Linia komórkowa T98G
Komórki T98G stanowią ludzką linię komórkową glejaka wielopostaciowego, powszechnie stosowaną w badaniach biomedycznych. Komórki te wykorzystuje się w szczególności w badaniach nad rakiem mózgu w celu zbadania kluczowych komórek i czynników molekularnych przyczyniających się do jego rozwoju. Ponadto pomagają one naukowcom w selekcjonowaniu i testowaniu nowych leków przeciwnowotworowych, co może przyczynić się do rozwoju terapii.
Ogólna charakterystyka i pochodzenie linii komórkowej T98G
Ta część artykułu pomoże Ci zapoznać się z podstawowymi cechami linii komórkowej T98G. Zawiera informacje dotyczące pochodzenia linii komórkowej, jej morfologii, wielkości oraz ploidii. Ponadto pozwoli w pełni zrozumieć następujące pytania: Czym są komórki T98G? Jakiego typu komórkami są komórki T98G? Skąd pochodzi linia T98G? Jakie są cechy charakterystyczne linii komórkowej T98G? Czym jest linia komórkowa glejaka wielopostaciowego T98G U87?
- Linia komórkowa T98G została wyhodowana przez G.H. Steina. Składa się z komórek podobnych do fibroblastów, które pochodziły z tkanki mózgowej 61-letniego mężczyzny rasy kaukaskiej cierpiącego na glejaka wielopostaciowego [1].
- Komórki T98G nie są nowotworowe; nie powodują nowotworów po wstrzyknięciu myszom nagim. Mają jednak tendencję do namnażania się przy odpowiednim osadzeniu w hodowli komórkowej.
- Komórki te mają morfologię podobną do fibroblastów.
- Linia komórkowa glejaka wielopostaciowego T98G charakteryzuje się hiperpentaploidią. Modalna liczba chromosomów waha się od 128 do 132. Wyższe ploidie mogą występować u 1,39% populacji komórek.
T98 a T98G
Obie są ludzkimi liniami komórkowymi glejaka wielopostaciowego i mają podobne pochodzenie. Jedyną różnicą między tymi liniami komórkowymi jest liczba chromosomów. Linia T98G posiada prawie dwukrotnie większą liczbę chromosomów niż linia T98. Dlatego T98G jest znana jako wariant poliploidalny linii T98.
T98G a U87
U87 i T98G to ludzkie linie komórkowe glejaka wielopostaciowego wykorzystywane w badaniach nad rakiem mózgu. U87 wykazuje bardziej agresywny fenotyp w porównaniu z GBM T98G.
2. Informacje dotyczące hodowli linii komórkowej T98G
Przed rozpoczęciem pracy z linią komórkową należy koniecznie zapoznać się z informacjami dotyczącymi jej hodowli. Pomoże to w łatwym i wygodnym posługiwaniu się linią komórkową w laboratorium. Należy wiedzieć: Jaki jest czas podwojenia linii komórkowej T98G? Jakie podłoże hodowlane jest najlepsze dla komórek T98G? Jakie są cechy wzrostu komórek T98G? Jaka jest gęstość wysiewu komórek T98G? Jak zamraża się komórki T98G?
Kluczowe informacje dotyczące hodowli komórek T98G
Czas podwojenia:
Przybliżony czas podwojenia komórek T98G wynosi 40 godzin. Może się on różnić w zależności od warunków hodowli.
Komórki przylegające czy w zawiesinie:
Komórki T98G są komórkami przylegającymi. Przyczepiają się one do dna naczyń hodowlanych i tworzą monowarstwy.
Współczynnik podziału:
Komórki T98G są poddawane subkulturowaniu przy współczynniku podziału od 1:2 do 1:5. W tym celu komórki są najpierw przemywane buforem 1X PBS, a następnie inkubowane z roztworem do pasażowania (Accutase) przez 8 do 10 minut w temperaturze otoczenia. Po inkubacji odłączone komórki dodaje się do świeżej pożywki wzrostowej i odwirowuje. Następnie zebrany osad komórkowy ostrożnie zawiesza się ponownie, a komórki przenosi się do kolby hodowlanej zawierającej pożywkę wzrostową.
Pożywka wzrostowa:
Do hodowli komórek T98G stosuje się pożywkę EMEM zawierającą 10% surowicy płodowej bydlęcej, 2 mM L-glutaminy, 2,2 g/l NaHCO₃ oraz EBSS. Pożywkę należy wymieniać 3–4 razy w tygodniu.
