Komórki HL-60: podstawowe informacje dotyczące badań nad ostrą białaczką szpikową
HL-60 to nieśmiertelna ludzka linia komórkowa białaczki. Jest szeroko stosowana do badań nad biologią nowotworów oraz do oceny skuteczności leków przeciwnowotworowych. Ponadto może być również wykorzystywana do zrozumienia różnych mechanizmów komórkowych i molekularnych związanych z proliferacją i różnicowaniem komórek białaczkowych.
- Pożywka do hodowli
- Zobacz stronę produktu
- Czas podwojenia
- Zobacz stronę produktu
- Typ wzrostu
- Adhezyjny
- Poziom bezpieczeństwa biologicznego
- BSL-1
- Dostępne w
- Cytion — Zamów HL-60
- Linia komórkowa HL-60: pochodzenie i informacje ogólne
- Informacje o hodowli komórek HL-60
- Komórki HL-60: zalety i wady
- Zastosowania linii komórkowej HL-60 w badaniach naukowych: od onkologii po immunologię i nie tylko
- Linia komórkowa HL-60 do badań
- Komórki HL-60: publikacje naukowe
- Zasoby dotyczące linii komórkowej HL-60: protokoły, filmy i inne materiały
- Linia komórkowa HL-60: Najważniejsze pytania i odpowiedzi dla naukowców
- Referencje
- Najczęściej zadawane pytania
Linia komórkowa HL-60: pochodzenie i informacje ogólne
Linia komórkowa HL-60 stanowi kluczowy model w badaniach hematologicznych, oferując dogłębny wgląd w naturę i leczenie ostrej białaczki promielocytowej. Ten wpis na blogu zgłębia pochodzenie i charakterystyczne cechy linii komórkowej HL-60, rzucając światło na jej kluczową rolę w badaniach medycznych i rozwoju terapii.
HL-60 została po raz pierwszy wyizolowana z komórek białaczkowych 36-letniej kobiety rasy kaukaskiej, u której zdiagnozowano ostrą białaczkę promielocytową. Te pionierskie prace zostały przeprowadzone przez S.J. Collinsa i jego zespół, co stanowiło znaczący przełom, ponieważ HL-60 była pierwszą linią komórkową białaczki szpikowej, którą udało się wyizolować i hodować w zawiesinie. Osiągnięcie to otworzyło liczne możliwości badawcze w zakresie badania białaczki i innych powiązanych chorób. Pod względem cech fizycznych komórki HL-60 wykazują morfologię limfoblastyczną i są znane z tego, że rosną w zawiesinie, przybierając okrągły kształt. Wielkość tych komórek jest zróżnicowana, a ich średnica waha się od 9 do 25 μm, co odzwierciedla ich heterogeniczność. Na poziomie genomowym linia komórkowa HL-60 jest w przeważającej mierze pseudodiploidalna, a modalna liczba chromosomów wynosi 43. Co ciekawe, niewielki odsetek (6,2%) komórek wykazuje komponent 2S, co dodatkowo zwiększa złożoność ich składu genetycznego [1].
Zrozumienie tych fundamentalnych aspektów komórek HL-60 nie tylko poszerza naszą wiedzę na temat białaczki na poziomie komórkowym, ale także wspiera bieżące wysiłki badawcze mające na celu odkrycie nowych metod leczenia. W kolejnych sekcjach zbadamy, w jaki sposób unikalne właściwości linii komórkowej HL-60 przyczyniły się do znaczących postępów w badaniach medycznych.
Informacje dotyczące hodowli komórek HL-60
Hodowla komórek HL-60 jest prosta i łatwa. W tej sekcji zapoznasz się z podstawowymi informacjami, takimi jak: Jaki jest czas podwojenia linii komórkowej HL-60? Czy HL-60 to hodowla przylegająca czy zawiesinowa? Jaka jest gęstość wysiewu linii komórkowej HL-60? Jakiego podłoża używa się do hodowli HL-60?
Czas podwojenia:
Czas podwojenia komórek HL-60 wynosi około 36 do 48 godzin.
