Linia komórkowa MX-1

MX-1 to linia komórek ludzkiego gruczolakoraka piersi pochodząca z modelu ksenoprzeszczepu raka piersi u myszy atymicznych. Komórki ludzkiego gruczolakoraka piersi zostały uzyskane z guza piersi 29-letniej kobiety rasy kaukaskiej. Komórki MX1 to potrójnie ujemny rak piersi (TNBC), który jest szeroko wykorzystywany do badań nad opornością na leki, sygnalizacją komórkową, mechanizmem odpowiedzi na leki itp.

Pochodzenie i ogólne informacje na temat komórek MX-1

Przed rozpoczęciem pracy z tą linią komórkową należy zapoznać się z jej podstawowymi informacjami. Dokonamy przeglądu prawie wszystkich ogólnych informacji dotyczących linii komórkowej MX-1.

Nieśmiertelna linia komórkowa MX-1 jest nowotworową linią komórkową utworzoną z ksenoprzeszczepu guza. Komórki MX-1 są uważane za typ potrójnie ujemnego raka piersi (TNBC) [1]. Co więcej, komórki te są ujemne pod względem receptora estrogenowego i p53, ponieważ nie wykazują ekspresji tych genów.

Komórki MX-1 - modelowy system dla potrójnie ujemnego raka piersi

Warunki hodowli linii komórkowej MX-1 nie są skomplikowane. Komórki te można łatwo rozmnażać i wykorzystywać w różnych laboratoriach badawczych do badań nad transfekcją. Metoda przejściowej transfekcji powszechnie bada podstawowe mechanizmy komórkowe i wzorce ekspresji genów w tej linii komórkowej [2, 3].

Ta linia komórkowa jest dobrym systemem modelowym dla raka piersi. Może być wykorzystywana do zrozumienia mechanizmów molekularnych stojących za postępem choroby oraz do badań przesiewowych i opracowywania leków zwalczających chorobę. W szczególności, ludzka linia komórkowa gruczolakoraka piersi MX-1 może być alternatywą dla komórek TNBC, ponieważ jest ujemna pod względem receptora estrogenowego [4].

Linia komórkowa MX-1: Informacje dotyczące hodowli

• Czas podwojenia: Czas podwojenia populacji komórek INS-1 wynosi około 44 godzin.
• Adherentne lub w zawiesinie: Komórki INS-1 rosną zarówno w zawiesinie, jak i w formie przylegającej.
• Stosunek podhodowli: Komórki INS-1 są podhodowane w stosunku podziału 1:3. W skrócie, zawieszone komórki są zbierane. Komórki adherentne są płukane PBS i inkubowane z roztworem Accutase. Po odłączeniu komórki są dodawane ze świeżą pożywką. Następnie zarówno zawieszone, jak i przylegające komórki są odwirowywane i zbierane. Komórki są ostrożnie ponownie zawieszane i dozowane do nowych kolb w celu wzrostu.
• Pożywka hodowlana: RPMI 1640 jest używane do hodowli linii komórek INS-1 szczurzego insulinoma. Pożywka jest uzupełniona 10% termicznie inaktywowaną płodową surowicą bydlęcą, 2,1 mM stabilną glutaminą, 10 mM HEPES, 2,0 g/L NaHCO3 i 1 mM pirogronianem sodu.
• Warunki wzrostu: Komórki INS-1 są przechowywane w nawilżanym inkubatorze ustawionym na temperaturę 37°C i z ciągłym dopływem 5% CO2.
• Przechowywanie: Komórki INS-1 beta mogą być przechowywane w fazie gazowej ciekłego azotu lub w temperaturze poniżej -150°C w zamrażarce elektrycznej przez długi czas.
• Proces zamrażania i pożywka: Pożywki CM-1 lub CM-ACF są używane do zamrażania komórek INS-1 w procesie powolnego zamrażania. Pozwala to na spadek temperatury tylko o 1°C na minutę w celu ochrony żywotności komórek.
• Proces rozmrażania: Zamrożone komórki INS-1 są rozmrażane w łaźni wodnej wstępnie ustawionej na temperaturę 37 stopni Celsjusza przez 40 do 60 sekund. Po rozmrożeniu komórki są dodawane do świeżego podłoża i bezpośrednio wlewane do nowej kolby w celu wzrostu. Po 24 godzinach pożywka jest wymieniana w celu wyeliminowania składników pożywki zamrażającej.
• Poziom bezpieczeństwa biologicznego: Do hodowli komórek insulinoma szczura INS-1 wymagane jest laboratorium o poziomie bezpieczeństwa biologicznego 1.

