Komórki AGS - badanie gruczolakoraka żołądka Komórki AGS w badaniach nad rakiem

KomórkiAGS stanowią ludzką linię komórkową gruczolakoraka żołądka, która jest szeroko stosowana w badaniach biomedycznych. W szczególności jest ona wykorzystywana do badania biologii raka żołądka, w tym wzrostu guza, rozwoju, progresji i interwencji terapeutycznych. Dodatkowo, jest ona wykorzystywana do badania interakcji gospodarz-patogen.

W tym artykule omówione zostaną podstawy komórek nabłonkowych żołądka AGS. W szczególności omówione zostaną

Ogólną charakterystykę i pochodzenie komórek AGS
Informacje dotyczące hodowli linii komórkowej AGS
Linia komórkowa AGS: Zalety i ograniczenia
Zastosowania komórek AGS
Publikacje badawcze dotyczące linii komórkowej AGS
Zasoby dotyczące linii komórkowej AGS: Protokoły, filmy i nie tylko

1.ogólna charakterystyka i pochodzenie komórek AGS

Wiedza na temat pochodzenia i ogólnej charakterystyki linii komórkowej jest niezbędna przed rozpoczęciem pracy z nią. W tej sekcji omówione zostaną następujące kwestie: Czym są komórki AGS? Jakie jest pochodzenie komórek AGS? Jaka jest morfologia linii komórek nowotworowych AGS?

Linia komórkowa AGS została uzyskana z tkanki żołądka 54-letniej kobiety rasy kaukaskiej z gruczolakorakiem żołądka. Została ona wyizolowana w 1979 roku [1].
Komórki AGS mają morfologię podobną do nabłonka.
Komórki AGS nabłonka żołądka są hiperdiploidalne. Modalna liczba chromosomów w komórkach AGS wynosi 49 i występuje w prawie 60% komórek. Poliploidia występuje również w około 3,6% komórek.

Rak żołądka w przekroju pod mikroskopem.

2.informacje na temat hodowli linii komórkowej AGS

W celu prawidłowego obchodzenia się z linią komórkową i zarządzania nią należy znać podstawowe koncepcje jej hodowli. W szczególności należy dowiedzieć się: Jaki jest czas podwojenia komórek AGS? Co to jest pożywka dla komórek AGS? Jak subkulturować komórki AGS? Jakie pożywki do mrożenia są stosowane do komórek AGS nabłonka żołądka?

Kluczowe punkty dotyczące hodowli komórek AGS

Czas podwojenia:	Czas podwojenia komórek AGS wynosi od 24 do 48 godzin.
Przylegające lub w zawiesinie:	Komórki AGS są przylegające. Rosną w monowarstwach.
Gęstość wysiewu:	Komórki AGS są wysiewane w gęstości 1 x¹⁰⁴ ^komórek/cm2. Komórki tworzą zwartą monowarstwę przy tej gęstości w ciągu 3 do 5 dni. Po usunięciu starej pożywki, komórki przepłukano 1 x PBS i inkubowano z roztworem dysocjacyjnym Accutase. Odłączone komórki zawieszono ponownie w podłożu hodowlanym i odwirowano. Pelet komórek został ponownie zawieszony, a po zliczeniu komórek AGS są one dozowane do nowej kolby w celu wzrostu.
Pożywka hodowlana:	Do hodowli komórek AGS stosuje się pożywkę DMEM zawierającą 10% FBS, 4 mM L-glutaminy, 4,5 g/l glukozy, 1,5 g/l NaHCO3 i 1,0 mM pirogronianu sodu. Pożywka powinna być wymieniana 2 do 3 razy w tygodniu.
Warunki wzrostu:	Komórki AGS są hodowane w nawilżanym inkubatorze (w temperaturze 37°C) z 5% podażą CO2.
Przechowywanie:	Zamrożone komórki AGS są przechowywane w zamrażarkach elektrycznych w temperaturze poniżej -150°C lub w fazie gazowej ciekłego azotu przez dłuższy czas.
Proces zamrażania i pożywka:	Do zamrażania komórek AGS używana jest pożywka CM-1 lub CM-ACF. Zamrażanie komórek odbywa się poprzez powolny proces zamrażania, który pozwala na spadek temperatury tylko o 1°C na minutę i chroni żywotność komórek.
Proces rozmrażania:	Zamrożone komórki nabłonka żołądka są szybko mieszane w łaźni wodnej o temperaturze 37°C przez 40 do 60 sekund. Rozmrożone komórki są ponownie zawieszane w świeżym podłożu hodowlanym i przelewane do nowych kolb w celu wzrostu. Po 24-godzinnej inkubacji, pożywka jest odnawiana w celu usunięcia składników pożywki zamrażającej. W przeciwieństwie do tego, rozmrożone komórki są odwirowywane, a elementy pożywki zamrażającej są usuwane. Następnie zebrane komórki są ponownie zawieszane i dozowane do kolby zawierającej podłoże hodowlane.
Poziom bezpieczeństwa biologicznego:	Ustawienia laboratoryjne na poziomie bezpieczeństwa biologicznego 2 są niezbędne do hodowli komórek AGS.

