Komórki Hep3B: Badania i odkrycia nad rakiem wątrobowokomórkowym

HEP3B to unieśmiertelniona linia komórek raka wątrobowokomórkowego pochodzenia ludzkiego. Jest ona szeroko stosowana w badaniach nad hepatotoksycznością i metabolizmem leków. Skuteczność transfekcji HEP3B jest znaczna; dlatego komórki te są powszechnie wykorzystywane do badania rozwoju raka wątroby, progresji i interwencji terapeutycznych. Niniejszy artykuł obejmuje wszystkie niezbędne informacje na temat linii komórkowej HEP3B, aby pomóc w pracy z nią. Obejmuje on przede wszystkim:

Ogólną charakterystykę i pochodzenie komórek HEP3B
Informacje na temat hodowli linii komórkowej HEP3B
Linia komórkowa HEP3B: Zalety i ograniczenia
Zastosowania komórek HEP3B w badaniach naukowych
Publikacje na temat linii komórkowej HEP3B
Zasoby dotyczące linii komórkowej HEP3B: Protokoły, filmy i nie tylko

1.ogólna charakterystyka i pochodzenie komórek HEP3B

Podstawowe informacje na temat linii komórkowej to jej pochodzenie i ogólna charakterystyka. Może to pomóc w podjęciu decyzji o jej wykorzystaniu w badaniach i w radzeniu sobie z nią. Ta sekcja artykułu obejmuje wszystkie istotne informacje na temat pochodzenia i charakterystyki HEP3B. Tutaj dowiesz się: Czym są linie komórkowe Hep 3B? Jakie jest pochodzenie komórek Hep3B? Jaka jest morfologia komórek HEP3B?

HEP3B, ciągła ludzka linia komórek wątrobiaka, pochodzi z tkanki wątroby 8-letniego afrykańskiego chłopca z rakiem wątrobowokomórkowym (HCC). Została stworzona przez Adena i współpracowników w 1979 r. w laboratorium Barbary B. Knowles w Instytucie Wistar w Filadelfii, USA [1].
Komórki HEP3B mają zintegrowany genom wirusa zapalenia wątroby typu B (HBV) w swoim chromosomie.
Te komórki raka wątrobowokomórkowego wykazują morfologię nabłonkową.
Komórki HEP3B mają modalną liczbę chromosomów 60. W przeciwieństwie do HepG2, nie posiadają one rearanżowanego chromosomu 1.

Jaka jest różnica między HepG2 i Hep3B?

HepG2 i HEP3B różnią się liczbą chromosomów na komórkę. HEP3B zawiera 60 chromosomów, podczas gdy komórki HepG2 mają średnio 55 chromosomów. Co więcej, HepG2 jest nienowotworowy i ujemny pod względem wirusowego zapalenia wątroby typu B, podczas gdy HEP3B jest nowotworowy i dodatni pod względem HBV.

Rak wątroby w dużym powiększeniu pod mikroskopem.

2.informacje o hodowli linii komórkowej HEP3B

Znajomość informacji na temat hodowli linii komórkowej może ułatwić pracę z nią. Ta sekcja obejmuje wszystkie kluczowe punkty dotyczące hodowli linii komórkowej HEP3B HBV, w tym: Jaki jest czas podwojenia komórek Hep3B? Jakie są warunki hodowli HEP3B? Jak hodować komórki HEP3B HCC?

Kluczowe punkty dotyczące hodowli komórek HEP3B

Czas podwojenia:	Czas podwojenia komórek HEP3B wynosi około 36 godzin.
Przylegające lub w zawiesinie:	Ta linia komórek wątrobiaka jest adherentna.
Stosunek podziału:	Komórki HEP3B są subkulturowane w stosunku od 1:2 do 1:4. Adherentne komórki HEP3B są płukane 1 x PBS, a następnie inkubowane z roztworem dysocjacyjnym Accutase. Po 8 do 10 minutach dodawana jest świeża pożywka, a komórki są odwirowywane. Zebrane komórki są następnie ostrożnie zawieszane i wlewane do kolb zawierających podłoże hodowlane w zalecanym stosunku podziału.
Podłoże hodowlane:	Do hodowli komórek HEP3B stosuje się pożywkę EMEM zawierającą 10% FBS, 2,2 g/L NaHCO3, 2 mM L-glutaminy i Earle's Balanced Salt Solution (EBSS).
Warunki wzrostu:	Komórki HEP3B są hodowane w nawilżanym inkubatorze w temperaturze 37°C z ciągłym 5% dopływem CO2.
Przechowywanie:	Zamrożone komórki HEP3B są przechowywane w temperaturze poniżej -150°C w zamrażarce elektrycznej lub w fazie gazowej ciekłego azotu.
Proces zamrażania i pożywka:	Medium do zamrażania zalecane dla komórek HEP3B to CM-1 lub CM-ACF. Komórki są zamrażane przy użyciu powolnego procesu zamrażania, który pozwala jedynie na spadek temperatury o 1°C na minutę w celu ochrony żywotności komórek.
Proces rozmrażania:	Zamrożone komórki są rozmrażane w łaźni wodnej w temperaturze 37°C przez 40-60 sekund. Później komórki te są dodawane do świeżej pożywki wzrostowej i odwirowywane w celu usunięcia zamrożonych elementów pożywki. Zebrane komórki są ponownie zawieszane i dozowane do nowych kolb w celu wzrostu.
Poziom bezpieczeństwa biologicznego:	Do hodowli komórek HEP3B wymagane jest laboratorium o poziomie bezpieczeństwa biologicznego 1.