Adhezyjne czy w zawiesinie:
Komórki HL-60 rosną w hodowli zawiesinowej.
Gęstość wysiewu:
Komórki te wysiewa się w gęstości 1 x 106 komórek/ml podczas subkultury oraz 2 x 105 komórek/ml przy zakładaniu nowej hodowli.
Pożywka wzrostowa:
Do hodowli komórek HL-60 stosuje się pożywkę wzrostową RPMI 1640 z dodatkiem 10% FBS i 2,5 mM L-glutaminy. Pożywkę należy wymieniać 2–3 razy w tygodniu.
Warunki wzrostu:
Komórki HL-60 hoduje się w inkubatorze z nawilżaniem w temperaturze 37 °C i przy stężeniu CO2 wynoszącym 5 %.
Przechowywanie:
Komórki HL-60 przechowuje się w temperaturze poniżej -150 °C lub w fazie gazowej ciekłego azotu, aby zachować jak największą liczbę komórek zdolnych do życia.
Pożywka i proces zamrażania:
Do zamrażania komórek HL-60 stosuje się pożywki CM-1 lub CM-ACF. W przypadku komórek HL-60 preferowana jest metoda powolnego zamrażania.
Proces rozmrażania:
Zamrożoną fiolkę z komórkami HL-60 szybko miesza się w łaźni wodnej ustawionej na temperaturę 37 °C. Następnie komórki odwirowuje się w celu usunięcia pożywki do zamrażania. Dodaje się nową pożywkę hodowlaną, a komórki ponownie zawiesza się w celu przeniesienia do kolby w celu wzrostu.
Poziom bezpieczeństwa biologicznego:
Do pracy z hodowlami HL-60 zaleca się poziom bezpieczeństwa biologicznego 1.
Komórki HL-60: zalety i wady
Przed rozpoczęciem pracy z jakąkolwiek linią komórkową warto zapoznać się z jej zaletami i wadami. W tej części artykułu omówimy kilka zalet i wad stosowania komórek HL-60.
Zalety
Oto kilka najważniejszych zalet linii komórkowej HL-60:
- Wszechstronność: Komórki HL-60 mają zdolność różnicowania się w wiele typów komórek, w tym monocyty, makrofagi i granulocyty, w odpowiednich warunkach wzrostu. Dzięki temu są przydatne do badania różnicowania komórkowego i innych procesów komórkowych.
- Łatwość hodowli: Komórki HL-60 są łatwe w hodowli i utrzymaniu w hodowlach zawiesinowych, co czyni je wygodnym narzędziem do badania wielu procesów komórkowych.
- Model białaczki in vitro: Komórki te zostały pobrane od pacjenta z ostrą białaczką szpikową, dzięki czemu mają cechy genetyczne i molekularne podobne do tej choroby.
Wady
Wady linii komórkowej HL-60 to:
- Ograniczony potencjał różnicowania: Komórki HL-60 mogą różnicować się w niektóre linie szpikowe w odpowiedzi na bodźce, ale ich potencjał różnicowania jest ograniczony w porównaniu z komórkami pierwotnymi.
Zastosowania linii komórkowej HL-60 w badaniach naukowych: od onkologii po immunologię i nie tylko
Linia komórkowa HL-60, pochodząca od pacjenta z ostrą białaczką promielocytową, stała się fundamentem badań medycznych ze względu na swoją wszechstronność i łatwość hodowli. Te łatwe w utrzymaniu hodowle mają kluczowe znaczenie w niezliczonych zastosowaniach badawczych, a naszym celem jest zbadanie niektórych z najważniejszych z nich, uwzględniając szeroki zakres słów kluczowych związanych z badaniami, aby zapewnić kompleksowy przegląd.