Komórki AGS w powiększeniu 20x.

3.linia komórkowa AGS: Zalety i ograniczenia

Ta sekcja artykułu wyjaśni niektóre z kluczowych zalet i ograniczeń związanych z komórkami AGS.

Zalety

Główne zalety komórek AGS nabłonka żołądka to:

Łatwość hodowli	Linia komórek raka żołądka AGS jest łatwa do utrzymania w laboratoriach hodowli komórkowej. Nie ma żadnych skomplikowanych i wybrednych wymagań dotyczących hodowli komórek. Ponadto wykazuje dobrą charakterystykę wzrostu, co czyni ją idealnym wyborem do badania biologii raka żołądka.
Znaczenie dla raka żołądka	Komórki AGS pochodzą z ludzkiego gruczolakoraka żołądka, dzięki czemu są szeroko stosowane do badania biologii raka żołądka i interwencji terapeutycznych.

Ograniczenia

Ograniczenia związane z linią komórkową AGS są następujące:

Model komórkowy in vitro

Komórki AGS są hodowane w laboratoriach badań biomedycznych w sztucznych warunkach. W związku z tym mogą one nie w pełni odwzorowywać mikrośrodowisko raka żołądka in vivo oraz inne interakcje komórkowe i molekularne.

4.zastosowania komórek AGS

Komórki AGS są wykorzystywane w szczególności do badania biologii raka żołądka. Mają one wiele innych obiecujących zastosowań w dziedzinie biomedycyny. Niektóre z interesujących zastosowań badawczych komórek AGS są następujące:

Badanie raka żołądka: Komórki AGS są doskonałym narzędziem badawczym do badania mechanizmów komórkowych i molekularnych leżących u podstaw wzrostu, przerzutów i inwazji raka żołądka. Naukowcy wykorzystują również komórki nabłonkowe żołądka AGS do badania różnych procesów komórkowych, mutacji genetycznych i szlaków sygnałowych w rozwoju raka żołądka. Badanie Oncology Reports (2019) wykazało, że mikroRNA-183-5p.1 sprzyja proliferacji, migracji i inwazji komórek nowotworowych poprzez hamowanie kaskady sygnalizacyjnej Bcl 2/P53. Ponadto obniża on również poziom genu TPM1, aby wywierać te efekty. W związku z tym zarówno mikroRNA, jak i TPM1 są sugerowane jako skuteczne cele molekularne w opracowywaniu ukierunkowanych terapii przeciw rakowi żołądka [2].
Badanie przesiewowe leków: Komórki AGS są powszechnie wykorzystywane do badań przesiewowych nowych i skutecznych leków przeciw rakowi żołądka. Naukowcy oceniają cytotoksyczność i skuteczność potencjalnych leków przy użyciu linii komórkowej AGS. Przeprowadzono również badania nad identyfikacją nowych celów molekularnych i opracowaniem nowych terapii celowanych w walce z rakiem żołądka. W badaniach przeprowadzonych w 2021 r. wykorzystano komórki raka żołądka AGS i zbadano efekt terapeutyczny leku paklitaksel. Odkrycia ujawniły, że paklitaksel indukuje katastrofę mitotyczną, integralny mechanizm apoptozy lub śmierci komórki w komórkach AGS. Ponadto promował również autofagię w komórkach raka żołądka [3].
Interakcje gospodarz-patogen: Linia komórek rakowych AGS bada również interakcje gospodarz-patogen. Pomaga to naukowcom zrozumieć mechanizmy komórkowe i reakcje związane z infekcją. Na przykład w badaniu przeprowadzonym w 2020 r. zaobserwowano, że małe niekodujące RNA obecne w pęcherzykach błony zewnętrznej Helicobacter pylori zmniejszają wydzielanie interleukiny 8 w ludzkich komórkach AGS [4].

