Linia komórkowa A375 - przewodnik po badaniach nad czerniakiem

A375 to ludzka linia komórkowa czerniaka szeroko stosowana w badaniach toksykologicznych i immunoonkologicznych. Naukowcy wykorzystują tę linię komórkową do badania biologii raka i szlaków sygnalizacyjnych, testowania lub badania potencjalnych środków przeciwnowotworowych oraz opracowywania nowych i skutecznych terapii.

Pochodzenie i ogólna charakterystyka komórek A375

Wiedza na temat pochodzenia i ogólnej charakterystyki linii komórkowej może pomóc w zaplanowaniu jej wykorzystania w badaniach. W tej części artykułu omówione zostanie pochodzenie i cechy linii komórkowej A375. Na przykład, czym jest linia komórkowa A375? Jakie są cechy linii komórkowej A375? Skąd pochodzą komórki A375? Jaka jest morfologia komórek czerniaka A375? Jaki jest rozmiar komórek A375?

Linia komórek raka skóry A375 pochodzi z hodowli eksplantacyjnej guza litego 54-letniej kobiety z czerniakiem złośliwym [1].
Komórki A375 mają morfologię podobną do nabłonka.
Rozmiar komórek A375 jest stosunkowo mniejszy w porównaniu do innych linii komórkowych. Ich średnica wynosi około 12 µm.
Komórki czerniaka A375 są hipotriploidalne. Modalna liczba chromosomów dla tej linii komórkowej wynosi 62. Zazwyczaj każda komórka ma dziewięć chromosomów markerowych i jedną kopię normalnych chromosomów N2, N6 i N22.

Lekarz bada narośla na skórze osoby dorosłej pod kątem raka skóry.

Komórki A375: Informacje o hodowli komórek

Hodowle komórek A375 są łatwe w utrzymaniu. Nie mają one żadnych skomplikowanych wymagań dotyczących hodowli komórek. Ta sekcja pomoże ci zapoznać się z niezbędnymi informacjami na temat hodowli komórek. Na przykład, jaki jest czas podwojenia A375. Jakie jest podłoże linii komórkowej A375? Jaka jest gęstość wysiewu A375? Czy komórki czerniaka A375 są adherentne?

Kluczowe punkty dotyczące hodowli komórek A375

Czas podwojenia populacji:	Czas podwojenia populacji A375 wynosi 20 godzin.
Przylegające lub w zawiesinie:	A375 to adherentna linia komórek czerniaka ludzkiego.
Gęstość wysiewu:	gęstość 1 x¹⁰⁴^komórek/cm2jest idealna dla hodowli komórek A375. Komórki adherentne są płukane 1 x solą fizjologiczną w buforze fosforanowym (PBS) i inkubowane z roztworem do pasażowania (Accutase). Następnie komórki dodano do podłoża hodowlanego i odwirowano. Zebrane komórki zostały ponownie zawieszone w pożywce hodowlanej i przeniesione do nowych kolb w celu wzrostu.
Pożywka hodowlana:	DMEM jest zalecana jako idealna pożywka dla A375, gdy jest uzupełniona 10% płodową surowicą bydlęcą (FBS), 4,5 g / L glukozy, 1,5 g / L NaHCO3, 4 mM L-glutaminy i 1,0 mM pirogronianu sodu. Pożywka A375 powinna być odnawiana 2-3 dni w tygodniu.
Warunki wzrostu:	Komórki czerniaka A375 są hodowane w nawilżanym inkubatorze (37°C) z 5% podażą CO2.
Przechowywanie:	Zamrożone komórki A375 powinny być przechowywane w temperaturze poniżej -150°C w fazie gazowej ciekłego azotu lub w zamrażarce elektrycznej.
Proces zamrażania i pożywka:	Do zamrażania linii komórkowej A375 stosuje się pożywki CM-1 lub CM-ACF. Wybrano powolny proces zamrażania, który pozwala na stopniowy spadek temperatury o 1°C w celu ochrony żywotności komórek.
Proces rozmrażania:	Zamrożona fiolka z komórkami czerniaka A375 jest szybko mieszana w łaźni wodnej przez 40 do 60 sekund, aż pozostanie tylko niewielka grudka lodu. Komórki są dodawane do świeżej pożywki i odwirowywane w celu usunięcia zamrożonych elementów pożywki. Uzyskany osad komórkowy ponownie zawieszono i przelano do nowych kolb.
Poziom bezpieczeństwa biologicznego:	Hodowle A375 są obsługiwane i utrzymywane w warunkach laboratoryjnych na poziomie bezpieczeństwa biologicznego 1.