Badania nad rakiem
W dziedzinie onkologii linia komórkowa HL-60 odegrała kluczową rolę w rozwikłaniu zawiłości sygnalizacji komórek nowotworowych, pogłębiając naszą wiedzę na temat ekspresji onkogenów i przyspieszając odkrywanie nowych celów terapeutycznych. Linia ta stanowi część panelu linii komórkowych białaczki wykorzystywanych do badań przesiewowych nowych środków chemioterapeutycznych. Jeden z wymownych przykładów to wykorzystanie komórek HL-60 do ustalenia właściwości przeciwbiałaczkowych związków ekstrahowanych z organizmów morskich, ujawniające zarówno działanie antyproliferacyjne, jak i proapoptotyczne [2]. Ponadto linia komórkowa ułatwiła badanie kluczowych szlaków sygnałowych, takich jak JAK/STAT, oraz ich wpływu na proliferację komórek białaczkowych, a także ocenę potencjału terapeutycznego związków bioaktywnych, takich jak tymochinon [3].
Immunologia
Komórki HL-60 stanowią solidny system in vitro do badania różnych odpowiedzi immunologicznych, w tym złożonego procesu chemotaksji oraz regulacji ekspresji kluczowych mediatorów immunologicznych. Komórki te mogą różnicować się w komórki szpikowe podobne do makrofagów i neutrofili, służąc jako wszechstronny model do badania szlaków zapalnych. Na przykład komórki podobne do makrofagów pochodzące z HL-60 zostały wykorzystane do zbadania potencjału przeciwzapalnego fitochemikaliów z rodzaju Brassica [4]. W innym badaniu różnicowanie komórek HL-60 w komórki podobne do neutrofili umożliwiło naukowcom zidentyfikowanie genów kluczowych dla różnicowania komórkowego i powiązanych funkcji immunologicznych [5].
Odkrywanie leków
Zdolności HL-60 do różnicowania się w komórki szpikowe zostały również wykorzystane w odkrywaniu leków, szczególnie w identyfikacji potencjalnych kandydatów, które mogłyby modulować szlak różnicowania, co ma kluczowe znaczenie w leczeniu białaczki. Przykładem tego są badania, w których wykorzystano linię komórkową HL-60 do oceny potencjału przeciwnowotworowego produktów naturalnych [6].
Ponadto linia komórkowa HL-60 jest wykorzystywana do badania różnych aspektów biologii linii komórek szpikowych, takich jak zrozumienie, w jaki sposób leczenie środkami takimi jak kwas retinowy może prowadzić do różnicowania monocytów lub w jaki sposób komórki te naśladują pierwotne neutrofile w tworzeniu pułapek zewnątrzkomórkowych. Zastosowanie tego modelu w wyjaśnianiu zdarzeń molekularnych nowotworów hematologicznych jest dodatkowo rozszerzone dzięki jego wykorzystaniu w badaniach panelu komórek mutacyjnych, szczególnie w kontekście analizy hotspotów p53 w białaczce.
Dla osób badających mechanikę komórkową, czas podwojenia HL-60 oraz ich reakcję na elektroporację w kanałach mikroprzepływowych, linia komórkowa stanowi niezawodną platformę badawczą.
Linia komórkowa HL-60 do badań naukowych
Komórki HL-60: Publikacje naukowe
Dostępnych jest kilka badań naukowych dotyczących komórek HL-60. Poniżej wymieniliśmy kilka godnych uwagi przykładów:
W niniejszym artykule naukowym zaproponowano działanie przeciwnowotworowe związku Stigmast-5-en-3-ol na komórki białaczki HL-60 i komórki raka piersi MCF7.
W niniejszym badaniu opisano rolę sygnalizacji JAK/STAT w proliferacji komórek HL-60. Ponadto naukowcy badają potencjał terapeutyczny związku tymochinonu przy użyciu tej linii komórkowej białaczki. Związek ten hamuje proliferację komórek i indukuje śmierć komórkową poprzez przywrócenie ekspresji regulatorów ujemnych kaskady JAK/STAT.
W niniejszym badaniu wykorzystano komórki HL-60 do uzyskania modelu komórek podobnych do makrofagów w celu zbadania działania przeciwzapalnego związków roślinnych z rodzaju Brassica.
