Komórki DLD-1: Zastosowania i wgląd w komórki DLD-1 w badaniach nad rakiem jelita grubego
DLD-1 to ludzka linia komórek raka jelita grubego powszechnie stosowana w badaniach nad rakiem. Jest to cenne narzędzie do badania różnych aspektów raka jelita grubego, w tym rozwoju nowotworu, progresji, podstawowych mechanizmów molekularnych i odpowiedzi na środki terapeutyczne. DLD-1 jest zatem doskonałym narzędziem do zrozumienia choroby i opracowania potencjalnych strategii leczenia.
Niniejszy artykuł zawiera ważne informacje na temat linii komórkowej DLD-1, które należy poznać przed rozpoczęciem pracy z nią. Obejmuje on:
- Ogólną charakterystykę i pochodzenie komórek DLD-1
- Informacje na temat hodowli linii komórkowej DLD-1
- Linia komórkowa DLD-1: Zalety i ograniczenia
- Zastosowania badawcze linii komórkowej DLD-1
- Publikacje badawcze dotyczące komórek DLD-1
- Zasoby dotyczące linii komórkowej DLD-1: Protokoły, filmy i nie tylko
1. Ogólna charakterystyka i pochodzenie komórek DLD-1
Przed przystąpieniem do pracy nad linią komórkową, badacz w pierwszej kolejności powinien zastanowić się nad jej pochodzeniem i ogólnymi atrybutami. Niniejsza sekcja artykułu stanowi szczegółowe wprowadzenie do linii komórkowej DLD-1. Obejmie on następujące często zadawane pytania: Czym są komórki DLD-1? Co to jest nowotworowa linia komórkowa DLD-1? Jakie są mutacje linii komórkowej DLD-1? Jaki jest rozmiar komórki DLD-1? Jaka jest morfologia komórek DLD-1?
- DLD-1, linia komórkowa raka jelita grubego, pochodzi z jelita grubego 67-letniego mężczyzny z gruczolakorakiem jelita grubego. Została wyizolowana przez D.L. Dextera i współpracowników w latach 1977-1979. Ta linia komórkowa ma takie samo pochodzenie jak linie komórkowe HCT-8, HCT-15 i HRT-18.
- Podobnie jak rak jelita grubego, komórki DLD-1 posiadają fenotyp niestabilności mikrosatelitarnej [1].
- Mutacje DLD-1 obejmują KRAS, P53, BRAF, BRCA1 i BRCA2. Ze względu na status DLD-1 P53, mutacje DLD-1 BRCA, DLD-1 BRCA2 i DLD-1 KRAS, komórki te są uważane za idealne do badań nad rakiem.
- Komórki te mają morfologię podobną do nabłonka.
- Rozmiar linii komórkowej DLD-1 wynosi około 15 µm.
- Linia komórek ludzkiego raka jelita grubego DLD-1 posiada pseudodiploidalny kariotyp. Około 86% komórek posiada modalną liczbę chromosomów 46. Jednak poliploidia może również występować w 17,1% populacji komórek.
2.informacje dotyczące hodowli linii komórkowej DLD-1
Przed rozpoczęciem hodowli jakiejkolwiek linii komórkowej należy poznać jej podstawowe wymagania dotyczące hodowli. Ta sekcja podkreśli ważne punkty, których należy się nauczyć przed rozpoczęciem pracy z linią komórkową DLD-1. Obejmuje to: Jaki jest czas podwojenia DLD-1? Jakie jest podłoże do hodowli DLD-1? Jaka jest gęstość wysiewu komórek DLD-1? Jak hodować komórki DLD-1?