Konfluentna warstwa przylegających komórek A375 w powiększeniu 20x.

Zalety i ograniczenia linii komórkowej A375

Podobnie jak inne linie komórkowe, linia komórkowa czerniaka A375 wiąże się z unikalną kombinacją zalet i ograniczeń, co czyni ją cennym narzędziem do badań nad rakiem czerniaka. W tej sekcji wymieniono tylko kilka istotnych zalet i wad linii komórkowej A375.

Zalety

Poniżej wymieniono istotne zalety komórek A375:

Model guza czerniaka: Linia komórkowa A375 została wyprowadzona z guza czerniaka złośliwego, dzięki czemu służy jako nieoceniony model guza do badania biologii czerniaka i interwencji terapeutycznych. Komórki te wykazują właściwości podobne do czerniaka, takie jak wysoki wskaźnik proliferacji i inwazyjność.
Tumorogenność: Komórki A375 są wysoce nowotworowe, co oznacza, że mogą tworzyć guzy. Według doniesień, komórki A375 wytwarzają agresywne czerniaki amelanotyczne u myszy NIH Swiss leczonych surowicą antytymocytarną (środek immunosupresyjny).
Dobrze scharakteryzowane: A375 jest dobrze scharakteryzowaną genetycznie linią komórkową. Posiada specyficzne mutacje genetyczne, takie jak czerniak. Mutacje A375 obejmują zmianę genu A375 BRAF, co czyni ją wrażliwą na inhibitory specyficzne dla BRAF. Ten profil genetyczny sprawia, że komórki A375 są doskonałym narzędziem do badań nad rakiem w celu zbadania podstawowych szlaków molekularnych i terapii celowanych.

Ograniczenia

Ograniczenia związane z komórkami A375 są następujące:

Ograniczenia in vitro: A375 to model guza in vitro. Chociaż naśladuje on cechy czerniaka, nie może w pełni reprezentować złożoności guzów czerniaka. Dlatego należy zachować ostrożność, gdy wyniki badań in vitro są uogólniane na badania kliniczne.

Kup teraz ogniwa A375

430,00 €*

Treść: 1.5 milliliter

Ceny bez podatków plus koszty wysyłki

cryovial

Numer produktu: 300110

Zastosowania badawcze linii komórkowej A375

Linia komórkowa A375 ma szerokie zastosowanie w badaniach nad rakiem. Oto niektóre z powszechnych obszarów, w których wykorzystywane są komórki A375.

Badania nad rakiem: Komórki A375 mają szerokie zastosowanie w badaniach nad czerniakiem. Naukowcy wykorzystali te komórki do zbadania biologii raka skóry, procesów i podstawowych mechanizmów sygnalizacji komórkowej, w tym proliferacji komórek, migracji i inwazji. Może to również pomóc naukowcom w identyfikacji nowych molekularnych celów terapeutycznych. W badaniu przeprowadzonym przez Lin Zhu i współpracowników w 2019 r. wykorzystano wysoce agresywne komórki czerniaka A375 i odkryto rolę mikroRNA-3662 we wzroście i inwazji komórek czerniaka A375. Wyniki badania wskazują, że mikroRNA-3662 celuje w gen ZEB1 i reguluje wzrost komórek czerniaka in vitro i in vivo w modelu guza A375 [2]. Podobnie, badania przeprowadzone w 2018 roku wykazały, że szlaki PI3K/AKT i MAPK/ERK są zaangażowane w proliferację i przerzuty linii komórkowej A375 [3].
Odkrywanie i testowanie leków: Linia komórkowa A375 jest użytecznym modelem nowotworowym in vitro do testowania i badania potencjalnych leków przeciwnowotworowych. Naukowcy oceniają toksyczność i skuteczność nowych leków chemioterapeutycznych, związków i innych terapii z wykorzystaniem komórek czerniaka A375. Na przykład, w badaniu zbadano właściwości przeciwnowotworowe mikro- i nanocząsteczek pochodzących z grejpfruta na ludzkich komórkach raka czerniaka A375. Wyniki wykazały, że mikro- i nanocząsteczki indukują zatrzymanie cyklu komórkowego i apoptozę oraz hamują ekspresję genów w proliferacji, migracji i inwazji komórek [4].