W badaniu opublikowanym w czasopiśmie „International Immunopharmacology” opracowano komórki naśladujące neutrofile z linii komórkowej HL-60 przy użyciu dimetylosulfotlenku. W badaniu zaobserwowano, że gen ERK bierze udział w różnicowaniu tych komórek.
W niniejszym artykule badawczym analizuje się potencjał przeciwnowotworowy roślinnych związków polifenolowych, tj. kwasu galusowego i kwasu elagowego, w odniesieniu do wrażliwych na leki i opornych komórek białaczkowych HL-60.
Linia komórkowa HL-60 – zasoby: protokoły, filmy i inne materiały
W Internecie dostępnych jest wiele zasobów edukacyjnych dotyczących linii komórkowej HL-60. W tej sekcji omówimy kilka zasobów opisujących hodowlę i transfekcję tej linii komórkowej.
Protokoły hodowli komórek
Materiały opisujące metody hodowli komórek HL-60 to:
- Rozmnażanie HL-60: Ten dokument zawiera informacje na temat subkultury komórek HL-60.
- Linia komórkowa HL-60: Ta strona internetowa zawiera podstawowe informacje na temat komórek HL-60 oraz protokoły, w tym dotyczące hodowli, zamrażania i rozmrażania komórek.
Protokoły transfekcji
Oto kilka zasobów opisujących metody transfekcji wybrane dla komórek HL-60.
- Transfekcja komórek HL-60: Ten link zawiera szczegółową procedurę transfekcji komórek białaczkowych HL-60.
- Transfekcja przejściowa komórek HL-60: Niniejszy dokument zawiera przydatne informacje na temat linii komórkowej oraz szczegółowy protokół transfekcji przejściowej komórek HL-60.
Filmy dotyczące linii komórkowej HL-60
Dostępnych jest bardzo niewiele materiałów wideo dotyczących komórek HL-60.
- Pasażowanie komórek HL-60: Ten film wyjaśnia protokół subkultury komórek HL-60.
Mamy nadzieję, że ten artykuł dostarczy Państwu podstawowych informacji na temat hodowli i utrzymania linii komórkowej HL-60. Ponadto może on poszerzyć Państwa wiedzę na temat zalet wykorzystania tych komórek białaczkowych w badaniach naukowych. Jeśli planują Państwo wykorzystać tę linię komórkową, prosimy o złożenie zamówienia w naszej firmie.
Linia komórkowa HL-60: Najważniejsze pytania i odpowiedzi dla naukowców
Linia komórkowa HL-60 to linia komórkowa białaczki promielocytowej pochodząca od pacjenta cierpiącego na ostrą białaczkę promielocytową. Linia ta znajduje szerokie zastosowanie w badaniach naukowych dotyczących różnicowania komórek szpikowych oraz ekspresji onkogenów.
Kwas retinowy wywołuje różnicowanie w linii komórkowej HL-60, powodując dojrzewanie komórek do postaci komórek podobnych do granulocytów. Proces ten ma kluczowe znaczenie dla badania mechanizmów leżących u podstaw różnicowania szpikowego.
Surowica stanowi kluczowy składnik pożywki do hodowli komórek krwiotwórczych, dostarczając niezbędnych czynników wzrostu i składników odżywczych potrzebnych do namnażania się i utrzymania komórek HL-60 w hodowli.
Tak, linia komórkowa HL-60 wykazuje zdolność do chemotaksji, czyli przemieszczania się komórek w odpowiedzi na bodźce chemiczne. Dzięki temu komórki te nadają się do badań nad chemotaksją oraz do badania migracji komórek.
Linia komórkowa HL60, charakteryzująca się ekspresją onkogenów, służy jako model do badania regulacji ekspresji onkogenów oraz ich roli w powstawaniu białaczki.
Linia komórkowa HL-60 ma nieocenione znaczenie w badaniach z zakresu biologii komórkowej, zwłaszcza w badaniach nad cyklem komórkowym, procesami różnicowania komórek oraz zjawiskami molekularnymi prowadzącymi do białaczki.