Warunki hodowli:
Komórki T98G są hodowane w nawilżanym inkubatorze ustawionym na temperaturę 37°C i podłączonym do źródła CO₂.
Przechowywanie:
Zamrożone komórki można przechowywać w temperaturze poniżej -150°C lub w fazie gazowej ciekłego azotu, aby zapewnić ich żywotność w dłuższej perspektywie.
Proces zamrażania i pożywka:
Zaleca się zamrażanie komórek T98G w pożywkach do zamrażania komórek CM-1 lub CM-ACF. W tym celu zaleca się stosowanie powolnego procesu zamrażania, który pozwala na spadek temperatury o zaledwie 1 °C na minutę. Zapobiega to szokowi termicznemu komórek i pozwala zachować ich żywotność.
Proces rozmrażania:
Zamrożone komórki delikatnie rozmraża się, umieszczając je w podgrzanej wcześniej łaźni wodnej o temperaturze 37 stopni Celsjusza na 40 do 60 sekund. Następnie zawiesza się je w świeżym podłożu hodowlanym i przenosi do nowej kolby. Po 24 godzinach inkubacji podłoże wymienia się w celu usunięcia składników podłoża do zamrażania.
Poziom bezpieczeństwa biologicznego:
Hodowle T98G są utrzymywane w laboratorium o poziomie bezpieczeństwa biologicznego 1.
Opublikowano: 2023 | Ostatnia aktualizacja: maj 2026
- Linia komórkowa T98G: zalety i wady
- Zastosowania komórek T98G
- 2. Informacje dotyczące hodowli linii komórkowej T98G
- Kluczowe kwestie dotyczące hodowli komórek T98G
- Ogólna charakterystyka i pochodzenie linii komórkowej T98G
- 5. Publikacje naukowe dotyczące komórek T98G
- Materiały dotyczące komórek T98G: protokoły, filmy i inne
- Najczęściej zadawane pytania
Linia komórkowa T98G: zalety i wady
T98G to szeroko stosowana linia komórkowa glejaka wielopostaciowego pochodzenia ludzkiego. Wyróżnia ją kilka zalet i wad w porównaniu z innymi liniami. W tej części artykułu omówiono kilka z nich.
Zalety
Zalety komórek T98G to:
-
Dobrze scharakteryzowana
Linia komórkowa o ugruntowanej pozycji i dobrze scharakteryzowana. Jest przedmiotem szeroko zakrojonych badań i posiada bogatą dokumentację w literaturze.
-
Model in vitro
Odzwierciedla cechy glejaka wielopostaciowego, najbardziej agresywnego nowotworu mózgu. Stanowi cenne narzędzie do badań nad chorobą, zrozumienia jej biologii oraz opracowywania metod leczenia.
Wady
Wady związane z komórkami T98G to:
-
Heterogenność
Heterogenność genetyczna populacji komórek T98G może prowadzić do niespójności wyników eksperymentalnych i utrudniać interpretację danych.
Zastosowania komórek T98G
Linia komórkowa T98G jest cennym narzędziem wykorzystywanym w badaniach nad rakiem. Poniżej wymieniono kilka głównych zastosowań badawczych komórek T98G:
- Badania nad rakiem: Linia komórkowa T98G stanowi cenne narzędzie do badania biologii nowotworów typu glejaka wielopostaciowego. Komórki te są wykorzystywane głównie do badania skomplikowanych szlaków molekularnych leżących u podstaw rozwoju i progresji glejaka wielopostaciowego. Ponadto wykorzystuje się je do identyfikacji mutacji genetycznych napędzających wzrost guza oraz innych mechanizmów komórek nowotworowych. Yang Chen i współpracownicy prowadzili badania nad tymi komórkami i odkryli, że nadekspresja miRNA-21 obniża poziom PDCD4 (białko programowanej śmierci komórkowej 4) w komórkach T98G. Prowadzi to do zahamowania apoptozy komórek T98G, w której pośredniczy PDCD4. Badanie to sugeruje zatem, że miRNA-21 może stanowić potencjalny cel w opracowywaniu terapii [2]. Podobnie jak w tym badaniu, Fanqiang Kong i współpracownicy zbadali rolę mikroRNA-15a w proliferacji i inwazji komórek glejaka wielopostaciowego T98G. Odkryli, że miRNA-15a-5p wspomaga te procesy komórkowe poprzez oddziaływanie na cząsteczkę adhezyjną komórek 1 (CADM1) [3].