Komórki A375: Publikacje

Poniżej wymieniono kilka istotnych publikacji naukowych dotyczących komórek A375.

Witamina D i jej niskokaloryczne analogi modulują przeciwnowotworowe właściwości cisplatyny i dakarbazyny w linii komórkowej ludzkiego czerniaka A375

Badanie to zostało opublikowane w Journal of Oncology w 2019 roku. W badaniu zaproponowano, że jednoczesne leczenie witaminą D i analogami poprawia aktywność przeciwnowotworową cisplatyny i dakarbazyny w komórkach czerniaka A375.

Ocena in vitro działania przeciwczerniakowego (linia komórkowa A375) żelu i ekstraktów z całych liści wybranych gatunków aloesu

Badania te zostały opublikowane w Journal of Herbal Medicine w 2022 roku. W badaniu tym zbadano działanie przeciwczerniakowe żelu z aloesu w komórkach czerniaka A375.

Członek rodziny fermityny 2 promuje progresję czerniaka poprzez zwiększenie wiązania p-α-Pix z Rac1 w celu aktywacji szlaku MAPK

W badaniu opublikowanym w Oncogene (2021) zaproponowano, że członek rodziny fermityny 2 (FERMT2 lub kindlin-2) sprzyja progresji czerniaka poprzez aktywację MAPK poprzez wiązanie z p-α-Pix i Rac1.

FARP1 ułatwia proliferację komórek poprzez modulację szlaku sygnałowego MAPK w czerniaku skóry

W badaniu opublikowanym w The American Journal of Dermatopathology (2019) zaproponowano, że FARP1 może ułatwiać rozwój i progresję czerniaka skóry. Dlatego może być użytecznym celem terapeutycznym.

Potencjał cytotoksyczny i apoptotyczny ekstraktów z Phyllodium elegans na ludzkich liniach komórek nowotworowych

Ten artykuł badawczy został opublikowany w Bioengineered (2019). W badaniu tym zbadano aktywność cytotoksyczną i apoptotyczną ekstraktu roślinnego Phyllodium elegans na ludzkich liniach komórkowych raka, w tym A375.

Zasoby dotyczące linii komórkowej A375: Protokoły, filmy i nie tylko

Poniżej znajduje się kilka zasobów internetowych dotyczących komórek A375.

Transfekcja komórek A375: Ten samouczek wideo pomoże ci nauczyć się transfekcji komórek A375 krok po kroku.
Hodowla komórek: Ten film zawiera bardzo przydatne informacje dotyczące hodowli linii komórkowych.

Protokoły hodowli komórek A375 są wymienione tutaj.

Linia komórkowa A375: Ten link zawiera przydatne informacje na temat hodowli i utrzymania linii komórkowej A375, w tym pożywki A375 oraz postępowania z zamrożonymi i proliferującymi kulturami A375.

Często zadawane pytania (FAQ) dotyczące komórek A375

Odniesienia

Avram, S., et al., Standaryzacja modeli czerniaka ludzkiego A375 na błonie kosmówkowo-alantoicznej zarodka kurzego i nagich myszach Balb/c. Oncol Rep, 2017. 38(1): p. 89-99.
Zhu, L., et al., MicroRNA-3662 celuje w ZEB1 i osłabia inwazję wysoce agresywnej linii komórkowej czerniaka A375. Cancer Manag Res, 2019. 11: p. 5845-5856.
Peng, X., et al., Oxyfadichalcone C hamuje proliferację i przerzuty komórek czerniaka A375 poprzez hamowanie szlaków PI3K/Akt i MAPK/ERK. Life sciences, 2018. 206: p. 35-44.
Stanly, C., et al., Mikro- i nanocząsteczki pochodzące z grejpfruta wykazują różne profile metabolomu i aktywność przeciwnowotworową w linii komórkowej czerniaka ludzkiego A375. Cells, 2020. 9(12): p. 2722.