Komórki MX-1: Zastosowania w badaniach

Linia komórek ludzkiego gruczolakoraka piersi MX-1 jest powszechnie stosowana w badaniach nad rakiem piersi zamiast komórek takich jak MDA-MB-231 lub MCF-7. Oto kilka specjalnych zastosowań tej linii komórkowej w badaniach nad rakiem.

Mechanizmy oporności na leki

Komórki MX-1 są wykorzystywane do badania czynników molekularnych pośredniczących w rozwoju oporności na leki na raka piersi. W badaniach szeroko wykorzystywano komórki MX-1 do tworzenia modeli opornych na leki. W badaniu opublikowanym w 2021 r. opisano wykorzystanie komórek MX-1 do wygenerowania linii komórkowej raka piersi opornej na doksorubicynę. Opracowany model komórkowy potwierdził udział transportera ABC ABCB1 i przejścia nabłonkowo-mezenchymalnego (EMT) w nabywaniu chemiooporności [5].

Ekspresja genów/ścieżka sygnalizacji komórkowej

Linia komórkowa MX-1 może być transfekowana przejściowo w celu wyjaśnienia wzorców ekspresji genów i szlaków sygnalizacji komórkowej. W badaniach wykorzystano komórki MX-1 do transfekcji shRNA (short hairpin RNA) i niekodującego RNA w celu zbadania ich wpływu na proliferację i wzrost komórek raka piersi. Ponadto wyjaśniono powiązane szlaki sygnałowe genów [2, 6].

Badanie przesiewowe potencjalnych inhibitorów

Komórki MX-1 mogą być wykorzystywane do badań przesiewowych potencjalnych leków przeciwko rakowi piersi, ponieważ naśladują mikrośrodowisko komórek nowotworowych. Badanie wykazało aktywność terapeutyczną Vinorelbine, toksyny mikrotubulowej, która wywołała śmierć komórek i poliploidię w komórkach MX-1 [4].

Zamów linię komórkową MX-1 już dziś

Zasoby dotyczące linii komórkowej MX-1: Protokoły, filmy i inne

Dostępne zasoby dotyczące metod hodowli i transfekcji są ograniczone, ale zebraliśmy dla Ciebie jak najwięcej informacji.

Protokoły hodowli komórek

Komórki MX-1 są wykorzystywane w wielu badaniach analizy transfekcji przejściowej. Tutaj wymieniliśmy kilka zasobów, które pomogą ci w protokołach transfekcji.

• Transfekcja komórek MX-1: Ta publikacja opisuje protokół transfekcji siRNA w komórkach MX-1 w celu opracowania modelu znokautowania genów.
• Transfekcja komórek ssaków: Ten artykuł zawiera wszystkie niezbędne informacje na temat metod transfekcji stosowanych w liniach komórkowych ssaków.

Mamy nadzieję, że ten artykuł dostarczył ci cennej wiedzy na temat linii komórkowej MX-1 i że lepiej zrozumiałeś, jak hodować, utrzymywać i wykorzystywać te komórki w swoich badaniach. Jeśli jesteś zainteresowany pracą z linią komórkową MX-1, nie wahaj się złożyć u nas zamówienia, aby rozpocząć swoją podróż badawczą!

Często zadawane pytania dotyczące linii komórkowej raka piersi MX-1

Piśmiennictwo

1. Stefanski, C.D. i J.R. Prosperi, Zwalczanie oporności na CHK1 w potrójnie ujemnym raku piersi: Hamowanie EGFR jako potencjalna terapia skojarzona. Cancer Drug Resistance, 2022. 5(1): p. 229.
2. Vasiyani, H., et al., The analog of cGAMP, c-di-AMP, activates STING mediated cell death pathway in estrogen-receptor negative breast cancer cells. Apoptosis, 2021. 26: p. 293-306.
3. Xiang, S., et al., Analiza proteomiczna inhibitora białkapodobnego dobiałkaapoptozy-2na proliferację komórek raka piersi. Molecular Medicine Reports, 2022. 25(3): p. 1-11.
4. Nakajima, H., C. Furukawa i J. Magae, Vinorelbine, a Microtubule Toxin, Induces Apoptosis and Polyploidy in MX-1, a Human Triple-Negative Breast Cancer Cell Line. Gan to Kagaku ryoho. Cancer & Chemotherapy, 2019. 46(3): p. 447-451.
5. Kubiliute, R., et al., Nongenotoksyczny aktywator ABCB1 tetrafenylofosfonium może przyczyniać się do oporności na doksorubicynę w linii komórkowej raka piersi MX-1. Doniesienia naukowe, 2021. 11(1): p. 1-11.
6. Jiang, R., et al., Mixomiczna analiza raka piersi: Długi niekodujący RNA linc01561 działa jako ceRNA zaangażowany w progresję raka piersi. International Journal of Biochemistry & Cell Biology, 2018. 102: p. 1-9.