Opublikowano: 2023 r. | Ostatnia aktualizacja: maj 2026 r.

Zrozumienie pojęcia „numeru pasażu”

Pojęcie „numeru pasażu” ma kluczowe znaczenie w hodowli komórkowej i odnosi się do liczby razy, kiedy linia komórkowa została poddana subkulturowi lub przeniesiona do świeżej pożywki po jej początkowym ożywieniu z kriokonserwacji lub otrzymaniu z referencyjnego banku komórek. Wskaźnik ten ma kluczowe znaczenie w śledzeniu pochodzenia i historii hodowli komórkowej.

Przegląd procesu

W rutynowej praktyce hodowli komórek, gdy komórki osiągną określoną gęstość, są przenoszone do nowego podłoża w celu utrzymania wzrostu i zapobiegania nadmiernej konfluencji. Każde takie przeniesienie jest rejestrowane jako pasaż.
Tradycyjnie, gdy otrzymywaliśmy linię komórkową, na przykład w 60. pasażu od deponenta, kontynuowaliśmy od tego numeru pasażu, zwiększając go przy każdym subkulturowaniu. Praktyka ta, choć pozwalała zachować ciągłość historyczną, często prowadziła do wysokich liczb pasaży już od samego początku. Biorąc pod uwagę szerokie i często trwające dziesiątki lat wykorzystanie niektórych linii komórkowych, takich jak linia HeLa założona w 1951 roku, nie jest możliwe określenie całkowitej liczby pasażów od momentu powstania linii komórkowej.
Aby zwiększyć przejrzystość i jakość naszych procesów hodowli komórkowej, na początku 2023 r. zmieniliśmy to podejście. Obecnie, rozpoczynając hodowlę z nowej fiolki, niezależnie od liczby pasażów od dawcy, resetujemy licznik i zaczynamy liczyć od nowa od pasażu pierwszego dla każdej wyprodukowanej partii.

Uzasadnienie

Pasażowanie jest niezbędną procedurą zapewniającą zdrowie i użyteczność hodowli komórkowych do celów badawczych. Gdy komórki ulegają nadmiernemu rozrostowi, dochodzi do zahamowania kontaktowego, co zmniejsza tempo ich proliferacji, co może niekorzystnie wpłynąć na wyniki eksperymentów. Aby złagodzić te problemy, firma Cytion wdraża rygorystyczne kontrole gęstości komórek, przy których odbywa się subkulturowanie, utrzymując w ten sposób niską liczbę pasażów podczas produkcji swoich linii komórkowych. Środek ten pomaga zapobiegać niekorzystnym skutkom nadmiernego pasażowania, takim jak anomalie morfologiczne, zmiany tempa wzrostu i dryf genetyczny, które mogą powodować znaczne odchylenia komórek od ich pierwotnego stanu. Długotrwałe subkulturowanie może również zwiększać ryzyko zakażenia mikrobiologicznego.

Nasza obietnica

Zapewniamy, że komórki dostarczane naukowcom są jak najbardziej zbliżone do pierwotnego składu genetycznego i cech fenotypowych, co zwiększa wiarygodność danych eksperymentalnych. Ponadto, dzięki skrupulatnemu dokumentowaniu każdego pasażowania, firma Cytion przyczynia się do identyfikowalności i powtarzalności badań, co odzwierciedla wysokie standardy praktyki w zakresie hodowli komórkowej. Zachęcamy naukowców do prowadzenia dokładnej dokumentacji dotyczącej liczby pasażów, zarówno na naczyniach hodowlanych, jak i w notatnikach laboratoryjnych, jako punktu odniesienia dla stanu i historii ich hodowli komórkowych.

Wskazówki i typowe błędy

Przestrzeganie prawidłowego protokołu jest niezbędne, ale równie ważne może być zrozumienie typowych pułapek. Procedury hodowli komórkowej są wrażliwe na niewielkie odchylenia w technice, czasie i jakości odczynników. Poniższe wskazówki odzwierciedlają najlepsze praktyki zalecane przez zespół naukowy Cytion w oparciu o bogate doświadczenie w hodowli komórkowej.

Zawsze przed użyciem odgrzewaj odczynniki do temperatury 37°C, aby zminimalizować szok termiczny dla komórek.
Pracuj szybko, ale ostrożnie — ogranicz do minimum czas, przez jaki komórki przebywają poza inkubatorem.
Należy stosować certyfikowane odczynniki, które przeszły testy na obecność mykoplazm, aby uniknąć zanieczyszczenia, które może wpłynąć negatywnie na wyniki eksperymentu.
Dokumentuj każdy etap, w tym numer pasażowania, datę i obserwacje morfologii komórek.
Przed zwiększeniem skali eksperymentu należy zweryfikować protokół za pomocą niewielkiego eksperymentu pilotażowego, aby uniknąć marnowania drogich odczynników.

Zalecane odczynniki Cytion

Cytion oferuje gamę sprawdzonych odczynników do hodowli komórkowej, zaprojektowanych specjalnie do obsługi tego protokołu. Wszystkie odczynniki są testowane pod kątem działania na powszechnie stosowanych liniach komórkowych i są dostępne wraz z pełną dokumentacją. Odwiedź stronę cytion.com/Media-Reagents, aby zapoznać się z pełną ofertą.