- Badania leków i rozwój terapii: Komórki T98G stanowią doskonały model glioblastomu in vitro do przesiewania nowych leków oraz platformę do oceny skuteczności potencjalnych terapii przeciwnowotworowych. Naukowcy testują również różnorodne związki i terapie w celu zidentyfikowania i odkrycia kandydatów na leki o najbardziej obiecujących właściwościach przeciwglioblastomowych. Prowadzi to do opracowywania nowych leków i strategii leczenia, dając nadzieję pacjentom cierpiącym na glejaka wielopostaciowego. W ramach jednego z takich badań zbadano potencjał przeciwnowotworowy naturalnego związku o nazwie korilagina w linii komórkowej T98G GBM opornej na temozolomid. Wyniki badania sugerują, że korilagina w połączeniu z temozolomidem wywołuje w komórkach silniejsze działanie antyproliferacyjne i antyapoptotyczne [4].
5. Publikacje naukowe dotyczące komórek T98G
Poniżej przedstawiono kilka interesujących i często cytowanych publikacji naukowych dotyczących T98G, linii komórkowej glejaka wielopostaciowego.
W tej publikacji w czasopiśmie „ASN Neuro” (2019) zbadano działanie przeciwnowotworowe agonisty REV-ERB o nazwie SR9009 na komórki glejaka wielopostaciowego T98G.
W tym artykule naukowym opublikowanym w czasopiśmie „Neurochemical Research” (2019) wysunięto hipotezę, że maślan sodu i kwercetyna synergistycznie hamują ochronną autofagię w komórkach T98G i zwiększają apoptozę komórkową.
W badaniu opublikowanym w czasopiśmie „Genes” (2023) poddano sekwencjonowaniu RNA linię komórkową T98G przystosowaną do hipoksji i zaproponowano IRE1 (enzym wymagający inozytolu 1) jako obiecujący cel terapeutyczny.
Artykuł ten został opublikowany w czasopiśmie „Oncology Letters” (2017). W badaniu wykazano, że miRNA-548c-3p oddziałuje na onkogeny T98G (c-Myb), hamując w ten sposób proliferację i migrację komórek T98G.
W artykule opublikowanym w czasopiśmie „Journal of Medicinal Plants Research” (2011) wysunięto hipotezę, że ekstrakt chloroformowy z Dracocephalum tanguticum wywiera działanie antyproliferacyjne na komórki T98G poprzez modulowanie genów kaspazy-3, Bax i p21.
Materiały dotyczące komórek T98G: protokoły, filmy i inne
Poniżej wymieniono dostępne materiały zawierające protokoły hodowli i transfekcji komórek T98G.
- Transfekcja komórek T98G: Ten artykuł naukowy zawiera protokół transfekcji komórek T98G. Krótko wyjaśnia metodę i wymaganą odczynnik.
Poniższe linki znacznie ułatwią Ci zapoznanie się z protokołem hodowli komórek T98G i usprawnią pracę z nimi.
- Komórki T98G: Ta strona internetowa zawiera kluczowe informacje dotyczące protokołów hodowli komórek T98G, w tym subkulturowania oraz postępowania z hodowlami proliferacyjnymi i kriokonserwowanymi. Ponadto pomoże Ci ona zapoznać się z pożywkami do hodowli komórek, warunkami hodowli oraz czasem podwojenia.
Bibliografia
- Haehl, E., Odporność na promieniowanie wywołana przez komórki śródbłonka w glejaku wielopostaciowym. 2021, Uniwersytet w Tybindze.
- Chen, Y. i in., MikroRNA-21 hamuje ekspresję supresora nowotworowego PDCD4 w ludzkich komórkach glejaka wielopostaciowego T98G. „Cancer Letters”, 2008. 272(2): s. 197–205.
- Kong, F. i in., MikroRNA-15a-5p sprzyja proliferacji i inwazji komórek glejaka wielopostaciowego T98G poprzez oddziaływanie na cząsteczkę adhezyjną komórek 1. Oncology Letters, 2021. 21(2): s. 1–1.
- Milani, R. i in., Corilagina indukuje wysoki poziom apoptozy w opornej na temozolomid linii komórkowej glejaka T98G. Oncol Res, 2018. 26(9): s. 1307–1315.