ona informacje na temat pożywek dla komórek RBL 2H3 i warunków hodowli.

Linia komórkowa RBL-2H3: Najczęściej zadawane pytania dla badaczy

Piśmiennictwo

Passante, E. i N. Frankish, The RBL-2H3 cell line: its provenance and suitability as a model for the mast cell. Inflamm Res, 2009. 58(11): p. 737-45.
Li, Q., et al., Reakcja pseudoalergiczna wywołana wstrzyknięciem Qingkailing częściowo poprzez szlak sygnałowy PI3K-Rac1 w komórkach RBL-2H3. Toxicology Research, 2019. 8(3): p. 353-360.
Liu, L., et al., Polistyrenowe mikro (nano) tworzywa sztuczne uszkadzają organelle komórek RBL-2H3 i promują MOAP-1 w celu indukcji apoptozy. Journal of Hazardous Materials, 2022. 438: p. 129550.
Chiu, K.-M., et al., Antyalergiczne i przeciwzapalne działanie neferyny na komórki R BL-2H3. International Journal of Molecular Sciences, 2021. 22(20): p. 10994.