430,00 €*

Treść: 1.5 milliliter

Ceny bez podatków plus koszty wysyłki

cryovial

Numer produktu: 300408

5.publikacje badawcze dotyczące linii komórkowej AGS

W tej części artykułu omówimy kilka interesujących i najczęściej cytowanych publikacji naukowych dotyczących komórek AGS.

Salidrozyd indukuje apoptozę i ochronną autofagię w ludzkich komórkach raka żołądka AGS poprzez szlak PI3K/Akt/mTOR

W badaniu opublikowanym w Biomedicine & Pharmacotherapy (2020) zaproponowano, że salidrozyd, naturalny związek, indukuje ochronną autofagię i śmierć komórek w komórkach nabłonka żołądka AGS poprzez modulację szlaku sygnałowego PI3K/AKT/mTOR.

Polisacharyd Astragalus wzmocnił przeciwnowotworowe działanie apatynibu w komórkach AGS raka żołądka poprzez hamowanie szlaku sygnałowego AKT

Badanie to zostało opublikowane w Biomedicine & Pharmacotherapy (2018). Zbadano w nim synergistyczne działanie przeciwnowotworowe polisacharydu astragalus i leku apatynib w komórkach AGS. Wyniki badania wykazały, że astragalus wzmacnia działanie przeciwnowotworowe apatynibu poprzez hamowanie sygnalizacji AKT.

Curcuzedoalide przyczynia się do cytotoksyczności kłączy Curcuma zedoaria przeciwko ludzkim komórkom raka żołądka AGS poprzez indukcję apoptozy

W badaniu opublikowanym w Journal of Ethnopharmacology (2018) zaproponowano, że kurkumedoalid, naturalny związek z rośliny Curcuma zedoaria Roscoe, przyczynia się do jej potencjału cytotoksycznego przeciwko komórkom AGS.

Nadekspresja FOXA1 hamuje proliferację komórek i EMT komórek ludzkiego raka żołądka AGS

W publikacji w Gene (2018) zaproponowano, że nadregulacja FOXA1 hamuje proliferację komórek gruczolakoraka żołądka AGS oraz przejście nabłonkowe do mezenchymalnego (EMT) i inwazję.

sncRNA pakowane przez pęcherzyki błony zewnętrznej Helicobacter pylori osłabiają wydzielanie IL-8 w ludzkich komórkach

Ten artykuł badawczy został opublikowany w International Journal of Medical Microbiology w 2020 roku. W tym badaniu wykorzystano komórki AGS do badania interakcji gospodarz-patogen. Odkrycia ujawniły, że Helicobacter pylori zawiera pewne niekodujące RNA w pęcherzykach błony zewnętrznej, które wpływają na poziom IL-8 w komórkach AGS.

6.zasoby dla linii komórkowej AGS: Protokoły, filmy i nie tylko

Poniżej znajduje się kilka zasobów dotyczących komórek AGS.

Protokół transfekcji komórek AGS: Ten film jest przewodnikiem krok po kroku do nauki protokołu transfekcji komórek nabłonka żołądka AGS.

Poniższy link zawiera protokół hodowli komórek AGS.

Protokół hodowli komórek AGS: Ta strona internetowa zawiera przydatne informacje na temat mediów komórkowych AGS i protokołów hodowli komórek. W skrócie, zawiera ona protokół subhodowli komórek AGS nabłonka żołądka oraz postępowania z proliferującymi i kriokonserwowanymi kulturami AGS.
Podhodowla komórek AGS: Ta strona szczegółowo wyjaśnia procedurę podhodowli komórek AGS.

Odniesienia

Phuc, B.H., et al., Comparative genomics of two Vietnamese Helicobacter pylori strains, CHC155 from a non-cardia gastric cancer patient and VN1291 from a duodenal ulcer patient. Scientific Reports, 2023. 13(1): p. 8869.
Lin, J., et al., miRNA-183-5p. 1 promuje migrację i inwazję komórek AGS raka żołądka poprzez celowanie w TPM1 Corrigendum in/10.3892/or. 2020.7902. Raporty onkologiczne, 2019. 42(6): p. 2371-2381.
Khing, T.M., et al., Wpływ paklitakselu na apoptozę, autofagię i katastrofę mitotyczną w komórkach AGS. Scientific Reports, 2021. 11(1): p. 23490.
Zhang, H., et al., sncRNA pakowane przez pęcherzyki błony zewnętrznej Helicobacter pylori osłabiają wydzielanie IL-8 w ludzkich komórkach. International Journal of Medical Microbiology, 2020. 310(1): p. 151356.