Komórki NCI-H460 – badania nad rakiem płuc w oparciu o dane dotyczące linii komórkowej NCI-H460
NCI-H460 to pochodzące od człowieka komórki niedrobnokomórkowego raka płuca, powszechnie wykorzystywane w badaniach nad rakiem płuca i toksykologii. Linia komórkowa ta stanowi cenne narzędzie do badania różnych aspektów biologii nowotworów, związanych z rozwojem guza, jego wzrostem oraz opornością na leki. Ponadto komórki NCI-H460 stanowią odpowiedni model do opracowywania środków przeciwnowotworowych.
- Pożywka hodowlana
- Jako pożywkę hodowlaną dla linii NCI-H460 stosuje się RPMI 1640. Jest ona uzupełniona 10% surowicą płodową bydlęcą, 2,1 mM stabilną glutaminą oraz 2,0 g/l NaHCO3. Pożywkę należy wymieniać 2–3 razy w tygodniu.
- Czas podwojenia
- Czas podwojenia komórek NCI-H460 wynosi około 33 godzin.
- Typ wzrostu
- Komórki raka płuc NCI-H460 są komórkami przylegającymi.
- Poziom bezpieczeństwa biologicznego
- BSL-4
- Dostępne w
- Cytion — Zamów komórki NCI-H460
Komórki NCI-H460: pochodzenie i ogólna charakterystyka
Pochodzenie i ogólna charakterystyka linii komórkowej w znacznym stopniu wpływają na jej zastosowania badawcze. Ta część artykułu pomoże Ci poznać pochodzenie i najważniejsze cechy komórek raka płuc NCI-H460. Dowiesz się: Czym są komórki NCI-H460? Jaki jest typ linii komórkowej NCI-H460? Jaka jest morfologia komórek NCI-H460?
- Linia komórkowa NCI-H460 pochodzi z wysięku opłucnowego europejskiego mężczyzny cierpiącego na wielkokomórkowego raka płuca. Została założona w 1982 roku przez A.F. Gazdara i współpracowników.
- Komórki raka płuca NCI-H460 mają morfologię nabłonkową.
- NCI-H460 to linia komórkowa o zdolnościach nowotworowych z kariotypem hipotriploidalnym. Modalna liczba chromosomów dla tych komórek wynosi 57. Komórki NCI-H460 wykazują również modalną liczbę 58 chromosomów z porównywalną częstotliwością.
- Komórki te wykazują wiele mutacji charakterystycznych dla nowotworów niedrobnokomórkowych płuc, takich jak mutacja KRAS, która bierze udział w proliferacji, wzroście, inwazji i przerzutach komórek.
Informacje dotyczące hodowli komórek NCI-H460
Należy zapoznać się z następującymi kluczowymi punktami dotyczącymi prawidłowego postępowania i utrzymania linii komórkowej NCI-H460. Zawierają one informacje na temat czasu podwojenia NCI-H460, pożywki hodowlanej NCI-H460 i podstawowych procedur hodowli komórek raka płuc NCI-H460.
Kluczowe punkty dotyczące hodowli komórek NCI-H460
|
Czas podwojenia: |
Czas podwojenia NCI-H460 wynosi około 33 godzin. |
|
Adherentne lub w zawiesinie: |
Komórki raka płuc NCI-H460 są przylegające. |
|
Stosunek podhodowli: |
Stosunek podziału zalecany dla linii komórkowej NCI-H460 wynosi 1:2 i 1:4. Po usunięciu starej pożywki, przylegające komórki są płukane 1 x solą fizjologiczną buforu fosforanowego. Następnie komórki są inkubowane z roztworem do pasażowania Accutase przez 8 do 10 minut w temperaturze otoczenia. Zdysocjowane komórki są ponownie zawieszane w podłożu hodowlanym i odwirowywane. Zebrane komórki są ponownie zawieszane i przelewane do nowej kolby w celu hodowli. |
|
Pożywka hodowlana: |
RPMI 1640 jest używane jako pożywka hodowlana NCI-H460. Jest ona uzupełniona 10% płodową surowicą bydlęcą, 2,1 mM stabilną glutaminą i 2,0 g/L NaHCO3. Pożywkę należy wymieniać 2-3 razy w tygodniu. |
|
Warunki wzrostu: |
Hodowle NCI-H460 są utrzymywane w temperaturze 37°C w nawilżanym inkubatorze z ciągłym dopływem 5% CO2. |
|
Przechowywanie: |
Komórki raka płuc NCI-H460 mogą być przechowywane w fazie gazowej ciekłego azotu lub w temperaturze poniżej -150°C w elektrycznej zamrażarce niskotemperaturowej. |
|
Proces zamrażania i pożywka: |
Do zamrażania i przechowywania komórek NCI-H460 stosuje się pożywkę CM-1 lub CM-ACF. Zalecana jest metoda powolnego zamrażania w celu ochrony maksymalnej żywotności komórek. |
|
Proces rozmrażania: |
Zamrożone komórki NCI-H460 są rozmrażane we wstępnie ogrzanej łaźni wodnej (w temperaturze 37°C) przez 40 do 60 sekund, aż do pozostawienia niewielkiej grudki lodu. Rozmrożone komórki są dodawane do świeżego podłoża i odwirowywane w celu usunięcia zamrożonych składników podłoża. Zebrany osad komórkowy jest ponownie zawieszany, a komórki są dozowane do nowych kolb zawierających pożywkę do wzrostu. Komórki NCI-H460 mogą potrzebować prawie 24 godzin, aby przylgnąć do powierzchni kolby. |
|
Poziom bezpieczeństwa biologicznego: |
Komórki raka płuca NCI-H460 są obsługiwane i utrzymywane w laboratoriach o poziomie bezpieczeństwa biologicznego 1. |
Zalety i wady komórek NCI-H460
NCI-H460 jest szeroko stosowaną linią komórkową w badaniach nad rakiem płuc. W tej sekcji omówione zostaną ogólne zalety i wady związane z komórkami raka płuc NCI-H460.