Kluczowe punkty dotyczące hodowli komórek DLD-1
|
Czas podwojenia: |
Czas podwojenia DLD-1 wynosi około 15 godzin. |
|
Adherentne lub w zawiesinie: |
DLD-1 to adherentna linia komórek ludzkiego raka okrężnicy. Komórki rosną w monowarstwach. |
|
Gęstość wysiewu: |
Komórki DLD-1 są wysiewane w gęstości od 1 do 2 x104 komórek/cm2. Adherentne komórki są przemywane 1x roztworem soli fizjologicznej buforu fosforanowego (PBS) i inkubowane z roztworem do pasażowania (Accutase) w temperaturze otoczenia. Po inkubacji trwającej od 8 do 10 minut, oderwane komórki są dodawane do podłoża hodowlanego i odwirowywane. Osad komórek jest następnie ostrożnie zawieszany, a komórki są przelewane do nowych naczyń hodowlanych zawierających pożywkę wzrostową. |
|
Pożywka hodowlana: |
Do hodowli komórek DLD-1 stosuje się pożywkę RPMI 1640 z dodatkami, w tym 10% płodowej surowicy bydlęcej FBS, 2,1 mM stabilnej glutaminy i 2,0 g/L NaHCO3. Pożywka powinna być wymieniana 2-3 razy w tygodniu. |
|
Warunki wzrostu: |
Hodowle DLD-1 są utrzymywane w nawilżanym inkubatorze w temperaturze 37°C z 5% podażą CO2. |
|
Przechowywanie: |
Komórki DLD-1 są przechowywane w fazie gazowej ciekłego azotu lub w elektrycznej zamrażarce niskotemperaturowej (w temperaturze poniżej -150°C). |
|
Proces zamrażania i medium: |
Do zamrażania komórek DLD-1 można użyć pożywki CM-1 lub CM-ACF. Zawsze zaleca się powolny proces zamrażania, pozwalający na stopniowy spadek temperatury o 1°C, zapobiegając w ten sposób szokowi komórek i chroniąc ich żywotność. |
|
Proces rozmrażania: |
Zamrożone komórki są rozmrażane w łaźni wodnej ustawionej na temperaturę 37°C przez 40 do 60 sekund, aż do pozostawienia małej grudki lodu. Następnie komórki są dodawane do świeżej pożywki i odwirowywane. Ten krok jest niezbędny do usunięcia składników pożywki zamrażającej z komórek. Zebrane komórki są ponownie zawieszane w pożywce wzrostowej i dozowane do kolby w celu wzrostu. |
|
Poziom bezpieczeństwa biologicznego: |
Linia komórkowa DLD-1 jest utrzymywana w laboratoriach o poziomie bezpieczeństwa biologicznego 1. |
3.linia komórkowa DLD-1: Zalety i ograniczenia
W tej części artykułu dokonamy przeglądu zalet i ograniczeń linii komórkowej raka okrężnicy DLD-1.
Zalety
Główne zalety linii komórkowej DLD-1 są następujące:
|
Model raka jelita grubego |
Komórki DLD-1 posiadają mutacje powszechnie występujące u pacjentów z rakiem jelita grubego, takie jak mutacja DLD-1 KRAS, DLD-1 BRCA i DLD-1 BRCA2. To sprawia, że są one klinicznie odpowiednim modelem komórkowym do badania tej choroby. |
|
Nowotworowa linia komórkowa |
Komórki DLD-1 są nowotworotwórcze. Mogą powodować nowotwory po wstrzyknięciu ich nagim myszom. W związku z tym naukowcy wykorzystują te komórki do opracowywania ksenoprzeszczepowych modeli nowotworów, które pomagają badać powstawanie, rozwój i progresję nowotworów in vivo. |
Ograniczenia
Ograniczenia związane z komórkami DLD-1 są następujące:
|
Heterogeniczność |
Populacje komórek raka okrężnicy DLD-1 wykazują heterogenność genetyczną i fenotypową. Może to wpływać na możliwość uogólnienia wyników badań. |
4.zastosowania badawcze linii komórkowej DLD-1
Linia komórkowa DLD-1 oferuje szereg zastosowań w badaniach nad rakiem. Niektóre z nich zostały omówione w tej sekcji.
- Badania nad rakiem: Komórki DLD-1 służą jako cenny model in vitro do zrozumienia mechanizmów molekularnych leżących u podstaw wzrostu, rozwoju i progresji raka jelita grubego. Ponadto są one wykorzystywane do badania ekspresji genów, szlaków sygnałowych i wpływu określonych mutacji genetycznych na zachowanie komórek nowotworowych. W badaniach przeprowadzonych w 2022 r. zaobserwowano, że kaskada sygnalizacyjna PI3K/Akt/YAP reguluje migrację i inwazję linii komórkowej raka jelita grubego DLD-1 [2].
