Linia komórkowa KG-1
KomórkiKG-1 stanowią linię komórek białaczkowych pochodzenia ludzkiego, która jest szeroko stosowana w badaniach biomedycznych. Oferują one różnorodne zastosowania w badaniach immunologicznych, nowotworowych i toksykologicznych. Naukowcy wykorzystują te komórki do badania mechanizmów chorobowych i testowania potencjalnych terapii. Niniejszy artykuł zawiera wyczerpujące informacje na temat linii komórkowej KG-1, które mogą być pomocne w pracy. W szczególności omówione zostaną
- Ogólną charakterystykę i pochodzenie linii komórkowej KG-1
- Informacje na temat hodowli linii komórkowej KG-1
- Linia komórkowa KG-1: Zalety i ograniczenia
- Zastosowania komórek KG-1 w badaniach naukowych
- Publikacje na temat komórek KG-1
- Zasoby dotyczące linii komórkowej KG-1: Protokoły, filmy i nie tylko
1. Ogólna charakterystyka i pochodzenie linii komórkowej KG-1
Pochodzenie i ogólna charakterystyka linii komórkowej pomagają badaczowi w podjęciu decyzji o jej wykorzystaniu w swojej pracy. Możesz sprawdzić te informacje przed rozpoczęciem pracy. Ta sekcja artykułu dotyczy pochodzenia i charakterystyki makrofagów KG-1. Tutaj dowiesz się: Czym są komórki KG-1? Czym jest linia komórkowa KG-1a? Jakie jest pochodzenie linii komórkowej KG-1? Jaka jest morfologia KG-1?
- KG-1 to limfoblastopodobna linia komórkowa pochodząca z aspiratu szpiku kostnego mężczyzny rasy kaukaskiej (59 lat) z ostrą białaczką szpikową. Została ona stworzona przez Koefflera i Golde w 1978 roku. Komórki te znajdują się głównie na etapie dojrzewania promielocytów lub mieloblastów [1].
- Komórki KG-1 mają morfologię podobną do limfoblastów.
- Kariotyp linii komórkowej KG-1 wykazuje pseudodiploidalną modalną liczbę chromosomów.
KG-1 i KG-1a
KG-1a jest podlinią macierzystych komórek KG-1. Powstała po 35 pasażach linii komórkowej KG1. Jest ona mniej zróżnicowana w porównaniu do linii komórkowej KG-1. Co więcej, ta podlinia jest cytochemicznie, morfologicznie i funkcjonalnie mniej dojrzała w porównaniu do macierzystej linii komórkowej (KG-1).
2. Informacje na temat hodowli linii komórkowej KG-1
Ta sekcja artykułu obejmuje wszystkie niezbędne informacje na temat hodowli komórek KG-1, które mogą ułatwić pracę. Tutaj dowiesz się: Jaki jest czas podwojenia linii komórkowej KG 1? Jakie są warunki hodowli makrofagów KG-1? Jak hodować komórki KG-1?
Kluczowe punkty dotyczące hodowli komórek KG-1
|
Czas podwojenia: |
Czas podwojenia KG-1 wynosi około 45 godzin. Może się on jednak różnić w zależności od warunków hodowli. |
|
Adherentne lub w zawiesinie: |
Komórki KG-1 rosną w zawiesinie. |
|
Gęstość komórek: |
Optymalna gęstość komórek dla linii komórkowej KG1 wynosi od 1 do 3 x105 komórek/ml. W celu podhodowli zawiesinę komórek przenosi się do sterylnej probówki i odwirowuje. Zebrane komórki są następnie dodawane do świeżej pożywki i ostrożnie zawieszane. Następnie komórki są dozowane do nowych kolb i hodowane w optymalnej gęstości komórek. Komórki można rozdzielić, gdy osiągną maksymalną gęstość 1 - 2 x106 komórek/ml. |
|
Podłoże hodowlane: |
IMDM (Iscove's Modified Dulbecco's Medium) zawierająca 10% FBS, 4,5 g/L glukozy, 4 mM L-glutaminy, 1,0 mM pirogronianu sodu i 3,0 g/L NaHCO3 jest używana do hodowli komórek KG-1. Pożywkę należy wymienić po trzech dniach. |
|
Warunki wzrostu: |