Zalety
Zalety linii komórkowej niedrobnokomórkowego raka płuc NCI-H460 są następujące:
-
Pochodzenie guza
Linia komórkowa NCI-H460 została uzyskana od pacjenta z rakiem wielkokomórkowym płuc, reprezentującym ten konkretny typ raka płuc. Są one wykorzystywane jako model do badania biologii raka płuc i opracowywania nowych i skutecznych metod leczenia. Komórki NCI-H460 mają potencjał nowotworowy i mogą być wstrzykiwane myszom z niedoborem odporności w celu stworzenia modeli nowotworów in vivo do badania wzrostu, rozwoju i skuteczności potencjalnych leków.
-
Wysoki wskaźnik proliferacji
NCI-H460 wykazuje wyższe tempo wzrostu niż inne linie komórkowe niedrobnokomórkowego raka płuc, takie jak A549. Ta zaleta zwiększa ich dostępność i pomaga badaczom przeprowadzać powtarzalne i czasochłonne eksperymenty.
Wady
Wady związane z komórkami raka płuc NCI-H460 są następujące:
-
Jednorodność
Komórki NCI-H460 są jednorodne, ponieważ zostały uzyskane z guza jednego pacjenta. W związku z tym generalnie brakuje im złożoności i heterogeniczności obserwowanej w guzach pacjentów.
Zastosowania badawcze komórek NCI-H460
Komórki raka płuc NCI-H460 są szeroko stosowane w badaniach związanych z rakiem płuc. Oto niektóre z ważnych zastosowań badawczych komórek NCI-H460:
- Badania nad rakiem płuc: Komórki NCI-H460 są nieocenionym modelem do badania mechanizmów komórkowych i molekularnych zaangażowanych w rozwój guza, wzrost i przerzuty. Co więcej, są one wykorzystywane do badania nadrzędnych szlaków sygnalizacyjnych, celów molekularnych i różnych mutacji genetycznych związanych z progresją raka płuc. Przeprowadzono kilka badań na komórkach NCI-H460 w celu skutecznego zbadania tych czynników. W badaniu przeprowadzonym w 2019 r. zaproponowano, że nadekspresja jądrowej wszechobecnej kazeiny i substratu kinaz zależnych od cyklin (NUCKS) jest zaangażowana we wzrost komórek nowotworowych poprzez regulację szlaku sygnałowego PI3K/AKT [1]. Podobnie, w badaniu in vitro i in vivo wykorzystano komórki NCI-H460 do zbadania roli genu eIF4E. Odkrycia ujawniły, że gen eIF4E jest zaangażowany we wzrost raka płuc i angiogenezę, i może być celem opracowania obiecujących leków przeciw rakowi płuc [2].
- Odkrywanie i opracowywanie leków: NCI-H460, ludzka linia komórkowa raka płuc, jest szeroko stosowana w badaniach nad odkrywaniem i rozwojem leków. Naukowcy wykorzystują te komórki do badania toksyczności i skuteczności nowych kandydatów na leki, terapii celowanych i terapii ukierunkowanych głównie na mutacje KRAS NCI-H460. W badaniu przeprowadzonym przez Haoyue Hu i współpracowników w 2023 r. wykorzystano komórki NCI-H460 do badania przeciwnowotworowego działania leku anlotynib. Wyniki wykazały, że anlotynib częściowo wpływał na wzrost zmutowanych komórek raka płuc KRAS poprzez hamowanie kaskady sygnalizacyjnej MEK/ERK [3]. Podobnie, związek fenolowy, kwas karnozowy, był badany pod kątem działania antyproliferacyjnego i proapoptotycznego na komórkach NCI-H460 [4].