Adherentna półprzepuszczalna warstwa komórek Hep3B w powiększeniu 10× i 20×.

3.linia komórkowa HEP3B: Zalety i ograniczenia

HEP3B jest szeroko stosowaną linią komórkową raka wątrobowokomórkowego. W tej sekcji skupimy się na niektórych kluczowych zaletach i ograniczeniach tych komórek wątrobiaka.

Zalety

Główne zalety komórek HEP3B to:

Łatwość hodowli	Komórki HEP3B nie wymagają skomplikowanej hodowli komórkowej, dzięki czemu są łatwe w obsłudze i utrzymaniu w laboratorium badawczym. Upraszcza to procedury eksperymentalne.
Wysoka wydajność transfekcji	Komórki HEP3B wykazują niezwykłą wydajność transfekcji, dzięki czemu są szeroko stosowane w manipulacjach genetycznych i badaniach związanych z ekspresją genów.
Nowotworowość	HEP3B to nowotworowa linia komórek raka wątrobowokomórkowego zdolna do tworzenia guzów po wstrzyknięciu do myszy z obniżoną odpornością. Pomaga to w badaniu progresji i rozwoju raka przy użyciu modeli ksenoprzeszczepów HEP3B.
Status HEP3B P53	Komórki HEP3B posiadają mutację genu P53 podobną do raka wątrobowokomórkowego (HCC) i innych nowotworów, co czyni je odpowiednimi do badania wpływu mutacji P53 na wzrost, rozwój i progresję raka.

Ograniczenia

Ograniczeniem związanym z linią komórkową HEP3B jest:

Model komórkowy in vitro

Linia komórkowa HEP3B służy jako model in vitro komórek raka wątrobowokomórkowego (HCC). Może on jednak nie w pełni odzwierciedlać złożoność HCC występującego w żywych organizmach. W związku z tym wyniki eksperymentów in vitro mogą różnić się od tych obserwowanych in vivo.

4.zastosowania komórek HEP3B w badaniach naukowych

Linia komórkowa HEP3B oferuje kilka zastosowań badawczych w badaniach biomedycznych. Niektóre z kluczowych zastosowań badawczych komórek HEP3B obejmują:

Biologia nowotworów: HEP3B to linia komórkowa ludzkiego raka wątrobowokomórkowego. Jest to nieoceniony model komórkowy do badania mechanizmów komórkowych i molekularnych leżących u podstaw rozwoju i progresji HCC. Naukowcy wykorzystują te komórki do badania mutacji genetycznych, procesów komórkowych i szlaków sygnalizacji komórkowej związanych z rakiem wątroby. Na przykład w badaniu wykorzystano komórki HEP3B i stwierdzono, że mikroRNA-223-3p reguluje składniki inflamasomu NLRP3, hamuje proliferację i zwiększa apoptozę komórek raka wątroby HEP3B [2].
Badania przesiewowe i rozwój leków: Linia komórkowa HEP3B jest również wykorzystywana do testowania, badań przesiewowych i opracowywania nowych środków terapeutycznych przeciwko rakowi wątroby. Co więcej, jest ona wykorzystywana do oceny toksyczności i skuteczności różnych leków i terapii przeciwnowotworowych. Naukowcy wykorzystali również te komórki wątrobiaka do badania metabolizmu leków. Naukowcy wykorzystali komórki HEP3B i ocenili potencjał cytotoksyczny ekstraktu roślinnego Cotinus coggygria na komórkach raka hepatocytów HEP3B [3].
Infekcje wirusowe: HEP3B jest linią komórkową pozytywną w stosunku do wirusa zapalenia wątroby typu B, dlatego jest wykorzystywana do badania infekcji wirusowych, które mogą prowadzić do rozwoju raka wątroby, tj. HBV i HCV. Może to pomóc w lepszym zrozumieniu infekcji wirusowych i opracowaniu potencjalnych terapii przeciwwirusowych. Na przykład w badaniu wykorzystano komórki raka hepatocytów HEP3B i zbadano znaczenie ubikwitynacji dla rozprzestrzeniania się wirusa zapalenia wątroby typu c. Wyniki sugerują, że specyficzna dla ubikwityny proteaza 15 (USP15) jest zaangażowana w rozprzestrzenianie się HCV poprzez regulację funkcji specyficznych dla hepatocytów, w tym tworzenie kropli lipidowych i translację RNA HCV [4].