Linia komórkowa KG1 AML jest hodowana w nawilżanym inkubatorze w temperaturze 37°C i przy 5% podaży CO2. |
|
Przechowywanie: |
Zamrożone komórki są przechowywane w fazie gazowej ciekłego azotu lub w temperaturze poniżej -150°C w elektrycznej zamrażarce niskotemperaturowej w celu ochrony żywotności komórek. |
|
Proces zamrażania i pożywka: |
CM-1 lub CM-ACF są odpowiednie do zamrażania komórek KG-1. Komórki są zamrażane przy użyciu powolnego procesu zamrażania w celu ochrony komórek przed szokiem. Metoda ta pozwala na stopniowy spadek temperatury o 1°C na minutę. |
|
Proces rozmrażania: |
Komórki są rozmrażane we wstępnie ogrzanej łaźni wodnej w temperaturze 37 °C, aż do pozostawienia niewielkiej grudki lodu. Rozmrożone komórki są dodawane do świeżej pożywki i odwirowywane w celu usunięcia składników pożywki zamrażającej. Pelet komórek jest ostrożnie zawieszany i wlewany do nowych kolb zawierających pożywkę wzrostową. |
|
Poziom bezpieczeństwa biologicznego: |
Laboratorium o poziomie bezpieczeństwa biologicznego 1 jest niezbędne do prowadzenia hodowli komórek KG-1. |
3. Linia komórkowa KG-1: Zalety i ograniczenia
Podobnie jak inne linie komórkowe, linia komórkowa białaczki szpikowej KG-1 ma wiele zalet i ograniczeń. W tej sekcji dowiemy się o niektórych z nich, które mogą mieć kluczowe znaczenie przy podejmowaniu decyzji o jej wykorzystaniu w badaniach.
Zalety
Głównymi zaletami komórek KG-1 są
-
Łatwość hodowli
Komórki KG-1 są łatwo hodowane w laboratoriach badawczych, oferując nieskomplikowane wymagania dotyczące hodowli komórek. Ich łatwa konserwacja i warunki wzrostu zapewniają dostępność dla szerokiego spektrum badaczy posiadających podstawowe urządzenia do hodowli komórek.
-
Model ostrej białaczki szpikowej (AML)
Pochodząca od pacjenta płci męskiej z ostrą białaczką szpikową (AML), linia komórkowa KG-1 AML służy jako cenne narzędzie do badania biologii AML i prowadzenia badań nad potencjalnymi terapiami, oferując wgląd w mechanizmy leżące u podstaw tej choroby i strategie leczenia.
ograniczenia
Ograniczenia związane z linią komórkową KG1 są następujące:
-
Model in vitro
Komórki KG-1 są cennym modelem in vitro do badań nad AML; należy jednak pamiętać, że mogą one nie w pełni odwzorowywać złożoność choroby in vivo, służąc jako uproszczony model komórkowy, który może nie obejmować wszystkich aspektów biologii AML.
4. Zastosowania komórek KG-1 w badaniach naukowych
KG-1 oferuje kilka obiecujących zastosowań w badaniach biomedycznych. Niektóre z ważnych badań wykorzystujących makrofagi KG1 obejmują:
- Badania nad rakiem: Komórki KG-1 zostały uzyskane od pacjenta z ostrą białaczką szpikową i dlatego są uważane za cenne narzędzie badawcze do badania biologii AML. Naukowcy wykorzystują te komórki do badania mechanizmów komórkowych i molekularnych napędzających rozwój AML, wzrost i oporność na leki. Obejmuje to również identyfikację i odkrywanie nowych biomarkerów, mutacji genetycznych i ścieżek sygnalizacyjnych związanych z AML. Na przykład w badaniu przeprowadzonym w 2019 r. zbadano, że długi niekodujący RNA linc00239 ułatwia oporność na doksorubicynę i złośliwe zachowanie w komórkach ostrej białaczki szpikowej KG-1. Dalsze badania wykazały, że lncRNA aktywuje sygnalizację PI3K/Akt/mTOR, aby wywierać te efekty w komórkach AML [2].