- Oporność na leki: Linia komórkowa NCI-H460 jest idealna do badania mechanizmu oporności raka płuc na leki. Naukowcy wykorzystują te komórki do opracowywania modeli oporności na leki w celu identyfikacji podstawowych genów, czynników molekularnych i szlaków sygnałowych. Na przykład w badaniu opracowano komórki NCI-H460 oporne na pemetreksed, wielocelowy środek przeciwwolnorodnikowy, w celu zbadania podstawowych mechanizmów molekularnych oporności na pemetreksed w komórkach niedrobnokomórkowego raka płuca [5].
Zakup linii komórkowej NCI-H460: Brama do badań nad rakiem płuca
Publikacje badawcze dotyczące komórek NCI-H460
Oto kilka interesujących publikacji badawczych dotyczących linii komórkowej raka płuc NCI-H460.
W badaniu opublikowanym w Molecules (2023) zaproponowano, że naturalny α-1,6-glukan, BBWPW, z czarnej fasoli hamuje proliferację komórek NCI-H460 poprzez regulację szlaku PI3K/AKT/MAPK.
W artykule opublikowanym w Phytomedicine (2019) zbadano, że octan dioscyny-6′-O, nowy naturalny związek, wywiera działanie antyproliferacyjne na komórki raka płuc NCI-H460.
miRNA-425-5p zwiększa wzrost raka płuc poprzez oś sygnałową PTEN/PI3K/AKT
Badania BMC Pulmonary Medicine (2020) wskazują, że mikroRNA-425-5p nasila nowotworzenie raka płuc poprzez szlak PTEN/PI3K/AKT.
W artykule opublikowanym w Molecular Medicine Reports (2017) zaproponowano potencjał przeciwnowotworowy i mechanizmy leżące u podstaw związku chinalizaryny w komórkach NCI-H460 i innych komórkach raka płuc.
Badania opublikowane w Food and Function (2019) podkreślają potencjalne działanie przeciwnowotworowe ekstraktu z Eucalyptus globulus labill. przy użyciu komórek NCI-H460. Wyniki wykazały, że ekstrakt roślinny wykazał te efekty poprzez zwiększenie ekspresji p53 w komórkach NCI-H460 i modulację profilu cyklu komórkowego.
Zasoby dla linii komórkowej NCI-H460: Protokoły, filmy i nie tylko
Oto kilka zasobów internetowych dotyczących komórek raka płuc NCI-H460.
- Transfekcja komórek NCI-H460: Ten samouczek wideo jest przewodnikiem krok po kroku dotyczącym transfekcji komórek NCI-H460 plazmidowym DNA.
Poniższe linki zawierają niezbędne informacje na temat hodowli komórek H460.
- Komórki NCI-H460: Ta strona internetowa zawiera ważne informacje na temat pożywek dla komórek NCI-H460, podhodowli, procedur zamrażania i rozmrażania.
- Pasażowanie komórek NCI-H460: Ten dokument zawiera wskazówki dotyczące pasażowania i subkulturowania linii komórkowej NCI-H460. Poza tym, pomoże on również w zapoznaniu się z protokołem transfekcji komórek NCI-H460.
Eksploracja linii komórkowej NCI-H460: Najczęściej zadawane pytania i spostrzeżenia
Piśmiennictwo
- Hu, C., et al., NUCKS promuje proliferację, migrację i inwazję komórek raka płuc poprzez szlak sygnałowy Pi3k/Akt. Clinical and Investigative Medicine, 2021. 44(2): p. E55-61.
- Qi, X., et al., EGPI-1, nowy inhibitor interakcji eIF4E/eIF4G, hamuje wzrost komórek raka płuc i angiogenezę poprzez szlak sygnałowy Ras/MNK/ERK/eIF4E. Chemico-Biological Interactions, 2022. 352: p. 109773.
- Hu, H., et al., Anlotynib wywiera działanie przeciwnowotworowe na komórki raka płuc z mutacją KRAS poprzez hamowanie szlaku MEK/ERK. Cancer Management and Research, 2020: s. 3579-3587.
- Corveloni, A.C., et al., Carnosic acid exhibits antiproliferative and proapoptotic effects in tumoral NCI-H460 and nontumoral IMR-90 lung cells. Journal of Toxicology and Environmental Health, część A, 2020. 83(10): p. 412-421.
- Xu, Y.-L., et al., Ustanowienie i charakterystyka komórek NCI-H460/PMT opornych na pemetreksed. Anti-Cancer Agents in Medicinal Chemistry (dawniej Current Medicinal Chemistry-Anti-Cancer Agents), 2019. 19(6): p. 731-739.