430,00 €*

Treść: 1.5 milliliter

Ceny bez podatków plus koszty wysyłki

cryovial

Numer produktu: 305141

5.publikacje dotyczące linii komórkowej HEP3B

W tej części artykułu omówionych zostanie kilka interesujących publikacji badawczych dotyczących komórek HEP3B.

Regulacja apoptozy i autofagii przez luteolinę w ludzkich komórkach raka wątrobowokomórkowego HEP3B

W publikacji w Biochemical and Biophysical Research Communications (2019) zaproponowano, że indukowany związkiem luteoliny stres retikulum endoplazmatycznego może wywierać działanie przeciwnowotworowe w komórkach HEP3B pozbawionych P53 w sposób niezależny od P53.

Potencjalne działanie lupeolu wyizolowanego z Avicennia marina na komórki raka wątroby Hep3B

W badaniu opublikowanym w Archiv der Pharmazie (2021) zaproponowano pentacykliczny triterpenoid, lupeol, jako potencjalny środek przeciwnowotworowy przeciwko komórkom HEP3B.

Ekstrakt etanolowy z Cnidium monnieri (L.) Cusson indukuje zatrzymanie cyklu komórkowego i apoptozę poprzez regulację szlaku niezależnego od p53 w komórkach raka wątrobowokomórkowego HepG2 i Hep3B

Artykuł ten został opublikowany w Molecular Medicine Reports (2017). Wyniki badania wskazują, że ekstrakt etanolowy z Cnidium monnieri (L.) Cusson indukuje śmierć komórkową (apoptozę) i zatrzymanie cyklu komórkowego w komórkach raka wątrobowokomórkowego HepG2 i HEP3B poprzez regulację szlaku sygnałowego p53 i Akt/GSK-3β.

Auranofin nasila apoptozę, w której pośredniczy sulforafan, w komórkach raka wątrobowokomórkowego Hep3B poprzez inaktywację szlaku sygnałowego PI3K/Akt

W badaniu opublikowanym w Biomolecules and Therapeutics (2020) zaproponowano, że auranofin wykazuje działanie synergistyczne i promuje apoptozę komórek HEP3B za pośrednictwem sulforafanu poprzez aktywację szlaku PI3K/AKT.

Okrągły RNA-0072309 ma wpływ przeciwnowotworowy na linię komórkową Hep3B poprzez celowanie w mikroRNA-665

W tym artykule badawczym w BioFactors (2023) zaproponowano, że okrągły RNA-0072309 wywiera działanie przeciwnowotworowe w komórkach raka wątrobowokomórkowego HEP3B poprzez celowanie w miRNA-665.

6.zasoby dla linii komórkowej HEP3B: Protokoły, filmy i inne

Poniżej znajduje się kilka dostępnych zasobów dotyczących komórek HEP3B:

Transfekcja HEP3B: Ten film wyjaśnia protokół transfekcji komórek HEP3B.
Wydajność transfekcji HEP3B: Ten link pomoże ci poznać skład pożywki DMEM HEP3B, pasażowanie komórek i protokół transfekcji komórek HEP3B. Ponadto zawiera informacje dotyczące optymalizacji odczynnika lipofektaminy 3000 HEP3B w protokole transfekcji.

Poniższy link zawiera protokół hodowli komórek HEP3B:

Warunki hodowli HEP3B: Ten link pomoże zapoznać się z protokołem obsługi i utrzymywania hodowli Huh7 i HEP3B.
Komórki HEP3B: Ta strona internetowa zawiera wiele informacji na temat komórek HEP3B, w tym pożywki HEP3B, protokołu podziału komórek, rozmrażania i postępowania z kulturami proliferacyjnymi i kriokonserwowanymi.

Referencje

Puttahanumantharayappa, L.D., et al., Pochodzenie i właściwości linii komórkowych raka wątrobowokomórkowego. Japanese J Gastroenterol Res, 2021. 1(8): p. 1040.
Wan, L., et al., miRNA-223-3p reguluje NLRP3 w celu promowania apoptozy i hamowania proliferacji komórek hep3B. Medycyna eksperymentalna i terapeutyczna, 2018. 15(3): p. 2429-2435.
Danjolli-Hashani, D. i S. Selen-Isbilir, Cytotoksyczny wpływ ekstraktu Cotinus coggygria na linię komórek rakowych Hep3B. Natural Product Research, 2022: s. 1-4.
Kusakabe, S., et al., USP15 uczestniczy w rozprzestrzenianiu się wirusa zapalenia wątroby typu C poprzez regulację translacji wirusowego RNA i tworzenie kropli lipidowych. Journal of Virology, 2019. 93(6): p. 10.1128/jvi. 01708-18.