Zestawy linii komórkowych białaczki umożliwiają prowadzenie badań porównawczych różnych linii komórkowych białaczki, w tym analizę ich składu genetycznego, profili mutacji, reakcji na leki oraz szlaków molekularnych biorących udział w powstawaniu białaczki, takich jak szlak MAPK.
Certyfikaty analizy i pochodzenia można zazwyczaj pobrać lub uzyskać od dostawcy lub banku komórek udostępniającego linię komórkową HL-60, co gwarantuje naukowcom, że otrzymają do swoich badań komórki o potwierdzonej autentyczności i wolne od zanieczyszczeń.
Linia komórkowa HL-60 może zostać zróżnicowana tak, aby uzyskać cechy podobne do pierwotnych neutrofili, w tym zdolność do tworzenia pułapek zewnątrzkomórkowych, co pozwala naukowcom wykorzystywać ją jako model zastępczy do badania zachowania i funkcji neutrofili.
Komórki HL-60 są wykorzystywane jako model in vitro do badań nad ostrą białaczką promielocytową, biologią linii komórek szpikowych oraz wpływem różnych związków na różnicowanie i proliferację. Wykorzystuje się je również w eksperymentach dotyczących reakcji komórkowych, takich jak chemotaksja, ekspresja onkogenów oraz wpływ mutacji na procesy komórkowe.
Skrót „HL-60” oznacza „Human Leukemia 60”. Odnosi się on do 60. linii komórkowej wyhodowanej od pacjentów z białaczką w momencie jej powstania. Skrót „HL” wskazuje na to, że dotyczy ona komórek białaczkowych pochodzenia ludzkiego.
W optymalnych warunkach wzrostu czas podwojenia komórek HL-60 wynosi około 36–48 godzin. Może się on jednak różnić w zależności od warunków hodowli i liczby pasażów komórek.
Po poddaniu komórek HL-60 działaniu 12-mirystynianu 13-octanu forbolu (PMA) zazwyczaj ulegają one różnicowaniu w typ komórek przypominający makrofagi lub monocyty. Różnicowanie to stanowi element badań nad szlakami różnicowania monocytów oraz zrozumienia mechanizmów różnicowania komórek szpikowych.
Bibliografia
- Fleck, R., S. Romero-Steiner i M. Nahm, Wykorzystanie linii komórkowej HL-60 do pomiaru zdolności opsonicznej przeciwciał przeciwko pneumokokom. Clinical and Vaccine Immunology, 2005. 12(1): s. 19-27.
- Fernando, I.S. i in., Efekty apoptyczne i antyproliferacyjne stigmast-5-en-3-olu z Dendronephthya gigantea na komórki ludzkiej białaczki HL-60 i ludzkiego raka piersi MCF-7. Toxicology in Vitro, 2018. 52: s. 297-305.
- Almajali, B. i in., Tymochinon hamuje proliferację komórek i wzmacnia apoptozę komórek białaczki HL60 poprzez ponowną ekspresję regulatorów ujemnych szlaku JAK/STAT. Asian Pacific Journal of Cancer Prevention: APJCP, 2021. 22(3): s. 879.
- Ruiz-Alcaraz, A.J. i in., Analiza potencjału przeciwzapalnego bioaktywnych związków z rodu Brassica w modelu komórek podobnych do ludzkich makrofagów, pochodzących z komórek HL-60. Biomedicine & Pharmacotherapy, 2022. 149: s. 112804.
- Wang, D. i in., ERK bierze udział w różnicowaniu i funkcjonowaniu indukowanych dimetylosulfotlenkiem komórek podobnych do neutrofili HL-60, które naśladują neutrofile zapalne. International Immunopharmacology, 2020. 84: s. 106510.
- Núñez-Sánchez, M.Á. i in., Działanie przeciwnowotworowe związków bioaktywnych pochodzących z roślin z rodzaju Brassica w komórkach białaczki szpikowej HL-60. International Journal of Molecular Sciences, 2022. 23(21): s. 13400.