- Rozwój leków: Naukowcy wykorzystują linię komórkową DLD-1 do testowania skuteczności leków przeciwnowotworowych i oceny ich potencjału w leczeniu raka okrężnicy. Pomaga to w opracowywaniu leków i skutecznym zwalczaniu choroby. W badaniu przeprowadzonym w 2022 r. wykorzystano linię komórek rakowych DLD-1 i zbadano aktywność przeciwnowotworową ftalocyjanin krzemu, związków syntetyzowanych chemicznie. Wyniki badania sugerują, że związki te są silnymi środkami przeciwnowotworowymi [3]. Co ciekawe, inne badanie wykazało potencjał przeciwnowotworowy białka P8 pochodzącego z probiotyków przy użyciu komórek DLD-1 [4].
5.publikacje badawcze dotyczące komórek DLD-1
W tej sekcji przedstawiono kilka interesujących i często cytowanych publikacji dotyczących linii komórkowej raka okrężnicy DLD-1.
Publikacja ta ukazała się w czasopiśmie Journal of Biologically Active Products from Nature (2022). Badanie wykazało, że diosmina, flawonoid, indukowała śmierć komórek w komórkach DLD-1, a także powodowała zatrzymanie cyklu komórkowego; może więc być potencjalnym środkiem przeciwnowotworowym.
Bromelaina skutecznie hamuje raka jelita grubego z mutacją Kras poprzez stymulację ferrotozy
W badaniu opublikowanym w Animal Cells and Systems (2018) zaproponowano, że bromelaina, enzym, tłumi mutację DLD-1 KRAS i wywiera silne działanie cytotoksyczne.
Ten artykuł badawczy został opublikowany w 2019 r. w czasopiśmie "Environmental Toxicology". W badaniu zbadano działanie przeciwnowotworowe naturalnego związku, Bergapten, przy użyciu linii komórek jelita grubego DLD-1.
Badanie opublikowane w Journal of Inorganic and Organometallic Polymers and Materials (2023) wykazało , że nanokompozyty kurkumina/tlenek żelaza są wysoce skuteczne przeciwko komórkom raka jelita grubego DLD-1.
Ten artykuł badawczy został opublikowany w 2020 roku w Turkish Journal of Biology. W badaniu zaproponowano, że produkt naturalny, aktywacja AKT za pośrednictwem epibrassinolidu w komórkach DLD-1, stymuluje autofagię związaną z poliaminami.
6.zasoby dla linii komórkowej DLD-1: Protokoły, filmy i inne
Poniżej znajduje się kilka zasobów dotyczących komórek DLD-1:
- Transfekcja DLD-1: Ten samouczek wideo jest kompleksowym przewodnikiem po protokole transfekcji DLD-1 in vitro.
- Komórki DLD-1: Ten artykuł badawczy krótko opisuje wymagania dotyczące hodowli komórek DLD-1, w tym pożywki i warunki hodowli. Ponadto, może on pomóc w zapoznaniu się z protokołem transfekcji stosowanym dla komórek DLD-1.
Poniższe linki zawierają protokół hodowli DLD-1, ludzkich komórek raka okrężnicy.
- Linia komórkowa DLD-1: Ta strona internetowa zawiera podstawowe informacje na temat linii komórkowej DLD-1. Pomoże ona w zapoznaniu się z różnymi protokołami hodowli komórek DLD-1, w tym podhodowli i postępowania z kulturami kriokonserwowanymi i proliferującymi.
Odniesienia
- Gavrilas, L.I., et al., Geny proapoptotyczne jako nowe cele dla pojedynczych i kombinatorycznych terapii resweratrolem i kurkuminą w raku jelita grubego. Food & Function, 2019. 10(6): p. 3717-3726.
- Takeda, T., et al., Sygnalizacja PI3K/Akt/YAP promuje migrację i inwazjękomórek raka jelita grubego DLD-1. Oncology Letters, 2022. 23(4): p. 1-9.
- Farajzadeh, N., et al., Anticancer activity of novel silicon phthalocyanines against the colorectal adenocarcinoma cell line (DLD-1). New Journal of Chemistry, 2022. 46(41): p. 19863-19873.
- An, B.C., et al., Anti-Cancer Roles of Probiotic-Derived P8 Protein in Colorectal Cancer Cell Line DLD-1. International Journal of Molecular Sciences, 2023. 24(12): p. 9857.