- Toksykologia: Linia komórkowa KG1 jest szeroko stosowana w badaniach toksykologicznych. Naukowcy testują toksyczność i skuteczność potencjalnych środków terapeutycznych, w tym leków chemioterapeutycznych i terapii celowanych na komórkach białaczki szpikowej KG1, aby zidentyfikować obiecujących kandydatów na leki do przyszłych ocen przedklinicznych i klinicznych. W badaniach przeprowadzonych w 2018 r. przeanalizowano toksyczność nano-niosomów zawierających doksorubicynę na linii komórkowej KG1 AML. W badaniu zaproponowano, że nano-niosom jest odpowiednim nośnikiem do dostarczania leków, ponieważ zwiększa skuteczność leczenia [3]. W innym badaniu naukowcy zbadali terapeutyczne działanie herbaty pokrzywowej przygotowanej z liści rośliny Urtica dioica. Badanie wykazało, że wodny ekstrakt z liści rośliny wywiera działanie przeciwnowotworowe na komórki ostrej białaczki szpikowej KG-1 i U937 [4].
5. Publikacje dotyczące komórek KG-1
W tej części artykułu wymieniono kilka interesujących publikacji badawczych dotyczących komórek KG-1.
Kwercetyna uwrażliwia ludzkie komórki białaczki szpikowej KG-1 na apoptozę indukowaną przez TRAIL
Ten artykuł został opublikowany w Journal of Cellular Physiology (2019). W badaniu zaproponowano, że związek kwercetyny uwrażliwia linię komórkową KG1 AML na ligand indukujący apoptozę związany z TNF (TRAIL) i może nasilać efekt cytotoksyczności indukowanej TRAIL w komórkach.
KLF8 zwiększa wzrost komórek ostrej białaczki szpikowej i glikolizę poprzez szlak AKT/mTOR
W artykule opublikowanym w Tropical Journal of Pharmaceutical Research (2022) zaproponowano, że obniżenie poziomu czynnika transkrypcyjnego 8 podobnego do krüppela hamuje proliferację komórek AML i glikolizę, sprzyjając apoptozie poprzez regulację szlaku sygnałowego AKT/mTOR.
Wpływ sorafenibu i trójtlenku arsenu na linie komórkowe U937 i KG-1: Apoptoza czy autofagia?
W badaniu opublikowanym w Cell Journal (Yakhteh) (2020) zbadano potencjalny wpływ trójtlenku arsenu i sorafenibu na komórki U937 i KG-1.
W badaniu opublikowanym w Medical Oncology (2020) oceniono OXPHOS i glikolizę jako cele terapeutyczne w linii komórkowej AML KG-1.
W publikacji Drug Design, Development, and Therapy 2020 zaproponowano, że kurkumina i talidomid synergistycznie wywierają działanie apoptotyczne w komórkach KG-1 poprzez zmniejszenie ekspresji STAT3 i Bcl-xL.
6. Zasoby dla linii komórkowej KG-1: Protokoły, filmy i nie tylko
Poniżej znajduje się kilka dostępnych zasobów internetowych dotyczących komórek KG-1.
- Subkultura komórek zawiesinowych: Ten film opisuje protokół podhodowli kultur komórek zawiesinowych, takich jak KG-1.
Poniższy link zawiera protokół hodowli komórek KG-1:
- Linia komórkowa KG-1: Ta strona internetowa zawiera podstawowe informacje na temat hodowli komórek linii KG-1. Zawiera ona informacje na temat pożywek linii komórkowej oraz protokoły subkulturowania i postępowania z kulturami kriokonserwowanymi i proliferacyjnymi.
Odniesienia
- Pelliccia, F., V. Ubertini i N. Bosco, Znaczenie molekularnej analizy cytogenetycznej przed wykorzystaniem linii komórkowych w badaniach: Przypadek linii komórkowej białaczki KG-1a. Oncol Lett, 2012. 4(2): p. 237-240.
- Yang, Y., et al., Longnon-codingRNA linc00239 promuje złośliwe zachowania i chemiooporność na doksorubicynę częściowo poprzez aktywację szlaku PI3K/Akt/mTOR w komórkach ostrej białaczki szpikowej. Oncology Reports, 2019. 41(4): p. 2311-2320.
- Bahrami-Banan, F., et al., Przygotowanie i badanie nanosomów zawierających doksorubicynę oraz ocena jej toksyczności na linii komórkowej ostrej białaczki szpikowej KG-1. Payavard Salamat, 2018. 12(4): p. 309-323.
- Hodroj, M.H., et al., Herbata z pokrzywy hamuje wzrost komórek ostrej białaczki szpikowej in vitro poprzez promowanie apoptozy. Nutrients, 2020. 12(9): p. 2629.